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高等级生物安全实验室生物安全型高压蒸汽灭菌器风险评估分析
1
作者 高鹏 曹国庆 +4 位作者 陈紫光 戎戈 曹冠朋 谭海波 张得英 《暖通空调》 2025年第2期162-166,144,共6页
高等级生物安全实验室风险评估是实验室风险管理的核心部分,目前部分高等级生物安全实验室对各种生物安全关键防护设备的风险管理、风险评估、风险应对等的理解和认识处于理论层面上,风险评估结果和实验室安全管理体系存在部分脱节现象... 高等级生物安全实验室风险评估是实验室风险管理的核心部分,目前部分高等级生物安全实验室对各种生物安全关键防护设备的风险管理、风险评估、风险应对等的理解和认识处于理论层面上,风险评估结果和实验室安全管理体系存在部分脱节现象。生物安全型高压蒸汽灭菌器是各种生物安全关键防护设备中的一种,采用故障树分析法针对生物安全型高压蒸汽灭菌器进行有效的风险评估,找出其风险因子,给出适当的风险应对措施,可以对该类型设备的风险管理提供支持。 展开更多
关键词 生物安全实验室 生物安全型高压蒸汽灭菌器 风险评估 故障树分析 风险管理 风险应对
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荚膜B型多杀性巴氏杆菌外膜囊泡生物学特性分析与免疫效果评价
2
作者 高洁 李晓成 +3 位作者 穆杨 张慧 魏荣 李劼 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2168-2175,共8页
旨在探究荚膜B型多杀性巴氏杆菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)的生物学特性及免疫保护效果。本研究利用超高速离心和密度梯度离心方法提取荚膜B型多杀性巴氏杆菌的OMVs,通过透射电子显微镜(transmission electron microscope... 旨在探究荚膜B型多杀性巴氏杆菌外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)的生物学特性及免疫保护效果。本研究利用超高速离心和密度梯度离心方法提取荚膜B型多杀性巴氏杆菌的OMVs,通过透射电子显微镜(transmission electron microscope, TEM)观察OMVs的形态及大小,采用SDS-PAGE、LC-MS/MS分析OMVs主要蛋白,以蛋白定量试剂测定其蛋白浓度以及鲎试剂法测定其内毒素含量,然后以新西兰白兔为动物模型,开展免疫保护效果评价。结果显示,荚膜B型多杀性巴氏杆菌的OMVs呈完整规则的球形结构,平均粒径108.3 nm,其中的蛋白质主要集中在33、40、53 ku处,内毒素含量为3.31×10^(6) EU·mL^(-1),用制备的OMVs以50μg·只^(-1)免疫新西兰白兔2次后,免疫兔血清抗体效价可达1∶405 600,外周血淋巴细胞IFN-γ和IL-4转录水平明显升高,对荚膜B型多杀性巴氏杆菌攻击的保护效率为75%。综上表明,荚膜B型多杀性巴氏杆菌的外膜囊泡具有良好的免疫保护效果,有作为候选疫苗的潜质,本研究为外膜囊泡疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 外膜囊泡 生物学特性 疫苗
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高温组织降解设备在高等级生物安全实验室的应用与风险管控
3
作者 谭海波 石凤霞 +2 位作者 郭飞 邹国华 曹志刚 《暖通空调》 2024年第8期197-200,66,共5页
对高温组织降解设备在高等级生物安全实验室中的应用进行了分析,重点介绍了该设备的原理和技术性能,并以实际运行的121个批次(共计约203 t)的动物残体的无害化处理过程数据为基础,整理、总结了高温组织降解设备在实际使用过程中的性能... 对高温组织降解设备在高等级生物安全实验室中的应用进行了分析,重点介绍了该设备的原理和技术性能,并以实际运行的121个批次(共计约203 t)的动物残体的无害化处理过程数据为基础,整理、总结了高温组织降解设备在实际使用过程中的性能和特点,针对高温组织降解设备在实际运行维护过程中的关键风险点进行了识别并给出了具体的管控措施。 展开更多
关键词 高等级生物安全实验室 高温组织降解设备 碱解 风险识别 管控措施 湿法工艺 干法工艺
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副结核分支杆菌MAP0862-2191c串联蛋白的原核表达及反应原性检测
4
作者 郝彦儒 郭号 +3 位作者 谢梦圆 陈坚 杨文洁 徐晓静 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期28-34,共7页
副结核分支杆菌(MAP)由于其胞内寄生的特性,难以在早期发现,待发现后往往已经不再具备治疗价值,因此寻找并制备出能同时在早晚期都有显著标识作用的抗原蛋白,有利于更好地诊断牛副结核病。通过生物信息学软件对MAP的MAP0862和MAP2191c... 副结核分支杆菌(MAP)由于其胞内寄生的特性,难以在早期发现,待发现后往往已经不再具备治疗价值,因此寻找并制备出能同时在早晚期都有显著标识作用的抗原蛋白,有利于更好地诊断牛副结核病。通过生物信息学软件对MAP的MAP0862和MAP2191c两种蛋白进行一级、二级及三级结构上的理化性质、抗原性分析及相对位置建模预测,判断串联蛋白重组表达的可行性;使用柔性肽短链序列(G4S)2连接两段序列构建了重组表达载体pET30a-MAP6291c,将其导入至BL21(DE3)原核表达载体中进行诱导表达,并进行Western blot分析。结果显示,预测MAP0862-2191c串联蛋白为一个有多个抗原表位的亲水性的蛋白,两种蛋白在三级结构上无相互影响,因此可以进行原核表达;构建合成的融合基因双酶切结果与预期结果相符;经SDS-PCGE凝胶电泳检测成功表达串联蛋白,大小约68.5 ku,与预期蛋白大小相符;分别选择鼠源抗His抗体及MAP阳性牛血清作为一抗进行Western blot验证,均显示MAP0862-2191c重组蛋白有单一的特异性条带,位置及大小与预期结果一致,证明了该串联蛋白制备的正确性,并且具有良好的反应原性,能够作为牛副结核病的诊断蛋白,为后续建立牛副结核病的诊断方法奠定了良好基础。 展开更多
关键词 副结核分支杆菌 MAP0862 MAP2191c 蛋白预测 串联表达
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牛昏睡嗜血杆菌的分离鉴定及其应用研究
5
作者 刘玉梅 张彦婷 +11 位作者 赵苏苏 赵利平 刘东霞 辛颖 方建国 杨晓婷 莫绍江 陈学飞 张鸣华 范文霞 赵丽霞 关平原 《中国兽药杂志》 2025年第2期1-7,共7页
为明确国内流行牛昏睡嗜血杆菌病病原特性,将临床采集牛昏睡嗜血杆菌病诊断阳性病料划线接种于脑心浸液酵母浸提膏血琼脂固体培养基,经多代次最适固液培养基纯化分离培养,获得稳定传代的目标菌株,经8~12 h液体培养基培养,其菌数可达3... 为明确国内流行牛昏睡嗜血杆菌病病原特性,将临床采集牛昏睡嗜血杆菌病诊断阳性病料划线接种于脑心浸液酵母浸提膏血琼脂固体培养基,经多代次最适固液培养基纯化分离培养,获得稳定传代的目标菌株,经8~12 h液体培养基培养,其菌数可达3×10^(9) CFU/mL,对小鼠的最小致死剂量为4×10^(8) CFU,致病性较强。将培养菌液制备成灭活疫苗免疫小鼠后,能够针对流行的昏睡嗜血杆菌致病菌株产生80%以上免疫保护效果,且对小鼠安全性良好。该菌株的成功分离对牛昏睡嗜血杆菌病疫苗的研制具有促进作用。 展开更多
关键词 昏睡嗜血杆菌 分离 培养 PCR鉴定 致病力
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猪瘟E2亚单位联苗的免疫持续期及效力研究
6
作者 武春芳 禹佳琪 +2 位作者 张建华 王秀斌 狄栋栋 《中国兽药杂志》 2025年第2期8-12,共5页
将猪瘟、猪伪狂犬病基因工程二联灭活疫苗(E2+gB+gD,CHO细胞源)免疫断奶仔猪,于一免后第7日、14日、21日,二免后第7日、14日、21日、42日、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、9个月、11个月、13个月采血,进行猪瘟ELISA抗体效... 将猪瘟、猪伪狂犬病基因工程二联灭活疫苗(E2+gB+gD,CHO细胞源)免疫断奶仔猪,于一免后第7日、14日、21日,二免后第7日、14日、21日、42日、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、9个月、11个月、13个月采血,进行猪瘟ELISA抗体效价检测,并在二免后第13个月进行猪瘟攻毒保护试验。结果显示:免疫组免疫后第14日至2个月,猪瘟中和抗体水平处于上升期,在免疫第13个月抗体水平仍维持在较高水平,阻断率80%以上;二免后第13个月的疫苗免疫组猪瘟攻毒可达到5/5头保护,保护率100%,未免疫攻毒对照组5/5头发病且死亡。研究表明,猪瘟、猪伪狂犬病基因工程二联灭活疫苗(E2+gB+gD,CHO细胞源)猪瘟效力免疫持续期至少可以达到13个月,能够至少抵抗13个月猪瘟病毒的攻击。研究结果可为制定猪瘟E2亚单位联苗免疫程序提供依据。 展开更多
关键词 猪瘟亚单位联苗 免疫持续期 效力
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四种布鲁氏菌病疫苗临床效果及免疫方式比较评估
7
作者 刘国民 高日明 +2 位作者 刘艳琴 马琛 胡日查毕力格 《中国动物保健》 2025年第3期244-245,共2页
为评估不同羊布鲁氏菌病疫苗的安全性和效果性,选取新疆规模羊场作为实验动物,A组免疫M5疫苗,B组免疫ReV.1疫苗,C组免疫M5-90△26,D组免疫S2疫苗,分别于免疫后7、21、30、60、90、120、150、180、210、240、270 d采集血液并分类血清,用R... 为评估不同羊布鲁氏菌病疫苗的安全性和效果性,选取新疆规模羊场作为实验动物,A组免疫M5疫苗,B组免疫ReV.1疫苗,C组免疫M5-90△26,D组免疫S2疫苗,分别于免疫后7、21、30、60、90、120、150、180、210、240、270 d采集血液并分类血清,用RBPT和SAT检测抗体。同时,在接种疫苗后12 h内,观察和记录免疫羊的健康状况。结果显示:4种疫苗均安全有效且都能产生较好的免疫保护效果。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 疫苗 临床效果 免疫方式
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猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)免疫攻毒后带毒、排毒评价研究
8
作者 陈坚 贾宝琴 +14 位作者 高洁 赵丽霞 车影 程水生 宋志刚 杜宇荣 李晓艳 岳继恒 狄栋栋 张建华 吴素芳 张强 高日明 闫聪 才学鹏 《中国兽药杂志》 2024年第12期1-8,共8页
猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)为中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO)表达的E2蛋白加佐剂乳化制成。为评价其免疫攻毒保护效果,同时重点监测攻毒后的带毒、排毒及水平传播情况,将制备的1批猪瘟基因工程亚单位疫苗(CH... 猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)为中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO)表达的E2蛋白加佐剂乳化制成。为评价其免疫攻毒保护效果,同时重点监测攻毒后的带毒、排毒及水平传播情况,将制备的1批猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)两次免疫接种4~6周龄仔猪,二免后第21天连同对照猪进行猪瘟石门系强毒攻击,另设同居组;各组实验猪于攻毒后第0、2、4、6、8、10、12、14、16天,采集口、鼻、肛拭子及全血进行RT-qPCR检测猪瘟病毒核酸,并于攻毒后第16天剖检所有试验猪,采集各组织器官进行免疫组化检测及组织病毒载量检测。攻毒观察结果表明,免疫组5/5保护,对照组5/5发病并死亡。RT-qPCR结果表明,对照组猪攻毒后口、鼻、肛拭子,及全血均持续检测到明显排毒,各脏器均检出猪瘟病毒;免疫组攻毒后口、鼻、肛拭子均未检测到猪瘟病毒,且攻毒12 d之后全血中猪瘟病毒核酸全部转为阴性,免疫组部分猪扁桃体和淋巴结中检出较低的病毒核酸拷贝数;同居组猪,口、鼻、肛拭子及全血、各组织器官中均未检测到猪瘟病毒。免疫组化结果表明,对照组猪各脏器均为阳性,免疫组和同居组猪各脏器均为阴性。猪瘟基因工程亚单位疫苗(CHO-133D)对猪只提供良好的免疫保护,猪瘟石门系强毒攻击后免疫猪健活不排毒,有效阻断病毒的水平传播,可作为今后临床中猪瘟疫病传播防控的参考疫苗。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 基因工程亚单位疫苗 带毒 排毒 水平传播
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猪支原体肺炎RT-PCR诊断方法的建立和应用 被引量：3
9
作者 汪志恒 王景成 +1 位作者 佘志成 王凯 《现代畜牧科技》 2024年第1期6-9,共4页
目的:建立一种猪支原体肺炎RT-PCR诊断方法。方法:选择云南省大理地区患有猪支原体肺炎疾病的60只猪作为研究对象,针对猪肺炎支原体的保守序列p36基因设计了引物和探针,建立猪支原体肺炎RT-PCR检测反应体系,并对其灵敏度、特异性、重复... 目的:建立一种猪支原体肺炎RT-PCR诊断方法。方法:选择云南省大理地区患有猪支原体肺炎疾病的60只猪作为研究对象,针对猪肺炎支原体的保守序列p36基因设计了引物和探针,建立猪支原体肺炎RT-PCR检测反应体系,并对其灵敏度、特异性、重复性进行分析及临床样本验证。结果:RT-PCR检测灵敏度为10^(2)拷贝、与PRRSV、PPV、FMDV、PCV、CSFV、APP等无交叉反应,批内和批间变异系数均小于2.00%,肺组织样本检出阳性数26例(86.67%),鼻拭子样本检出阳性数19例(63.33%)。结论:该研究成功建立了一种猪支原体肺炎RT-PCR诊断方法,具有较高的检测灵敏度和特异性,重复性能良好,这为后期MPS的临床精准诊断和疫病科学防控提供试验依据。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 RT-PCR 灵敏度 特异性
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副结核分支杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
10
作者 平宇明 张宏莉 +8 位作者 班亚星 刘建奇 任希恩 邬彩丽 刘东霞 徐丽媛 杨雪娇 常华 李劼 《动物医学进展》 北大核心 2024年第7期1-6,共6页
为加强副结核分支杆菌(MAP)的检测、监测与防控,建立MAP荧光定量PCR(qPCR)检测方法,根据国内MAP流行菌株特异性插入序列IS900设计1对特异性引物和探针,构建重组阳性质粒用作建立qPCR的模板,优化反应体系和条件,验证该方法的特异性、敏... 为加强副结核分支杆菌(MAP)的检测、监测与防控,建立MAP荧光定量PCR(qPCR)检测方法,根据国内MAP流行菌株特异性插入序列IS900设计1对特异性引物和探针,构建重组阳性质粒用作建立qPCR的模板,优化反应体系和条件,验证该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示,该方法最低检测限为5拷贝/μL;重复试验中批内和批间变异系数均小于4%;与牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛支原体、肺炎克雷伯菌和曼氏杆菌等病原检测无交叉反应,能特异性检出MAP。应用建立的qPCR开展了内蒙古自治区6个市的MAP临床样品检测和流行情况分析,结果显示MAP平均阳性率为0.85%(6/704)。结果表明,成功建立了MAP的实时荧光定量PCR检测方法,可用于临床中MAP的监测和调查,为MAP疾病诊断与监控提供了快捷的方法。 展开更多
关键词 副结核分支杆菌 实时荧光定量PCR 检测方法 感染调查
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H5N2亚型禽流感病毒中药佐剂灭活苗对公雏鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响 被引量：7
11
作者 马德慧 薛江东 +3 位作者 姚春雨 孟宪龙 杨明霞 刘国文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第9期131-133,共3页
将200只海兰褐公雏鸡分为4组,每组50只。A组注射H5N2亚型禽流感病毒黄芪多糖油乳剂灭活苗;B组注射H5N2亚型禽流感病毒人参皂苷油乳剂灭活苗;C组注射H5N2亚型禽流感病毒普通油乳剂灭活苗;D组注射生理盐水油乳剂(空白对照)。分别在免疫前... 将200只海兰褐公雏鸡分为4组,每组50只。A组注射H5N2亚型禽流感病毒黄芪多糖油乳剂灭活苗;B组注射H5N2亚型禽流感病毒人参皂苷油乳剂灭活苗;C组注射H5N2亚型禽流感病毒普通油乳剂灭活苗;D组注射生理盐水油乳剂(空白对照)。分别在免疫前随机选取5只鸡心脏采血,EDTA抗凝。于免疫后5、12、19 d每组每次分别随机选取5只鸡心脏采血,EDTA抗凝,检查各阶段各组鸡外周血T淋巴细胞亚群变化情况。结果表明,免疫后第12天,黄芪多糖和人参皂苷可提高CD4+/CD8+淋巴细胞的比值,与普通疫苗和对照组相比,差异极显著(P<0.01);黄芪多糖和人参皂苷可提高CD4+淋巴细胞亚群的百分率,与免疫前相比,差异极显著或显著(P<0.01或P<0.05)。 展开更多
关键词 禽流感灭活苗 黄芪多糖 人参皂苷 T淋巴细胞亚群
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三种布鲁氏菌病疫苗株的毒力比较 被引量：14
12
作者 程君生 吴梅花 +5 位作者 赵丽霞 彭小兵 丁家波 王楠 夏业才 毛开荣 《中国兽药杂志》 2012年第9期1-3,共3页
为系统比较我国现有布鲁氏菌病疫苗株A19、M5和S2的毒力,分别用上述3种疫苗株以1×105CFU/只免疫Balb/c小鼠,免疫后每隔2周采集小鼠脾脏,分离细菌,测定各疫苗株在小鼠脾脏中的存留时间。结果 A19、M5、S2在小鼠体内存活时间依次为1... 为系统比较我国现有布鲁氏菌病疫苗株A19、M5和S2的毒力,分别用上述3种疫苗株以1×105CFU/只免疫Balb/c小鼠,免疫后每隔2周采集小鼠脾脏,分离细菌,测定各疫苗株在小鼠脾脏中的存留时间。结果 A19、M5、S2在小鼠体内存活时间依次为14周、大于16周、6周。将以上3种疫苗株分别以1×109CFU/只免疫Hartley豚鼠,15日后测定豚鼠脾脏含菌量,结果 A19、M5、S2免疫后每克脾脏含菌量分别为2.8×104CFU、大于6.7×105CFU、3.8×103CFU。研究结果表明,我国目前使用的布鲁氏菌疫苗中,S2毒力最弱,A19其次,M5最强。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 疫苗 毒力
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羊口疮病毒的分离与鉴定 被引量：7
13
作者 庞方圆 高日明 +4 位作者 李旭东 闫聪 李浩 王艳杰 张七斤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第2期467-471,共5页
本试验利用犊牛睾丸细胞、羔羊睾丸细胞、MDBK、BHK-21细胞对采自内蒙古赤峰的疑似羊口疮发病羊群的唇部痂皮组织进行接种传代,分离出1株病毒,通过透射电镜负染观察和PCR检测对该分离株进行鉴定。参照GenBank中羊口疮病毒(Orf virus,ORF... 本试验利用犊牛睾丸细胞、羔羊睾丸细胞、MDBK、BHK-21细胞对采自内蒙古赤峰的疑似羊口疮发病羊群的唇部痂皮组织进行接种传代,分离出1株病毒,通过透射电镜负染观察和PCR检测对该分离株进行鉴定。参照GenBank中羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)ORF059(F1L)基因的核苷酸序列,设计并合成1对特异性引物,成功地对分离株的F1L基因进行克隆、测序,并与多株参考毒株进行了同源性比对分析,结果显示经透射电镜负染观察到典型的副痘病毒粒子,与参考毒株序列相比均具有较高的同源性,均为96%以上,结果表明该分离株为ORFV,命名为OV/nm-hd。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 分离鉴定 F1L基因 序列分析
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五省牛、羊和猪口蹄疫疫苗免疫效果的试验 被引量：7
14
作者 高日明 李婷婷 +1 位作者 范秀丽 孙树民 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第3期17-20,共4页
为了监测O、A和AsiaⅠ型口蹄疫疫苗免疫后引起的抗体水平,采用口蹄疫液相阻断ELISA法和病毒非结构蛋白3ABC-ELISA法对我国云南、内蒙古、甘肃、新疆和西藏的部分地区牛、羊和猪的血清样品共65591份进行三型口蹄疫抗体水平监测。液相阻断... 为了监测O、A和AsiaⅠ型口蹄疫疫苗免疫后引起的抗体水平,采用口蹄疫液相阻断ELISA法和病毒非结构蛋白3ABC-ELISA法对我国云南、内蒙古、甘肃、新疆和西藏的部分地区牛、羊和猪的血清样品共65591份进行三型口蹄疫抗体水平监测。液相阻断ELISA方法显示加强免疫后各地合格率均能达到100%;非结构蛋白3ABC-ELISA方法显示五省抗体检测合格率分别为91.13%、88.38%、78.04%、88.15%和85.15%;不同动物口蹄疫分型抗体检测结果以云南最高(均在85%以上),其它四省抗体检测合格率均在70%以上。结果表明,该疫苗免疫可产生较好的免疫效果。 展开更多
关键词 口蹄疫 口蹄疫疫苗 抗体检测 免疫效果
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浅谈口蹄疫疫苗的免疫与应用
15
作者 薛晓霜 郭孝萍 +2 位作者 易建钢 苏爱慧 薛晓玲 《国外畜牧学（猪与禽）》 2015年第7期30-31,共2页
引发口蹄疫的病毒属小RNA病毒科口蹄疫病毒属口蹄疫病毒,病毒粒子直径为20 nm^25 nm,近似圆形,呈二十面体,无囊膜。病原血清主要分A、O、C、SAT1、SAT2、SAT3以及Asia 1型。各血清型没有交叉免疫性,同血清型的各亚型之间仅有部分交叉免... 引发口蹄疫的病毒属小RNA病毒科口蹄疫病毒属口蹄疫病毒,病毒粒子直径为20 nm^25 nm,近似圆形,呈二十面体,无囊膜。病原血清主要分A、O、C、SAT1、SAT2、SAT3以及Asia 1型。各血清型没有交叉免疫性,同血清型的各亚型之间仅有部分交叉免疫性。目前国内流行的病毒以O、A、和亚洲I型这三个血清型为主。口蹄疫的预防以免疫接种为首要措施,接种时应考虑疫苗株与流行株意愿同源性,同时还应考虑母源抗体水平等因素的影响。 展开更多
关键词 猪 口蹄疫病毒 免疫 母源抗体
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捕食性真菌Duddingtoniaflagrans捕食马圆线虫幼虫动态观察 被引量：2
16
作者 李军燕 罗宏亮 +6 位作者 王瑞 杨莲茹 赵治国 张伟 李斌 杨晓野 罗晓平 《动物医学进展》 北大核心 2018年第10期122-125,共4页
为探讨捕食性真菌Duddingtonia flagrans在捕食线虫的过程中产生的细微变化,如捕食器的形成过程,捕获虫体前后的变化等,利用线虫三期幼虫作为诱导物,在玻片培养基中刺激捕食性真菌产生捕食器,然后对其捕食线虫过程进行了适时动态的观察... 为探讨捕食性真菌Duddingtonia flagrans在捕食线虫的过程中产生的细微变化,如捕食器的形成过程,捕获虫体前后的变化等,利用线虫三期幼虫作为诱导物,在玻片培养基中刺激捕食性真菌产生捕食器,然后对其捕食线虫过程进行了适时动态的观察。结果显示,接种有较强活力的线虫三期幼虫2h后捕食器,即菌环开始形成,而后联合形成菌网;4h后虫体被捕食器捕获,24h后线虫即被完全致死;5d后,虫体发生皱缩直至完全消解。D.flagrans还可以自发产生捕食器(菌环),显示了其较强的捕食线虫的效率和能力。本研究为阐明捕食性真菌捕食机制提供了重要的参考依据。 展开更多
关键词 捕食线虫真菌 Duddingtoniaflagrans 马圆线虫3期幼虫 生物防治 捕食器
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通过检测非结构蛋白抗体评价口蹄疫疫苗纯度的研究 被引量：7
17
作者 赵丽霞 关平原 +9 位作者 陈君彦 李超华 高瑛 牛秀岭 张立华 赵丹彤 郝雪斌 李敏 高日明 武春芳 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第4期17-20,共4页
为探索通过检测非结构蛋白(NSPs)抗体的方法评价口蹄疫疫苗纯度的可行性,用不同纯化工艺制备口蹄疫O型、亚洲1型、A型三价灭活疫苗,重复免疫牛至少3次后,定期检测NSPs的ELISA抗体并统计分析抗体情况。结果显示,高度纯化疫苗组的NSPs抗... 为探索通过检测非结构蛋白(NSPs)抗体的方法评价口蹄疫疫苗纯度的可行性,用不同纯化工艺制备口蹄疫O型、亚洲1型、A型三价灭活疫苗,重复免疫牛至少3次后,定期检测NSPs的ELISA抗体并统计分析抗体情况。结果显示,高度纯化疫苗组的NSPs抗体阴性率远高于普通纯化疫苗组,表明通过检测NSPs抗体评价口蹄疫疫苗纯度可以作为质量控制的一种方法。 展开更多
关键词 口蹄疫疫苗 非结构蛋白 抗体 纯度
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一株牛病毒性腹泻/黏膜病毒株的分离与鉴定 被引量：1
18
作者 范娟 吴华伟 +7 位作者 郎洪武 郝雪斌 陈晓春 刘国英 高金源 赵丽霞 邓永 范秀丽 《中国兽药杂志》 2018年第7期8-15,共8页
从云南某牛场疑似BVDV感染的病料通过接种MDBK细胞分离到1株BVDV,为了解分离毒株的特性,进行了病原学和分子生物学研究。该分离毒株连传15代均不产生CPE,为NCP型BVDV。通过电镜检测可观察到直径为40~60 nm病毒粒子。该分离病毒能被牛病... 从云南某牛场疑似BVDV感染的病料通过接种MDBK细胞分离到1株BVDV,为了解分离毒株的特性,进行了病原学和分子生物学研究。该分离毒株连传15代均不产生CPE,为NCP型BVDV。通过电镜检测可观察到直径为40~60 nm病毒粒子。该分离病毒能被牛病毒性腹泻标准阳性血清中和,且能被BVDV IFA荧光抗体识别;采用BVDV 5'-UTR基因特异性引物,经RTPCR可扩增出288 bp特异性片段。将该片段测序后与Gen Bank已发表的30株BVDV 5'-UTR序列进行同源性比较,同源性为68.7%~89.2%。与我国分离的BJ1202株(登陆号:KF925514.1)和Y2株(登陆号:KY964311.1)同源关系最近,均为89.2%。与2014年以来我国分离的BVDV毒株亲缘关系在88%左右。5'-UTR遗传进化分析证实该分离毒株为BVDV-1型。动物回归试验显示,该分离毒株可引起出现体温升高、腹泻、粘膜病等典型的BVD/MD症状。结果表明,分离的毒株为BVDV,命名为BVDV/W株。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻/黏膜病病毒 分离 鉴定
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内蒙古地区牛羊口蹄疫灭活疫苗的免疫效果比较研究 被引量：11
19
作者 高日明 马立峰 +3 位作者 李敏 范秀丽 孙树民 赵心力 《中国兽药杂志》 2014年第4期15-18,共4页
为准确掌握牛羊口蹄疫疫苗免疫效果,2012年对内蒙古自治区的牛羊口蹄疫O-AsiaⅠ型双价灭活疫苗和牛羊口蹄疫A型灭活疫苗免疫效果进行了监测。采用液相阻断ELISA方法,共检测了8个旗县23018份免疫牛羊口蹄疫O-AsiaⅠ型双价灭活疫苗和牛羊... 为准确掌握牛羊口蹄疫疫苗免疫效果,2012年对内蒙古自治区的牛羊口蹄疫O-AsiaⅠ型双价灭活疫苗和牛羊口蹄疫A型灭活疫苗免疫效果进行了监测。采用液相阻断ELISA方法,共检测了8个旗县23018份免疫牛羊口蹄疫O-AsiaⅠ型双价灭活疫苗和牛羊口蹄疫A型灭活疫苗15日、30日、60日的血清中口蹄疫免疫抗体水平。结果显示,牛羊口蹄疫疫苗免疫效果总体良好,免疫抗体合格率超过了70%。规模化奶牛养殖场免疫效果稳定,散养地区免疫效果稳定性差,且不同厂家的疫苗免疫效果不同,加强免疫后A、B、D三个厂家抗体合格率能达到100%,C厂家的免疫效果较差,抗体合格率为93.3%。采用3ABC-ELISA检测试剂盒对部分地区牛羊进行感染抗体检测,结果为阴性。 展开更多
关键词 口蹄疫 O-Asia I型 监测 免疫效果
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三株牛支原体的致病性比较 被引量：4
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作者 刘重阳 黄海碧 +7 位作者 范文霞 乌吉斯古楞 张彦婷 陈学飞 纪燕 刘玉梅 宋庆庆 关平原 《中国动物检疫》 CAS 2021年第2期114-119,共6页
为检测从内蒙古发病牛场分离到的3株牛支原体(HS2019、HSZ2019、HSS2019)的致病性,对其进行本动物回归试验,通过观察攻毒后的临床症状、病理变化,以及应用实时荧光定量PCR确定组织器官中支原体载量,分析3株支原体的毒力。结果显示,3株... 为检测从内蒙古发病牛场分离到的3株牛支原体(HS2019、HSZ2019、HSS2019)的致病性,对其进行本动物回归试验,通过观察攻毒后的临床症状、病理变化,以及应用实时荧光定量PCR确定组织器官中支原体载量,分析3株支原体的毒力。结果显示,3株牛支原体回归牛体后均使试验牛出现体温升高、咳嗽、呼吸困难等临床症状,解剖可观察到试验牛肺部损伤以及肺脏与胸腔粘连的病理变化,其中HS2019株较其他两株引起的症状与病变更为明显,组织脏器中的载菌量最高。结果表明,这3株支原体均有致病性,其中HS2019株致病性最强,可作为今后疫苗研制的预备菌株。本研究既为国内疫苗的研制提供了菌株资源,也为今后牛支原体的免疫攻毒试验提供了评价标准。 展开更多
关键词 牛支原体 动物回归试验 荧光定量PCR
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