目的观察凉血解毒方对咪喹莫特(imiquimod,IMQ)诱导的银屑病样小鼠模型中活化的树突状细胞(dendritic cells,DCs)的干预作用。方法将小鼠采用数字表法随机分为正常对照组,模型组,凉血解毒方高(Liangxue Jiedu groups with high,LXJD-H)...目的观察凉血解毒方对咪喹莫特(imiquimod,IMQ)诱导的银屑病样小鼠模型中活化的树突状细胞(dendritic cells,DCs)的干预作用。方法将小鼠采用数字表法随机分为正常对照组,模型组,凉血解毒方高(Liangxue Jiedu groups with high,LXJD-H)、中(medium,LXJD-M)、低(low,LXJD-L)剂量组和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)组,观察小鼠背部皮损变化。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度评分(psoriasis area and severity index,PASI)标准进行评分,光镜下观察皮肤组织形态学变化,测量表皮厚度;免疫荧光及组织化学法检测皮损中Ki67、CD3、CD11c的表达情况;流式细胞术检测脾脏中DCs数量;酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中细胞因子的量;采用RT-PCR法检测皮损组织中DCs相关受体基因水平;Western blotting法检测小鼠皮损中TLR7/TLR8通路相关蛋白表达。结果凉血解毒方明显降低皮损PASI评分及表皮厚度、减少炎性反应细胞的浸润;抑制皮损中TLR7通路相关蛋白的表达;体内外降低白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)、Toll样受体(Toll-like receptors,TLR7)、TLR8及IL^(-1)2p40 mRNA表达及下调IL-23、IL^(-1)β细胞因子分泌水平。结论凉血解毒方可以改善IMQ诱导的银屑病样小鼠皮损,且可以改善皮损中T淋巴细胞及DCs的浸润,同时抑制DCs的活化。展开更多
目的:观察养血解毒汤对咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损的干预作用。方法:STAT3转基因小鼠24只,随机分为正常对照组、模型组、养血解毒汤组和甲氨蝶呤组,每组6只,采用外用咪喹莫特诱导皮肤银屑病样模型。分别观察皮损面积和...目的:观察养血解毒汤对咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损的干预作用。方法:STAT3转基因小鼠24只,随机分为正常对照组、模型组、养血解毒汤组和甲氨蝶呤组,每组6只,采用外用咪喹莫特诱导皮肤银屑病样模型。分别观察皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI),光镜下观察皮损组织形态学变化和表皮层厚度;采用皮肤水分油分测试笔检测小鼠背部皮肤水分和油分含量;免疫组织化学法检测皮损中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和T淋巴细胞表面标志CD3表达;采用实时荧光定量PCR技术检测皮损Th17类细胞因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)mRNA表达;采用Western blot检测皮损STAT3通路蛋白(STAT3、p-STAT3、JAK3、p-JAK3和SOCS3)的表达水平。结果:(1)养血解毒汤组PASI评分明显低于模型组,HE染色观察发现养血解毒汤组皮损表皮增生较模型组少,角化不全的细胞明显减少,皮肤厚度降低(P<0.01);(2)养血解毒汤组皮损油分和水分含量均明显高于模型组(P<0.05);(3)养血解毒汤组PCNA阳性表达远低于模型组(P<0.01);(4)养血解毒汤组脾脏重量低于模型组(P<0.05);(5)养血解毒汤组Th17相关因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)表达水平均低于模型组,此外,p-STAT3和p-JAK3表达量亦低于模型组,而SOCS3的表达高于模型组。结论:养血解毒汤可能通过抑制STAT3的磷酸化,减少Th17相关因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)的分泌,由此改善咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损改变。展开更多
目的:观察清肝凉血解毒汤对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损的影响。方法:72只BALB/c雄性小鼠,背部刮毛,随机分为空白对照组(Control,C)、模型组(Model,M)、复方高、中、低剂量组(Q-H、Q-M、Q-L)和甲氨蝶呤组(MTX),5%咪喹莫特乳膏(I...目的:观察清肝凉血解毒汤对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损的影响。方法:72只BALB/c雄性小鼠,背部刮毛,随机分为空白对照组(Control,C)、模型组(Model,M)、复方高、中、低剂量组(Q-H、Q-M、Q-L)和甲氨蝶呤组(MTX),5%咪喹莫特乳膏(IMQ)背部涂抹诱导皮肤银屑病样模型。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度(Psoriasis area and severity index,PASI)每日进行评分,光镜下观察皮损组织形态学变化及表皮厚度;免疫组化法检测皮损中增殖细胞核抗原(PCNA)和T淋巴细胞表面标志CD3表达情况;免疫荧光法检测皮损中CD11c+树突状细胞、CGRP、NK1R表达情况;采用实时PCR技术检测皮损中IL-1β、IL-12、IL-23mRNA表达水平;Western Blot法检测皮损中NPY、SP蛋白表达情况。结果:M组小鼠皮损上鳞屑厚,浸润明显,红斑重;其余各组皮损均较M组轻。与C组相比,M组表皮厚度、PCNA、CD^+_3 T细胞及CD11c+细胞均明显增多(P<0.01);复方各剂量组与M组相比,表皮薄,PCNA、CD^+_3及CD11c+细胞表达个数均明显减少。M组与C组相比,CGRP、NK-1R、IL-1β、IL-12、IL-23mRNA表达均上调(P<0.05),而余组与M组相比,上述指标的表达均明显下调(P<0.05)。与C组相比,M组小鼠皮损中NPY的表达增高(P<0.05),MTX、Q-M、Q-L组表达量较M组低(P<0.05);M、MTX、Q-M、Q-L组皮损中SP的表达均呈增高趋势,但组间相比无统计学差异。结论:清肝凉血解毒汤可通过下调NK-1R、NPY、CGRP的表达水平改善小鼠银屑病样皮损,降低表皮细胞的异常增殖、减轻炎症细胞的浸润,减少皮肤中CD11c+树突状细胞数量,下调IL-1β、IL-12、IL-23细胞因子的表达水平。展开更多
目的:观察逍遥散对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损及抑郁神经递质的干预作用。方法:36只BALB/c雄性小鼠,背部备皮后,随机分为空白对照组、模型组、甲氨蝶呤组和逍遥散高、中、低剂量组,每组6只,除对照组外,其余各组小鼠均用5%咪喹...目的:观察逍遥散对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损及抑郁神经递质的干预作用。方法:36只BALB/c雄性小鼠,背部备皮后,随机分为空白对照组、模型组、甲氨蝶呤组和逍遥散高、中、低剂量组,每组6只,除对照组外,其余各组小鼠均用5%咪喹莫特乳膏背部涂抹诱导银屑病样皮损。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)每日进行评分;糖水偏好实验探究小鼠行为学差异;光镜下观察皮损组织形态学变化及表皮厚度;免疫组化法检测皮损组织中T淋巴细胞表面标志物CD3的表达情况;免疫荧光法检测皮损组织中Ki67的表达情况;液相色谱-质谱联用技术检测小鼠海马区和下丘脑区脑组织肾上腺素(adrenaline,AD)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutylic acid,GABA)、谷氨酸(glutamate,Glu)、多巴胺(dopamine,DA)及其代谢产物等单胺类神经递质的含量。结果:逍遥散各剂量组和甲氨蝶呤组背部皮损较模型组有明显改善,PASI评分和表皮厚度均显著低于模型组(P<0.05);逍遥散各剂量组和甲氨蝶呤组皮损中Ki67和CD3^+T细胞的水平均较模型组显著降低(P<0.05);空白对照组及逍遥散高剂量组小鼠体质量变化幅度显著小于模型组(P<0.05);空白对照组糖水偏好率显著高于模型组(P<0.01),甲氨蝶呤组和逍遥散各剂量组糖水偏好率与模型组相比有一定升高趋势,但差异无统计学意义;空白对照组小鼠海马区3,4-二羟基苯乙酸(3,4-Dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)、AD、GLU和GABA含量较模型组显著降低(P<0.05),DA和高香草酸(homovanillic acid,HVA)的含量较模型组无显著差异(P>0.05);空白对照组小鼠下丘脑区AD和GABA的含量较模型组显著降低(P<0.05),DA、DOPAC、HVA和GLU的含量较模型组无显著差异(P>0.05);逍遥散高剂量组下丘脑区AD的含量较模型组显著增多(P<0.01),逍遥散低剂量组下丘脑区HVA的含量较模型组显著增多(P<0.01)。PASI评分与海马区DOPAC、AD、GLU和GABA的含量及下丘脑区AD、GLU和GABA的含量呈负相关,即小鼠背部皮损越严重,抑郁相关神经递质表达量越低,表明小鼠抑郁程度加重。结论:逍遥散可以改善咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损,并改善其抑郁行为学,上调抑郁症相关单胺类神经递质的表达水平;咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损与抑郁相关神经递质的表达呈负相关,其抑郁程度随银屑病皮损的加重而加重。展开更多
目的:建立脾虚银屑病样小鼠模型,观察健脾养血解毒方对其银屑病样皮损的干预作用,并探讨其作用机制。方法:首先采用苦寒泻下结合营养限制法建立脾虚小鼠模型,持续15 d后检测验证,将脾虚小鼠随机分为单纯脾虚组(脾虚-Ctr)、脾虚银屑病样...目的:建立脾虚银屑病样小鼠模型,观察健脾养血解毒方对其银屑病样皮损的干预作用,并探讨其作用机制。方法:首先采用苦寒泻下结合营养限制法建立脾虚小鼠模型,持续15 d后检测验证,将脾虚小鼠随机分为单纯脾虚组(脾虚-Ctr)、脾虚银屑病样组(脾虚-IMQ)、阳性对照组(脾虚-MTX)和健脾养血解毒方高、中、低剂量组(JPYXJD-H,M,L),采用咪喹莫特诱导-银屑病样模型。观察各组小鼠皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI),每日拍照记录;治疗后第6天取材,计算脾脏及淋巴结指数;光镜下观察皮损组织形态学变化及表皮层厚度;免疫组织化学法检测皮损中PCNA和CD3的表达;流式细胞术检测小鼠淋巴结中Treg和Th17细胞数量;RT-PCR技术检测皮损中IL-17A、IL-23、FOXP3、ROR-γt等相关基因表达水平;采用Western Blotting法检测pSTAT3、PPAR-γ通路蛋白表达水平。结果:(1)与对照组小鼠相比,脾虚组表观指征异常明显,血清中D-木糖含量明显降低(P<0.05)。(2)与脾虚-Ctr组相比,脾虚-IMQ组小鼠皮损PASI评分及表皮厚度明显增加,皮损部位PCNA、CD3阳性个数显著增多,IL-17、IL-23、ROR-γt和IFN-γ等炎症因子的表达明显升高,pSTAT蛋白表达升高而PPAR-γ蛋白表达降低的趋势明显。JPYXJD-H、M、L组与其相比各项指标均有不同程度改善,其中以JPYXJD-L组最为显著。结论:健脾养血解毒方在传统理血解毒的基础上强调健脾治法,并依此增加健脾药的使用,从而发挥对脾虚证-银屑病复合模型小鼠皮损的干预作用,通过PPAR-γ/pSTAT3通路调节Treg/Th17之间的免疫平衡可能是其有效作用机制之一。展开更多
目的:观察绿原酸对咪喹莫特诱导的银屑病样模型小鼠皮损组织炎症抑制作用及对神经递质SP/NK1R表达的影响。方法:45只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组(Control)、模型组(Model)、甲氨蝶呤组(Methotrexate,MTX)及绿原酸高剂量组(Chlorog...目的:观察绿原酸对咪喹莫特诱导的银屑病样模型小鼠皮损组织炎症抑制作用及对神经递质SP/NK1R表达的影响。方法:45只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组(Control)、模型组(Model)、甲氨蝶呤组(Methotrexate,MTX)及绿原酸高剂量组(Chlorogenic acid high does,CAH)、低剂量组(Chlorogenic acid low does,CAL)。除空白组外,各组小鼠背部备皮后,每日先给予药物灌胃治疗,间隔2小时后小鼠背部涂抹5%咪喹莫特乳膏造模,造模与治疗连续6 d。参考银屑病皮损面积和疾病严重程度(Psoriasis area and severity index,PASI)进行评分;旷场和高架十字迷宫实验进行小鼠行为学评分;HE染色观察皮损组织病理变化,并测量表皮厚度;免疫组化法检测皮损组织中增殖细胞核抗原(PCNA)和T淋巴细胞表面标志CD3的表达情况;Western blot法检测皮损中P物质(Substance,SP)、神经激肽1受体(Neurokinin 1 receptor,NK1R)蛋白表达情况。结果:与模型组小鼠相比,绿原酸各剂量组和甲氨喋呤组小鼠背部皮损明显改善,PASI评分和表皮厚度均显著降低(P<0.05),PCNA和CD3^+T淋巴细胞表达显著减少(P<0.05),中央区路程、中央区时间、进入中央区频率和开臂停留时间比例均有一定升高趋势,皮损组织NK1R和SP蛋白的表达降低。CD3^+T淋巴细胞浸润程度与神经递质NK1R和SP的表达呈正相关。结论:咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损炎症程度与焦虑相关神经递质SP及其受体NK1R的表达呈正相关;绿原酸可能通过降低焦虑相关神经递质的表达,改善咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠焦虑行为学,抑制皮肤炎症反应,缓解银屑病样小鼠皮损病理改变,值得进一步研究。展开更多
目的观察搜风顺气丸对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损的影响。方法40只雄性BALB/c小鼠,背部备皮后,采用数字表法随机分为空白对照组、模型组、搜风顺气丸组和甲氨蝶呤组,背部涂抹5%(质量分数)咪喹莫特乳膏诱导银屑病样模型。采用...目的观察搜风顺气丸对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损的影响。方法40只雄性BALB/c小鼠,背部备皮后,采用数字表法随机分为空白对照组、模型组、搜风顺气丸组和甲氨蝶呤组,背部涂抹5%(质量分数)咪喹莫特乳膏诱导银屑病样模型。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度评分(psoriasis area and severity index,PASI)标准进行评分,测量表皮层厚度,记录形态学变化;免疫荧光染色观察小鼠皮损中Ki-67的表达;免疫组织化学检测皮损CD3+T淋巴细胞的表达;流式细胞术检测胸腺及双侧腹股沟淋巴结CD3+T细胞中CD4+、CD8+、γδT+及RORγt+γδT+细胞比例;Western blotting法检测小鼠皮损中磷酸化信号转导与转录激活因子3(phosphorylated-signal transduction and activators of transcription 3,p-STAT3)蛋白的表达水平。结果与模型组相比,搜风顺气丸组小鼠皮损PASI评分及表皮厚度均明显降低、脾指数(P<0.01),胸腺指数及淋巴结指数(P<0.01)均明显低于模型组、Ki-67阳性细胞表达个数减少(P<0.01);真皮CD3+T细胞表达均低于模型组(P<0.01);双侧腹股沟淋巴结及胸腺CD3+T细胞中CD4+T细胞比例差异无统计学意义,但γδT+及RORγt+γδT+细胞比例均明显减少;并且搜风顺气丸组小鼠皮损中p-STAT3表达下降(P<0.01)。结论搜风顺气丸可能通过抑制RORγt的表达作用,从而减少IL-17A的分泌,改善皮损,表明搜风顺气丸对炎性因子的抑制作用可能是其治疗银屑病的机制之一。展开更多
文摘目的观察凉血解毒方对咪喹莫特(imiquimod,IMQ)诱导的银屑病样小鼠模型中活化的树突状细胞(dendritic cells,DCs)的干预作用。方法将小鼠采用数字表法随机分为正常对照组,模型组,凉血解毒方高(Liangxue Jiedu groups with high,LXJD-H)、中(medium,LXJD-M)、低(low,LXJD-L)剂量组和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)组,观察小鼠背部皮损变化。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度评分(psoriasis area and severity index,PASI)标准进行评分,光镜下观察皮肤组织形态学变化,测量表皮厚度;免疫荧光及组织化学法检测皮损中Ki67、CD3、CD11c的表达情况;流式细胞术检测脾脏中DCs数量;酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中细胞因子的量;采用RT-PCR法检测皮损组织中DCs相关受体基因水平;Western blotting法检测小鼠皮损中TLR7/TLR8通路相关蛋白表达。结果凉血解毒方明显降低皮损PASI评分及表皮厚度、减少炎性反应细胞的浸润;抑制皮损中TLR7通路相关蛋白的表达;体内外降低白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)、Toll样受体(Toll-like receptors,TLR7)、TLR8及IL^(-1)2p40 mRNA表达及下调IL-23、IL^(-1)β细胞因子分泌水平。结论凉血解毒方可以改善IMQ诱导的银屑病样小鼠皮损,且可以改善皮损中T淋巴细胞及DCs的浸润,同时抑制DCs的活化。
文摘目的:观察养血解毒汤对咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损的干预作用。方法:STAT3转基因小鼠24只,随机分为正常对照组、模型组、养血解毒汤组和甲氨蝶呤组,每组6只,采用外用咪喹莫特诱导皮肤银屑病样模型。分别观察皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI),光镜下观察皮损组织形态学变化和表皮层厚度;采用皮肤水分油分测试笔检测小鼠背部皮肤水分和油分含量;免疫组织化学法检测皮损中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和T淋巴细胞表面标志CD3表达;采用实时荧光定量PCR技术检测皮损Th17类细胞因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)mRNA表达;采用Western blot检测皮损STAT3通路蛋白(STAT3、p-STAT3、JAK3、p-JAK3和SOCS3)的表达水平。结果:(1)养血解毒汤组PASI评分明显低于模型组,HE染色观察发现养血解毒汤组皮损表皮增生较模型组少,角化不全的细胞明显减少,皮肤厚度降低(P<0.01);(2)养血解毒汤组皮损油分和水分含量均明显高于模型组(P<0.05);(3)养血解毒汤组PCNA阳性表达远低于模型组(P<0.01);(4)养血解毒汤组脾脏重量低于模型组(P<0.05);(5)养血解毒汤组Th17相关因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)表达水平均低于模型组,此外,p-STAT3和p-JAK3表达量亦低于模型组,而SOCS3的表达高于模型组。结论:养血解毒汤可能通过抑制STAT3的磷酸化,减少Th17相关因子(IL-17A、IL-17C、IL-22和RORγt)的分泌,由此改善咪喹莫特诱导的STAT3转基因小鼠银屑病样皮损改变。
文摘目的:观察清肝凉血解毒汤对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损的影响。方法:72只BALB/c雄性小鼠,背部刮毛,随机分为空白对照组(Control,C)、模型组(Model,M)、复方高、中、低剂量组(Q-H、Q-M、Q-L)和甲氨蝶呤组(MTX),5%咪喹莫特乳膏(IMQ)背部涂抹诱导皮肤银屑病样模型。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度(Psoriasis area and severity index,PASI)每日进行评分,光镜下观察皮损组织形态学变化及表皮厚度;免疫组化法检测皮损中增殖细胞核抗原(PCNA)和T淋巴细胞表面标志CD3表达情况;免疫荧光法检测皮损中CD11c+树突状细胞、CGRP、NK1R表达情况;采用实时PCR技术检测皮损中IL-1β、IL-12、IL-23mRNA表达水平;Western Blot法检测皮损中NPY、SP蛋白表达情况。结果:M组小鼠皮损上鳞屑厚,浸润明显,红斑重;其余各组皮损均较M组轻。与C组相比,M组表皮厚度、PCNA、CD^+_3 T细胞及CD11c+细胞均明显增多(P<0.01);复方各剂量组与M组相比,表皮薄,PCNA、CD^+_3及CD11c+细胞表达个数均明显减少。M组与C组相比,CGRP、NK-1R、IL-1β、IL-12、IL-23mRNA表达均上调(P<0.05),而余组与M组相比,上述指标的表达均明显下调(P<0.05)。与C组相比,M组小鼠皮损中NPY的表达增高(P<0.05),MTX、Q-M、Q-L组表达量较M组低(P<0.05);M、MTX、Q-M、Q-L组皮损中SP的表达均呈增高趋势,但组间相比无统计学差异。结论:清肝凉血解毒汤可通过下调NK-1R、NPY、CGRP的表达水平改善小鼠银屑病样皮损,降低表皮细胞的异常增殖、减轻炎症细胞的浸润,减少皮肤中CD11c+树突状细胞数量,下调IL-1β、IL-12、IL-23细胞因子的表达水平。
文摘目的:观察逍遥散对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损及抑郁神经递质的干预作用。方法:36只BALB/c雄性小鼠,背部备皮后,随机分为空白对照组、模型组、甲氨蝶呤组和逍遥散高、中、低剂量组,每组6只,除对照组外,其余各组小鼠均用5%咪喹莫特乳膏背部涂抹诱导银屑病样皮损。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)每日进行评分;糖水偏好实验探究小鼠行为学差异;光镜下观察皮损组织形态学变化及表皮厚度;免疫组化法检测皮损组织中T淋巴细胞表面标志物CD3的表达情况;免疫荧光法检测皮损组织中Ki67的表达情况;液相色谱-质谱联用技术检测小鼠海马区和下丘脑区脑组织肾上腺素(adrenaline,AD)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutylic acid,GABA)、谷氨酸(glutamate,Glu)、多巴胺(dopamine,DA)及其代谢产物等单胺类神经递质的含量。结果:逍遥散各剂量组和甲氨蝶呤组背部皮损较模型组有明显改善,PASI评分和表皮厚度均显著低于模型组(P<0.05);逍遥散各剂量组和甲氨蝶呤组皮损中Ki67和CD3^+T细胞的水平均较模型组显著降低(P<0.05);空白对照组及逍遥散高剂量组小鼠体质量变化幅度显著小于模型组(P<0.05);空白对照组糖水偏好率显著高于模型组(P<0.01),甲氨蝶呤组和逍遥散各剂量组糖水偏好率与模型组相比有一定升高趋势,但差异无统计学意义;空白对照组小鼠海马区3,4-二羟基苯乙酸(3,4-Dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)、AD、GLU和GABA含量较模型组显著降低(P<0.05),DA和高香草酸(homovanillic acid,HVA)的含量较模型组无显著差异(P>0.05);空白对照组小鼠下丘脑区AD和GABA的含量较模型组显著降低(P<0.05),DA、DOPAC、HVA和GLU的含量较模型组无显著差异(P>0.05);逍遥散高剂量组下丘脑区AD的含量较模型组显著增多(P<0.01),逍遥散低剂量组下丘脑区HVA的含量较模型组显著增多(P<0.01)。PASI评分与海马区DOPAC、AD、GLU和GABA的含量及下丘脑区AD、GLU和GABA的含量呈负相关,即小鼠背部皮损越严重,抑郁相关神经递质表达量越低,表明小鼠抑郁程度加重。结论:逍遥散可以改善咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损,并改善其抑郁行为学,上调抑郁症相关单胺类神经递质的表达水平;咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损与抑郁相关神经递质的表达呈负相关,其抑郁程度随银屑病皮损的加重而加重。
文摘目的:建立脾虚银屑病样小鼠模型,观察健脾养血解毒方对其银屑病样皮损的干预作用,并探讨其作用机制。方法:首先采用苦寒泻下结合营养限制法建立脾虚小鼠模型,持续15 d后检测验证,将脾虚小鼠随机分为单纯脾虚组(脾虚-Ctr)、脾虚银屑病样组(脾虚-IMQ)、阳性对照组(脾虚-MTX)和健脾养血解毒方高、中、低剂量组(JPYXJD-H,M,L),采用咪喹莫特诱导-银屑病样模型。观察各组小鼠皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI),每日拍照记录;治疗后第6天取材,计算脾脏及淋巴结指数;光镜下观察皮损组织形态学变化及表皮层厚度;免疫组织化学法检测皮损中PCNA和CD3的表达;流式细胞术检测小鼠淋巴结中Treg和Th17细胞数量;RT-PCR技术检测皮损中IL-17A、IL-23、FOXP3、ROR-γt等相关基因表达水平;采用Western Blotting法检测pSTAT3、PPAR-γ通路蛋白表达水平。结果:(1)与对照组小鼠相比,脾虚组表观指征异常明显,血清中D-木糖含量明显降低(P<0.05)。(2)与脾虚-Ctr组相比,脾虚-IMQ组小鼠皮损PASI评分及表皮厚度明显增加,皮损部位PCNA、CD3阳性个数显著增多,IL-17、IL-23、ROR-γt和IFN-γ等炎症因子的表达明显升高,pSTAT蛋白表达升高而PPAR-γ蛋白表达降低的趋势明显。JPYXJD-H、M、L组与其相比各项指标均有不同程度改善,其中以JPYXJD-L组最为显著。结论:健脾养血解毒方在传统理血解毒的基础上强调健脾治法,并依此增加健脾药的使用,从而发挥对脾虚证-银屑病复合模型小鼠皮损的干预作用,通过PPAR-γ/pSTAT3通路调节Treg/Th17之间的免疫平衡可能是其有效作用机制之一。
文摘目的:观察绿原酸对咪喹莫特诱导的银屑病样模型小鼠皮损组织炎症抑制作用及对神经递质SP/NK1R表达的影响。方法:45只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组(Control)、模型组(Model)、甲氨蝶呤组(Methotrexate,MTX)及绿原酸高剂量组(Chlorogenic acid high does,CAH)、低剂量组(Chlorogenic acid low does,CAL)。除空白组外,各组小鼠背部备皮后,每日先给予药物灌胃治疗,间隔2小时后小鼠背部涂抹5%咪喹莫特乳膏造模,造模与治疗连续6 d。参考银屑病皮损面积和疾病严重程度(Psoriasis area and severity index,PASI)进行评分;旷场和高架十字迷宫实验进行小鼠行为学评分;HE染色观察皮损组织病理变化,并测量表皮厚度;免疫组化法检测皮损组织中增殖细胞核抗原(PCNA)和T淋巴细胞表面标志CD3的表达情况;Western blot法检测皮损中P物质(Substance,SP)、神经激肽1受体(Neurokinin 1 receptor,NK1R)蛋白表达情况。结果:与模型组小鼠相比,绿原酸各剂量组和甲氨喋呤组小鼠背部皮损明显改善,PASI评分和表皮厚度均显著降低(P<0.05),PCNA和CD3^+T淋巴细胞表达显著减少(P<0.05),中央区路程、中央区时间、进入中央区频率和开臂停留时间比例均有一定升高趋势,皮损组织NK1R和SP蛋白的表达降低。CD3^+T淋巴细胞浸润程度与神经递质NK1R和SP的表达呈正相关。结论:咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损炎症程度与焦虑相关神经递质SP及其受体NK1R的表达呈正相关;绿原酸可能通过降低焦虑相关神经递质的表达,改善咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠焦虑行为学,抑制皮肤炎症反应,缓解银屑病样小鼠皮损病理改变,值得进一步研究。
文摘目的观察凉血解毒汤与凉血汤对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损的影响,并探讨配伍解毒药在银屑病中的作用机制。方法 BALB/c小鼠55只,背部剃毛,采用数字表法随机分为空白对照组、模型组、凉血汤组、凉血解毒汤组和甲氨蝶呤组,采用5%(质量分数)咪喹莫特乳膏背部涂抹诱导皮肤银屑病样模型。观察皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)并评分,光镜下观察皮损组织形态学变化及表皮层厚度;采用皮肤水分油分测试笔检测小鼠背部皮肤水分和油分含量;采用免疫组织化学染色法观察小鼠皮损中增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和T淋巴细胞表面标志CD3表达;采用RT-PCR技术检测皮损中白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、IL-23及IL-1βmRNA表达。结果与模型组相比,凉血解毒汤和凉血汤组小鼠皮损PASI评分及表皮厚度均明显降低、PCNA阳性细胞百分比下降、CD3阳性T细胞表达个数减少、IL-1βmRNA相对表达量相对下降(P<0.05);此外凉血解毒汤还可使小鼠皮损中水分(16.980±2.739)、油分(7.750±1.209)含量有效升高(P<0.05),IL-17、IL-23 mRNA相对表达量明显下降(P<0.05),对皮损PASI评分及表皮厚度、PCNA阳性细胞百分比(5.66±0.057)和CD3阳性T细胞表达个数(10.670±0.193)的影响也更为显著(P<0.01)。结论凉血解毒汤与凉血汤均可抑制IL-1βmRNA的表达,减少炎性浸润,改善咪喹莫特诱导的银屑病样炎性反应皮损;而配伍解毒药的凉血解毒汤,则可进一步通过抑制IL-23、IL-17的表达,提升其在改善皮肤屏障功能及皮损组织形态变化、减缓表皮角质形成细胞增生、减少角化不全细胞及降低炎性反应浸润程度等方面的干预作用,从而缓解咪喹莫特诱导的银屑病样皮损改变,提示解毒中药对炎性反应及相关因子的抑制作用可能是其治疗银屑病的潜在机制之一。
文摘目的观察搜风顺气丸对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型皮损的影响。方法40只雄性BALB/c小鼠,背部备皮后,采用数字表法随机分为空白对照组、模型组、搜风顺气丸组和甲氨蝶呤组,背部涂抹5%(质量分数)咪喹莫特乳膏诱导银屑病样模型。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度评分(psoriasis area and severity index,PASI)标准进行评分,测量表皮层厚度,记录形态学变化;免疫荧光染色观察小鼠皮损中Ki-67的表达;免疫组织化学检测皮损CD3+T淋巴细胞的表达;流式细胞术检测胸腺及双侧腹股沟淋巴结CD3+T细胞中CD4+、CD8+、γδT+及RORγt+γδT+细胞比例;Western blotting法检测小鼠皮损中磷酸化信号转导与转录激活因子3(phosphorylated-signal transduction and activators of transcription 3,p-STAT3)蛋白的表达水平。结果与模型组相比,搜风顺气丸组小鼠皮损PASI评分及表皮厚度均明显降低、脾指数(P<0.01),胸腺指数及淋巴结指数(P<0.01)均明显低于模型组、Ki-67阳性细胞表达个数减少(P<0.01);真皮CD3+T细胞表达均低于模型组(P<0.01);双侧腹股沟淋巴结及胸腺CD3+T细胞中CD4+T细胞比例差异无统计学意义,但γδT+及RORγt+γδT+细胞比例均明显减少;并且搜风顺气丸组小鼠皮损中p-STAT3表达下降(P<0.01)。结论搜风顺气丸可能通过抑制RORγt的表达作用,从而减少IL-17A的分泌,改善皮损,表明搜风顺气丸对炎性因子的抑制作用可能是其治疗银屑病的机制之一。
