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丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1基因通过调控翻译过程影响神经胶质瘤U87细胞的增殖
被引量：
5
1
作者
熊焰
汪奇柏
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期983-987,共5页
目的:探讨丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1(SRSF1)基因对神经胶质瘤U87细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制。方法:采用基因沉默技术抑制SRSF1基因表达,获得2种不同靶点的SRSF1稳定沉默细胞系(shSRSF1-1组和shSRSF1-2组)。用CCK-8法检测S...
目的:探讨丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1(SRSF1)基因对神经胶质瘤U87细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制。方法:采用基因沉默技术抑制SRSF1基因表达,获得2种不同靶点的SRSF1稳定沉默细胞系(shSRSF1-1组和shSRSF1-2组)。用CCK-8法检测SRSF1沉默对神经胶质瘤U87细胞的增殖活性,流式细胞技术检测SRSF1沉默对U87细胞周期的影响,qPCR和WB实验检测SRSF1沉默对细胞分裂相关基因(CEP70和SMC4)m RNA和蛋白表达水平的影响,用WB实验检测SRSF1沉默对翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化的影响。结果:shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞中SRSF1蛋白表达均明显低于对照组(P<0.01),shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞增殖能力被显著抑制(P<0.01),并且处在G2期的细胞数量明显高于对照组(P<0.01)。与对照组比较,shSRSF1-1组和shSRSF1-2组细胞中细胞分裂相关基因CEP70和SMC4 mRNA水平无明显差异(P>0.05),但是蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞中翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化程度要明显低于对照组(P<0.01)。结论:沉默SRSF1基因通过降低翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化水平抑制细胞分裂相关基因CEP70和SMC4的翻译过程,最终使细胞阻滞在G2期,进而减弱神经胶质瘤U87细胞的增殖能力。
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关键词
丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1
神经胶质瘤
增殖
细胞周期
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职称材料
瞬时感受器电位通道在人脑微血管内皮细胞机械牵张中的作用及其信号转导机制
2
作者
孙彦龙
王志明
+4 位作者
蒲九君
周辉
唐寅斌
夏海龙
杨刚
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第21期2183-2186,共4页
目的观察瞬时感受器电位(transient receptor potential,TRP)通道在人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)机械牵张刺激中的作用,并对其信号转导入胞内的机制进行初步探讨。方法 HBMEC体外培养,采用...
目的观察瞬时感受器电位(transient receptor potential,TRP)通道在人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)机械牵张刺激中的作用,并对其信号转导入胞内的机制进行初步探讨。方法 HBMEC体外培养,采用多功能小型生物撞击机给予机械牵张刺激,根据不同施加条件将细胞分为对照、单纯牵张、牵张+SKF-96365(非选择性TRP通道阻滞剂)、牵张+低分子量肝素(low molecular weight heparin,LMWH)、牵张+一氧化氮合酶抑制剂(N-nitro-l-arginine methyl ester,L-NAME)共5组。采用激光扫描共聚焦显微镜观察胞内游离Ca2+分布情况,流式细胞仪检测牵张前后胞内Ca2+荧光强度变化;Western blot检测牵张前后一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达情况。结果流式细胞仪检测结果显示,单纯牵张组和牵张+LMWH组细胞内游离Ca2+浓度较对照组显著升高(P<0.05);牵张+SKF-96365组胞内Ca2+浓度较单纯牵张组明显降低(P<0.05)。Western blot检测结果显示,单纯牵张组细胞eNOS蛋白表达水平明显增高(P<0.05);牵张+SKF-96365组和牵张+L-NAME组eNOS蛋白表达水平较单纯牵张组明显降低(P<0.05)。结论 HBMEC胞膜TRP通道可感知机械牵张刺激的激活,继而引起胞内游离钙离子浓度升高,其转导机制可能主要与胞外Ca2+内流相关。
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关键词
机械牵张刺激
瞬时感受器电位通道
钙离子内流
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职称材料
题名
丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1基因通过调控翻译过程影响神经胶质瘤U87细胞的增殖
被引量：
5
1
作者
熊焰
汪奇柏
机构
重庆市
第九人民
医院
神经
外科
重庆市红十字会医院神经外科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期983-987,共5页
文摘
目的:探讨丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1(SRSF1)基因对神经胶质瘤U87细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制。方法:采用基因沉默技术抑制SRSF1基因表达,获得2种不同靶点的SRSF1稳定沉默细胞系(shSRSF1-1组和shSRSF1-2组)。用CCK-8法检测SRSF1沉默对神经胶质瘤U87细胞的增殖活性,流式细胞技术检测SRSF1沉默对U87细胞周期的影响,qPCR和WB实验检测SRSF1沉默对细胞分裂相关基因(CEP70和SMC4)m RNA和蛋白表达水平的影响,用WB实验检测SRSF1沉默对翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化的影响。结果:shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞中SRSF1蛋白表达均明显低于对照组(P<0.01),shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞增殖能力被显著抑制(P<0.01),并且处在G2期的细胞数量明显高于对照组(P<0.01)。与对照组比较,shSRSF1-1组和shSRSF1-2组细胞中细胞分裂相关基因CEP70和SMC4 mRNA水平无明显差异(P>0.05),但是蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞中翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化程度要明显低于对照组(P<0.01)。结论:沉默SRSF1基因通过降低翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化水平抑制细胞分裂相关基因CEP70和SMC4的翻译过程,最终使细胞阻滞在G2期,进而减弱神经胶质瘤U87细胞的增殖能力。
关键词
丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1
神经胶质瘤
增殖
细胞周期
Keywords
serine and arginine rich splicing factor 1(SRSF1)
glioma
proliferation
cell cycle
分类号
R739.4 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
瞬时感受器电位通道在人脑微血管内皮细胞机械牵张中的作用及其信号转导机制
2
作者
孙彦龙
王志明
蒲九君
周辉
唐寅斌
夏海龙
杨刚
机构
重庆
医科大学附属第一
医院
神经
外科
重庆市红十字会医院神经外科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第21期2183-2186,共4页
基金
国家临床重点专科建设项目(财社[2011]170号)
重庆市科委自然科学基金(CSTC2013jcyjA10079)~~
文摘
目的观察瞬时感受器电位(transient receptor potential,TRP)通道在人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)机械牵张刺激中的作用,并对其信号转导入胞内的机制进行初步探讨。方法 HBMEC体外培养,采用多功能小型生物撞击机给予机械牵张刺激,根据不同施加条件将细胞分为对照、单纯牵张、牵张+SKF-96365(非选择性TRP通道阻滞剂)、牵张+低分子量肝素(low molecular weight heparin,LMWH)、牵张+一氧化氮合酶抑制剂(N-nitro-l-arginine methyl ester,L-NAME)共5组。采用激光扫描共聚焦显微镜观察胞内游离Ca2+分布情况,流式细胞仪检测牵张前后胞内Ca2+荧光强度变化;Western blot检测牵张前后一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达情况。结果流式细胞仪检测结果显示,单纯牵张组和牵张+LMWH组细胞内游离Ca2+浓度较对照组显著升高(P<0.05);牵张+SKF-96365组胞内Ca2+浓度较单纯牵张组明显降低(P<0.05)。Western blot检测结果显示,单纯牵张组细胞eNOS蛋白表达水平明显增高(P<0.05);牵张+SKF-96365组和牵张+L-NAME组eNOS蛋白表达水平较单纯牵张组明显降低(P<0.05)。结论 HBMEC胞膜TRP通道可感知机械牵张刺激的激活,继而引起胞内游离钙离子浓度升高,其转导机制可能主要与胞外Ca2+内流相关。
关键词
机械牵张刺激
瞬时感受器电位通道
钙离子内流
Keywords
mechanical stretch
transient receptor potential channel
influx of calcium
分类号
R322.12 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.26 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1基因通过调控翻译过程影响神经胶质瘤U87细胞的增殖
熊焰
汪奇柏
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
5
在线阅读
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职称材料
2
瞬时感受器电位通道在人脑微血管内皮细胞机械牵张中的作用及其信号转导机制
孙彦龙
王志明
蒲九君
周辉
唐寅斌
夏海龙
杨刚
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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