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题名实时重组酶辅助扩增技术快速检测狗源性成分
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作者
刘明明
颜海燕
周朝旭
叶语桦
李志刚
肖昭竞
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机构
重庆市计量质量检测研究院(国家农副加工产品及调味品质量检验检测中心)
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出处
《肉类研究》
北大核心
2025年第4期24-29,共6页
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基金
重庆市市场监督管理局科研计划项目(CQSJKJDW2023006)。
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文摘
为快速检测狗源性成分,针对cytb基因保守区域设计3对重组酶辅助扩增(recombinaseaided amplification,RAA)引物和1条核酸外切酶(exonuclease,exo)探针,通过引物和探针浓度的筛选,构建一种实时RAA(real-time RAA,Rt-RAA)方法。利用交叉反应和重复性实验对该检测方法的特异性和稳定性进行评估,并将Rt-RAA方法灵敏度以及对混合模拟样品和市售样品的检测结果与相应的国标检测方法进行对比。结果表明,Rt-RAA检测方法特异性强、稳定性好,在30 min内可检测到目的序列,对狗源性成分的检出限为0.2%,明显优于实时荧光聚合酶链式反应检测方法,应用Rt-RAA方法与国标方法对模拟样品和市售实际样品检测结果完全一致。因此,本研究建立的Rt-RAA检测方法适用于狗源性成分的检测,为肉源性成分鉴定提供了另一种快速、准确的新方法。
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关键词
实时荧光重组酶辅助扩增技术
狗源性成分
肉制品掺假
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Keywords
real-time recombinase-aided amplification
dog-derived ingredients
meat adulteration
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分类号
TS251.7
[轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]
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题名基于重组酶的2种等温扩增技术快速检测兔源性成分
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作者
刘明明
李根容
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机构
重庆市计量质量检测研究院(国家农副加工产品及调味品质量检验检测中心)
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出处
《粮食与油脂》
2025年第12期157-162,共6页
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基金
重庆市市场监督管理局科研计划项目(CQSJKJDW2023006)。
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文摘
为准确快速地鉴定兔源性成分,针对COI基因保守序列设计6条特异性引物和1条核酸外切酶(exonuclease,exo)探针,通过优化反应条件,构建重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)和重组酶辅助扩增(recombinase-assisted amplification,RAA)2种等温扩增检测方法。利用交叉反应和重复性实验对2种方法的特异性和稳定性进行评估,并将其对市售样品和模拟样品的检测结果与国标检测方法进行对比。结果显示:RPA和RAA 2种检测方法均能在33℃条件下30 min内高效扩增目的片段,且特异性高、稳定性好,对兔源性成分的检出限均为0.2%。RPA和RAA 2种方法对市售样品和模拟样品的检测结果与国标方法高度一致。因此,建立的RPA和RAA检测方法适用于肉类加工产品中兔源性成分的快速检测。
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关键词
兔源性成分
重组酶聚合酶扩增
重组酶辅助扩增
快速等温扩增
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Keywords
rabbit-derived component
recombinase polymerase amplification
recombinase-assisted amplification
rapid isothermal amplification
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分类号
TS207.3
[轻工技术与工程]
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