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题名伤寒沙门菌bcfD基因的克隆表达
被引量:1
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作者
胡勇
丛延广
邱蓉荣
张云茹
胡福泉
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机构
第三军医大学基础医学部微生物学教研室、重庆市微生物工程实验室
重庆理工大学化学与生物工程学院生物工程系
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出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期338-341,共4页
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基金
国家自然科学基金(30500435)~~
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文摘
目的构建伤寒沙门菌BcfD基因的原核表达质粒,表达BcfD蛋白。方法PCR法从伤寒沙门菌Ty2菌株基因组中扩增bcfD目的基因,经克隆和亚克隆构建原核表达载体pET-30a-bcf,将该重组质粒转化E.coliBL21(DE3)并进行原核表达,用SDS-PAGE和免疫印迹分析表达蛋白。结果扩增到与bcfD基因预期大小相符的片段,测序证明与bcfD基因序列完全一致,SDS-PAGE显示该蛋白主要以包涵体的形式表达,相对分子质量为42×103,免疫印迹分析表明,表达产物与经用大肠杆菌吸附处理后的伤寒患者血清能进行免疫反应。结论成功构建了bcfD基因原核表达载体并在大肠杆菌中表达了目的蛋白。
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关键词
沙门菌
伤寒
抗原
细菌
bcfD
原核表达
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Keywords
Salmonella typhi
antigens, bacterial
bcfD
procaryotic expression
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分类号
R378.22
[医药卫生—病原生物学]
R394.33
[医药卫生—医学遗传学]
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