目的探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of hypoxia-preconditioned mice,DHP)对NGF诱导分化的PC12细胞缺氧耐受性的影响及其与腺苷的关系。方法复制缺氧预适应小鼠模型,高氯酸法制备DHP。HPLC法检...目的探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of hypoxia-preconditioned mice,DHP)对NGF诱导分化的PC12细胞缺氧耐受性的影响及其与腺苷的关系。方法复制缺氧预适应小鼠模型,高氯酸法制备DHP。HPLC法检测DHP中腺苷含量及正常小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of normal mice,DN)中腺苷含量。在已分化PC12细胞中加入DHP,以DN作对照,以1.0、10.0、100.0μmol/L的腺苷为阳性对照,分别于缺氧(2%O2)培养24、48、72h后检测MTT值、LDH透出率以及72h晚期凋亡率;在DHP、10.0μmol/L腺苷阳性对照组中分别加入腺苷A1、A2A受体阻断剂DPCPX、SCH58261(5.0μmol/L),以DN作对照,缺氧24、48、72h后分别检测各组MTT值、LDH透出率。结果DHP中腺苷含量显著高于DN;缺氧24h时,DHP组MTT值显著高于DN组,其LDH透出率显著低于DN组。随缺氧时间延长,DHP保护作用逐渐减弱,至72h时,DHP组MTT值、LDH透出率、晚期凋亡率与DN组均无显著差异;A2A受体阻断剂SCH58261可阻断DHP的保护作用。结论DHP在缺氧初期对分化PC12细胞的保护作用与缺氧预适应中腺苷含量增加有关,保护作用可能通过A2A受体实现。展开更多
文摘目的探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of hypoxia-preconditioned mice,DHP)对NGF诱导分化的PC12细胞缺氧耐受性的影响及其与腺苷的关系。方法复制缺氧预适应小鼠模型,高氯酸法制备DHP。HPLC法检测DHP中腺苷含量及正常小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of normal mice,DN)中腺苷含量。在已分化PC12细胞中加入DHP,以DN作对照,以1.0、10.0、100.0μmol/L的腺苷为阳性对照,分别于缺氧(2%O2)培养24、48、72h后检测MTT值、LDH透出率以及72h晚期凋亡率;在DHP、10.0μmol/L腺苷阳性对照组中分别加入腺苷A1、A2A受体阻断剂DPCPX、SCH58261(5.0μmol/L),以DN作对照,缺氧24、48、72h后分别检测各组MTT值、LDH透出率。结果DHP中腺苷含量显著高于DN;缺氧24h时,DHP组MTT值显著高于DN组,其LDH透出率显著低于DN组。随缺氧时间延长,DHP保护作用逐渐减弱,至72h时,DHP组MTT值、LDH透出率、晚期凋亡率与DN组均无显著差异;A2A受体阻断剂SCH58261可阻断DHP的保护作用。结论DHP在缺氧初期对分化PC12细胞的保护作用与缺氧预适应中腺苷含量增加有关,保护作用可能通过A2A受体实现。
