-
题名piggyBac转座子及其转基因昆虫的应用
被引量：5
- 1
-
-
作者
唐丽莉
陈斌
何正波
李廷景
-
机构
重庆师范大学生命科学学院昆虫与分子生物学研究所重庆高校生物活性物质工程研究中心重庆高校动物生物学重点实验室
-
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第6期2809-2811,2814,共4页
-
基金
国家自然科学基金(30870340)
重庆市自然科学基金重点项目(CSTC2008BA5030)
-
文摘
综述了piggyBac转座子的结构、转座机制及其在获得转基因动物方面的应用成果,介绍了利用该转座子获得的转基因昆虫在功能基因研究、生物反应器、昆虫改良和害虫防治等方面的应用。
-
关键词
PIGGYBAC
转座子
转基因昆虫
-
Keywords
piggyBac
Transposon
Transgenic insects
-
分类号
S181
[农业科学—农业基础科学]
-
-
题名纳豆激酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达
被引量：8
- 2
-
-
作者
敬俊锋
陈斌
李莹
何正波
霍金柱
-
机构
重庆师范大学生命科学学院昆虫与分子生物学研究所重庆高校生物活性物质工程研究中心
-
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第5期55-59,54,共6页
-
基金
重庆市自然科学基金重点项目(No.CSTC2008BA5030)
-
文摘
纳豆激酶纳是从日本传统食品纳豆中发现的一类具有溶栓效果的蛋白酶,由于其具有安全,高效,作用时间长,易吸收,廉价等优点,现在正成为一个开发治疗血栓类疾病药物的研究热点。从本实验室保存的一株高溶栓的纳豆杆菌N07出发,提取总基因组DNA,利用PCR手段扩增获得了纳豆激酶长为825bp的成熟肽基因片段。构建重组表达质粒pPICZaA-NK,经EcoR I、Xba I双酶切、PCR、测序验证得出重组表达质粒上的外源基因即为825bp的目的片段;将重组质粒pPICZaA-NK用内切酶Sac I线性化后电击导入毕赤酵母X33,通过含Zeocin的YPDS平板筛选获得重组酵母。重组酵母在BMMY培养基中发酵培养,用1%甲醇诱导目的蛋白表达。用纤维蛋白平板法检测发现发酵上清具有纤溶活性,经硫酸铵盐析、透析、Sephadex-G50过柱等步骤分离得到纳豆激酶蛋白,进行SDS-PAGE鉴定表明,表达的纳豆激酶蛋白分子量为27KD。以尿激酶为标准,实验所得纳豆激酶发酵上清液溶栓活性约为195U/mL。成功的将纳豆激酶成熟肽基因在毕赤酵母X33中表达,为纳豆激酶基因工程进一步研究奠定基础。
-
关键词
纳豆激酶基因
毕赤酵母
克隆
表达
-
Keywords
nattokinase gene
P.pastoris
cloning
expressio
-
分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
-
