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南川百合资源现状及组培快繁技术研究 被引量：4
1
作者 任明波 杨毅 +2 位作者 刘杰 刘春雷 刘燕琴 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期19-24,共6页
研究发现,近年南川百合资源呈明显下降趋势,评估为易危(VU)等级.以鳞茎为外植体进行芽的诱导、增殖培养,筛选出培养配方:MS+6-BA 1.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L+白糖30 g/L+琼脂7.0 g/L,pH=5.8;壮苗、生根培养基:MS+NAA 0.3 mg/L+香蕉泥15 g/L... 研究发现,近年南川百合资源呈明显下降趋势,评估为易危(VU)等级.以鳞茎为外植体进行芽的诱导、增殖培养,筛选出培养配方:MS+6-BA 1.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L+白糖30 g/L+琼脂7.0 g/L,pH=5.8;壮苗、生根培养基:MS+NAA 0.3 mg/L+香蕉泥15 g/L+活性炭0.1%+白糖40 g/L,pH=5.8;可以实现南川百合快繁和资源保护. 展开更多
关键词 南川百合 资源 组培 丛生芽诱导 壮苗培养
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基于SWChen系统预测靶向林麝(Moschusberezovskii)FASN、HMGCR和CYP11A1基因miRNAs的研究 被引量：2
2
作者 谌颖莲 曾德军 +4 位作者 赵贵军 封孝兰 张承露 吴佳勇 竭航 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期880-890,共11页
【目的】预测靶向林麝(Moschus berezovskii)FASN、HMGCR和CYP11A1基因的miRNAs,为麝香的生物合成机制研究提供参考。【方法】通过林麝麝香的代谢组学测序,获取麝香中的主要化学组分,确定相应化学组分合成的关键酶;通过转录组测序获取... 【目的】预测靶向林麝(Moschus berezovskii)FASN、HMGCR和CYP11A1基因的miRNAs,为麝香的生物合成机制研究提供参考。【方法】通过林麝麝香的代谢组学测序,获取麝香中的主要化学组分,确定相应化学组分合成的关键酶;通过转录组测序获取林麝基因mRNA序列及miRNAs序列,利用自主编写的离线SWChen系统对调控关键酶基因表达的miRNA进行预测,并以人FSAN基因对系统准确性进行验证,同时以牛(Bos taurus)、山羊(Capra hircus)和绵羊(Ovis aries)预测结果进行比较和集合论分析,获取调控林麝基因的候选miRNAs。【结果】麝香的化学成分主要包括脂肪酸碳链类衍生物、芳香族、固醇类和甾类等衍生物质;预测调控FASN基因表达的miRNA主要为miR-24-3p和miR-30b-3p,调控HMGCR基因表达的为miR-29b、miR-146a、miR-181b-3p和miR-429家族,调控CYP11A1基因表达的为miR-532-3p和let-7家族,共同调控3个基因表达的主要为miR-205家族和miR-143家族。【结论】上述miRNAs为靶向调控林麝FASN、HMGCR和CYP11A1基因表达的候选miRNAs,对解析林麝麝香的生物合成机制具有参考价值。 展开更多
关键词 林麝 FASN HMGCR CYP11A1 MIRNA
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基于accD基因序列的牛至遗传多样性研究 被引量：1
3
作者 卓维 刘艳 +4 位作者 卢圣鄂 朱晓富 黄红燕 陈双扣 任风鸣 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第4期1191-1198,共8页
目的基于acc D基因序列分析不同产地牛至的遗传结构与分化,考察其遗传多样性。方法以8个居群69份样品为材料,试剂盒法提取植物基因组DNA,同源克隆法获得acc D序列,Sanger测序法双向测序,利用DNAsp、Arlequin等软件进行多态性分析,MEGA... 目的基于acc D基因序列分析不同产地牛至的遗传结构与分化,考察其遗传多样性。方法以8个居群69份样品为材料,试剂盒法提取植物基因组DNA,同源克隆法获得acc D序列,Sanger测序法双向测序,利用DNAsp、Arlequin等软件进行多态性分析,MEGA软件计算遗传距离并构建NJ发育树。结果牛至acc D长度为1432-1436 bp,存在10个单倍型与16个变异位点,单倍型多态性为0.595,核苷酸多样性为0.15750;牛至居群遗传分化较高(Gst=0.36751,Nst=0.46976,Fst=0.67627),基因流较低(Nm=0.43),居群间变异(67.62%)是主要的变异来源。系统发育关系显示10种单倍型形成3大分支,主要以H2为中心形成发散状的系统结构,种群未发生扩张。结论牛至居群存在较高的遗传多样性与遗传分化,可能主要与生境片段化、种群隔离及生活史特征相关,本研究为牛至种质资源的保护和开发利用提供理论基础。 展开更多
关键词 牛至 accD基因 单倍型 遗传多样性
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鹿血抗运动疲劳肽分离纯化及其肽段分析
4
作者 杜小琴 夏炎 +1 位作者 张小琴 吴中宝 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第3期481-490,共10页
从鹿血中筛选出具有抗运动疲劳活性的肽段。以冻干鹿血粉为原料,选用碱性蛋白酶制备抗运动疲劳多肽,采用透析和葡聚糖凝胶Sephadex G-25色谱分离纯化,以对小鼠负重力竭游泳时间,肝糖原、血乳酸及血尿氮含量的影响为指标,获得抗运动疲劳... 从鹿血中筛选出具有抗运动疲劳活性的肽段。以冻干鹿血粉为原料,选用碱性蛋白酶制备抗运动疲劳多肽,采用透析和葡聚糖凝胶Sephadex G-25色谱分离纯化,以对小鼠负重力竭游泳时间,肝糖原、血乳酸及血尿氮含量的影响为指标,获得抗运动疲劳活性较强的肽段。采用氨基酸自动分析仪检测游离氨基酸与水解氨基酸含量;高效液相色谱法检测γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)与牛磺酸含量;凝胶渗透色谱法检测肽段分子量及其分布;液相色谱-串联质谱法鉴定多肽序列。透析分离得到分子量为500~3500 Da(M-1)、3500~8000 Da(M-2)和大于8000 Da(M-3)的三个组分,葡聚糖凝胶Sephadex G-25色谱进一步分离M-1得到P-1、P-2两个组分。与生理盐水给药相比,M-1给药在增加小鼠力竭游泳时间、肝糖原含量和降低血乳酸、血尿氮含量上差异均达到显著(P<0.01);P-2给药在增加小鼠力竭游泳时间和降低血乳酸、血尿氮含量上差异达到显著(P<0.05)。M-1中亮氨酸含量最高(12.14%),P-2中天冬氨酸含量最高(13.54%)。M-1的GABA、牛磺酸含量分别比P-2多178.39%、51.04%。M-1由小于20个氨基酸,分子量低于2000 Da的肽段组成。筛选出高活性的抗运动疲劳肽段M-1,可为鹿血天然抗运动疲劳产品开发提供理论依据。 展开更多
关键词 鹿血 抗运动疲劳肽 分离纯化 氨基酸 鉴定
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永生化麝鼠香腺成纤维细胞的转录组学分析 被引量：3
5
作者 竭航 赵春容 +4 位作者 谌颖莲 赵贵军 张承露 封孝兰 曾德军 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2021年第6期772-777,共6页
【目的】探索永生化对麝鼠香腺成纤维细胞转录组的影响。【方法】在获得永生化的麝鼠香腺成纤维细胞后,采用二代测序的方法对其永生化前后转录组进行检测,并通过生物信息学方法进行差异分析。【结果】用Trinity软件对麝鼠永生化和原代... 【目的】探索永生化对麝鼠香腺成纤维细胞转录组的影响。【方法】在获得永生化的麝鼠香腺成纤维细胞后,采用二代测序的方法对其永生化前后转录组进行检测,并通过生物信息学方法进行差异分析。【结果】用Trinity软件对麝鼠永生化和原代香腺细胞测序数据进行基因组装,总共发现62 152 unigenes,富集分析结果显示,上述基因主要聚集在细胞代谢、细胞生物学调控、蛋白结合和酶催化等基因的细胞基础代谢活动。基于DESeq2包的基因表达差异分析结果表明,永生化和原代细胞表达差异的基因总共有8 690个,其中上调基因3 414个,下调基因5 276个,上调基因主要富集于DNA复制、同源重组、错配修复、细胞周期和RNA代谢通路,下调基因主要富集于氧化磷酸化、帕金森病和阿尔茨海默病疾病通路中。【结论】永生化过程对麝鼠原代细胞基因的影响较大,可为后续建立永生化香腺细胞体外泌香体系提供理论支撑。 展开更多
关键词 麝鼠 香腺细胞 永生化 转录组
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蛋白酶对鹿血成分及抗运动疲劳作用的影响 被引量：2
6
作者 杜小琴 张小琴 +3 位作者 夏炎 张万超 梁正杰 吴中宝 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2022年第1期22-29,共8页
【目的】为分析不同蛋白酶处理对鹿血酶解液成分及抗运动疲劳作用的影响。【方法】以鹿血粉为原料,选用4种不同蛋白酶,即木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合酶(木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶∶碱性蛋白酶=1∶1∶1),以及不同酶解时间(3... 【目的】为分析不同蛋白酶处理对鹿血酶解液成分及抗运动疲劳作用的影响。【方法】以鹿血粉为原料,选用4种不同蛋白酶,即木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合酶(木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶∶碱性蛋白酶=1∶1∶1),以及不同酶解时间(3、6、12 h)进行酶解处理。通过高效液相色谱法分析蛋白酶处理对鹿血成分的影响,通过酶解物给药后对小鼠力竭游泳时间、肝糖原含量、肌乳酸含量及血尿氮含量的影响,分析蛋白酶处理对鹿血抗运动疲劳作用的影响。【结果】不同种类蛋白酶酶解处理后,鹿血的HPLC色谱峰差异较大;同种蛋白酶不同酶解时间处理后,鹿血的HPLC色谱峰差异较小。与对照组相比,碱性蛋白酶处理鹿血给药可极显著地(P<0.01)提高小鼠力竭游泳时间及肝糖原含量,显著地(P<0.05)降低小鼠血尿氮及肌乳酸含量;中性蛋白酶处理鹿血给药可显著地(P<0.05)提高小鼠力竭游泳时间及降低小鼠血尿氮、肌乳酸含量;木瓜蛋白酶处理鹿血给药可极显著地(P<0.01)提高小鼠肝糖原含量;复合酶处理鹿血给药可极显著地(P<0.01)降低小鼠肌乳酸含量。【结论】碱性蛋白酶处理鹿血具有较好的抗疲劳作用,其次为中性蛋白酶。本研究结果可为鹿血的科学利用和抗疲劳产品开发提供理论依据。 展开更多
关键词 蛋白酶 酶解 鹿血 HPLC 抗运动疲劳
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双重实时荧光PCR快速鉴别人参和西洋参 被引量：5
7
作者 孙涛 周林 +5 位作者 滕少娜 何玲 陈亭旭 任风鸣 潘英文 孔德英 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第8期2986-2994,共9页
目的建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对,设计特异性的引物探针,建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq(Probe qPCR)10μL,人参上下游引物各0.5... 目的建立一种能够快速鉴定人参和西洋参的双重实时荧光PCR方法。方法通过对人参属及其近似种基因序列的分析比对,设计特异性的引物探针,建立双重实时荧光PCR检测方法。PCR反应体系为Premix Ex Taq(Probe qPCR)10μL,人参上下游引物各0.5μL,西洋参上下游引物各0.3μL,人参与西洋参特异性探针各0.4μL,DNA模板2μL,灭菌去离子水补至20μL。反应条件为95℃预变性30 s;然后以95℃变性5 s,60℃退火延伸30 s进行40个循环。应用该方法测试了27份DNA样品,包括7份人参、6份西洋参、4份人参与西洋参混合样、10份其他人参属样品及其他常见中药材样品的DNA,以确定该方法的特异性。将人参与西洋参样品DNA混合后10倍稀释成不同浓度后进行检测,用以确定该方法的灵敏度。结果人参及西洋参样品均在特定的荧光通道下出现典型的阳性扩增曲线,人参与西洋参混合样品均同时出现两条阳性扩增曲线,其它对照样品及空白对照均没有出现阳性扩增曲线。灵敏度检测结果显示该方法检测人参及西洋参的最低检测限均为2 pg DNA/反应。结论本实验建立的双重实时荧光PCR方法能够同时快速、准确、灵敏地鉴别出人参和西洋参。 展开更多
关键词 人参 西洋参 双重实时荧光PCR 快速鉴别
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林麝FASN基因CDS区克隆及序列分析
8
作者 谌颖莲 竭航 +4 位作者 赵贵军 封孝兰 张承露 吴佳勇 曾德军 《野生动物学报》 北大核心 2022年第2期370-378,共9页
为了解林麝(Moschus berezovskii)脂肪酸合酶(Fatty acid synthase,FASN)基因mRNA序列信息及解析麝香的生物机制,通过转录组测序、Trinity拼接、反转录PCR扩增和Singer测序获取林麝FASN基因mRNA序列,并对FASN蛋白序列进化树构建、二级... 为了解林麝(Moschus berezovskii)脂肪酸合酶(Fatty acid synthase,FASN)基因mRNA序列信息及解析麝香的生物机制,通过转录组测序、Trinity拼接、反转录PCR扩增和Singer测序获取林麝FASN基因mRNA序列,并对FASN蛋白序列进化树构建、二级结构、三级结构、互作蛋白、磷酸化分析及miRNAs结合预测,筛选与麝鼠(Ondatra zibethicus)FASN相同且与牛(Bos taurus)、山羊(Capra hircus)和绵羊(Ovis aries)不同的氨基酸位点作为麝香生物合成有关的关键位点。获取了林麝FASN基因的mRNA序列(GenBank ID:MW570770),其具有一定的物种保守性,筛选出16个关键位点,其中第307、602、657和1334位氨基酸能够改变蛋白羟基活性,预测出10个蛋白磷酸化位点,miR-1307-5p和miR-669与3′-UTR亲和能力较强。林麝FASN基因序列与其他物种之间的差异信息可为解析麝香生物合成机制提供参考。 展开更多
关键词 林麝 FASN 蛋白序列分析 麝香生物合成 MIRNAS
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