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人结肠癌HCT116细胞系肿瘤干细胞特性研究
被引量：
13
1
作者
陈克力
江恒
+2 位作者
陈建芳
裴莉
梁后杰
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期1292-1296,共5页
目的探讨结肠癌HCT116细胞系的肿瘤干细胞相关特性,为结肠癌干细胞功能研究奠定基础。方法取HCT116细胞在无血清条件下培养,观察细胞在无血清培养基中的增殖分化情况,采用限量稀释法计数细胞的克隆球形成率,并观察细胞及克隆球的生长、...
目的探讨结肠癌HCT116细胞系的肿瘤干细胞相关特性,为结肠癌干细胞功能研究奠定基础。方法取HCT116细胞在无血清条件下培养,观察细胞在无血清培养基中的增殖分化情况,采用限量稀释法计数细胞的克隆球形成率,并观察细胞及克隆球的生长、增殖、分化情况。取HCT116细胞(5×103、5×104个)接种4周龄雌性NOD-SCID小鼠,观察3～8周,分析其致瘤性和病理学特征。采用流式细胞仪和免疫荧光染色法分别检测HCT116细胞CD133、CD44、ABCG2的表达,RT-PCR和Western blotting检测CD133的mRNA和蛋白表达。采用免疫组化法检测分化过程中HCT116克隆球上CK20的表达。结果41.47%±1.28%的HCT116细胞能在无血清培养基中形成克隆球,第二代克隆球形成率仍保持在较高水平(32.53%±2.32%)。HCT116细胞在无血清条件下培养72h可形成克隆球,且至少可传15代以上。5×103个HCT116细胞接种至小鼠皮下5～6周后即可形成移植瘤。大部分HCT116细胞为CD133+CD44+,并表达ABCG2蛋白。HCT116细胞的克隆球分化至第4天即可检测到CK20表达。结论大部分HCT116细胞具有肿瘤干细胞特性,可作为肿瘤干细胞研究的理想对象。
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关键词
肿瘤干细胞测定
抗原
CD44
抗原
CD133
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职称材料
抑制NRP2表达对淋巴管内皮细胞小管成型的影响
被引量：
1
2
作者
周琪
梁后杰
+5 位作者
阎晓初
彭秋平
周进明
吴峰
高俊勇
吕仁明
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期1311-1314,共4页
目的探讨抑制神经纤毛蛋白质2(NRP2)基因表达对人淋巴管内皮细胞(LECs)体外形成小管能力的影响。方法从人新鲜包皮中分离纯化LECs,并进行鉴定。实验设NRP2-RNAi/LECs组、mock/LECs组和hECs组,三组分别转染pGensil-NRP2(携带NRP2 siRNA...
目的探讨抑制神经纤毛蛋白质2(NRP2)基因表达对人淋巴管内皮细胞(LECs)体外形成小管能力的影响。方法从人新鲜包皮中分离纯化LECs,并进行鉴定。实验设NRP2-RNAi/LECs组、mock/LECs组和hECs组,三组分别转染pGensil-NRP2(携带NRP2 siRNA的真核表达载体)、pGensil-1(空载体)及正常LECs细胞。采用RT-PCR和Western blotting检测NRP2 mRNA和蛋白的表达;绘制细胞生长曲线以观察各组细胞生长的差异。对细胞进行三维胶培养,计数小管样结构的数量,并测量小管外径、内径和管壁厚度。结果与hECs组和mock/LECs组比较,NRP2-RNAi/LECs组NRP2表达水平明显下调(P<0.05),而前两组间无显著差异(P>0.05)。生长曲线显示三组细胞的增殖能力无显著差异,均于接种后3～5d进入对数生长期,6～7d进入停滞期。三维胶培养形成的管样结构在NRP2-RNAi/LECs组很少见,其管样结构的数量及小管外径、内径、管壁厚度都明显低于mock/LECs组和hECs组(P<0.05),而后两组间无显著差异(P>0.05)。结论抑制NRP2的表达可抑制LECs在体外形成小管的能力,并可能抑制肿瘤淋巴管的生成。
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关键词
神经纤毛蛋白质2
内皮
淋巴管
RNA干扰
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职称材料
题名
人结肠癌HCT116细胞系肿瘤干细胞特性研究
被引量：
13
1
作者
陈克力
江恒
陈建芳
裴莉
梁后杰
机构
重庆第三军医大学西南医院肿瘤科
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期1292-1296,共5页
文摘
目的探讨结肠癌HCT116细胞系的肿瘤干细胞相关特性,为结肠癌干细胞功能研究奠定基础。方法取HCT116细胞在无血清条件下培养,观察细胞在无血清培养基中的增殖分化情况,采用限量稀释法计数细胞的克隆球形成率,并观察细胞及克隆球的生长、增殖、分化情况。取HCT116细胞(5×103、5×104个)接种4周龄雌性NOD-SCID小鼠,观察3～8周,分析其致瘤性和病理学特征。采用流式细胞仪和免疫荧光染色法分别检测HCT116细胞CD133、CD44、ABCG2的表达,RT-PCR和Western blotting检测CD133的mRNA和蛋白表达。采用免疫组化法检测分化过程中HCT116克隆球上CK20的表达。结果41.47%±1.28%的HCT116细胞能在无血清培养基中形成克隆球,第二代克隆球形成率仍保持在较高水平(32.53%±2.32%)。HCT116细胞在无血清条件下培养72h可形成克隆球,且至少可传15代以上。5×103个HCT116细胞接种至小鼠皮下5～6周后即可形成移植瘤。大部分HCT116细胞为CD133+CD44+,并表达ABCG2蛋白。HCT116细胞的克隆球分化至第4天即可检测到CK20表达。结论大部分HCT116细胞具有肿瘤干细胞特性,可作为肿瘤干细胞研究的理想对象。
关键词
肿瘤干细胞测定
抗原
CD44
抗原
CD133
Keywords
tumor stem cell assay
antigens
CD44
antigens
CD133
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R73-35 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
抑制NRP2表达对淋巴管内皮细胞小管成型的影响
被引量：
1
2
作者
周琪
梁后杰
阎晓初
彭秋平
周进明
吴峰
高俊勇
吕仁明
机构
重庆第三军医大学西南医院肿瘤科
重庆
第三军医大学西南医院
病理研究所
重庆
市涪陵中心
医院
肿瘤科
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期1311-1314,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30572159)
文摘
目的探讨抑制神经纤毛蛋白质2(NRP2)基因表达对人淋巴管内皮细胞(LECs)体外形成小管能力的影响。方法从人新鲜包皮中分离纯化LECs,并进行鉴定。实验设NRP2-RNAi/LECs组、mock/LECs组和hECs组,三组分别转染pGensil-NRP2(携带NRP2 siRNA的真核表达载体)、pGensil-1(空载体)及正常LECs细胞。采用RT-PCR和Western blotting检测NRP2 mRNA和蛋白的表达;绘制细胞生长曲线以观察各组细胞生长的差异。对细胞进行三维胶培养,计数小管样结构的数量,并测量小管外径、内径和管壁厚度。结果与hECs组和mock/LECs组比较,NRP2-RNAi/LECs组NRP2表达水平明显下调(P<0.05),而前两组间无显著差异(P>0.05)。生长曲线显示三组细胞的增殖能力无显著差异,均于接种后3～5d进入对数生长期,6～7d进入停滞期。三维胶培养形成的管样结构在NRP2-RNAi/LECs组很少见,其管样结构的数量及小管外径、内径、管壁厚度都明显低于mock/LECs组和hECs组(P<0.05),而后两组间无显著差异(P>0.05)。结论抑制NRP2的表达可抑制LECs在体外形成小管的能力,并可能抑制肿瘤淋巴管的生成。
关键词
神经纤毛蛋白质2
内皮
淋巴管
RNA干扰
Keywords
neuropilin-2
endothelial cells
endothelium
lymphatic
RNA interference
分类号
R73-361 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人结肠癌HCT116细胞系肿瘤干细胞特性研究
陈克力
江恒
陈建芳
裴莉
梁后杰
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
13
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抑制NRP2表达对淋巴管内皮细胞小管成型的影响
周琪
梁后杰
阎晓初
彭秋平
周进明
吴峰
高俊勇
吕仁明
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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