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HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化
被引量：
4
1
作者
彭方毅
姜海蓉
+5 位作者
陈远翔
陈盛珍
林治华
彭方亮
赵卫兵
陈保德
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期395-398,418,共5页
目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109...
目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆。其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功。提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定。结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV16L1抗体发生特异性反应。结论:HPV16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础。
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关键词
病毒蛋白质类/生物合成
病毒蛋白质类/遗传学
大肠杆菌/遗传学
基因表达
克隆
分子
乳头状瘤病毒
人/遗传学
HPV16L1
原核表达
GST融合蛋白
疫苗
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职称材料
题名
HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化
被引量：
4
1
作者
彭方毅
姜海蓉
陈远翔
陈盛珍
林治华
彭方亮
赵卫兵
陈保德
机构
重庆
理工大学药学与生物工程学院
重庆市
第四
人民医院
妇产
科
重庆市第四人民医院麻醉科
浙江大学医学院附属第一
医院
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期395-398,418,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30571714
60873103)
+4 种基金
国家自然科学基金重点项目(30830090)
重庆市科委自然基金(2008BB5331
2009BB7231)
重庆市教委科学技术研究项目(KJ090614)
教育部科学技术研究重点项目(210178)资助
文摘
目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆。其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功。提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定。结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV16L1抗体发生特异性反应。结论:HPV16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础。
关键词
病毒蛋白质类/生物合成
病毒蛋白质类/遗传学
大肠杆菌/遗传学
基因表达
克隆
分子
乳头状瘤病毒
人/遗传学
HPV16L1
原核表达
GST融合蛋白
疫苗
Keywords
Viral proteins/biosyn
Viral proteins/genet
Escherichia coli/genet
Gene expression
Cloning
molecular
Papillomavirus
human/genet
HPV 16L1
Prokaryotic expression
GST fusion protein
Vaccines
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化
彭方毅
姜海蓉
陈远翔
陈盛珍
林治华
彭方亮
赵卫兵
陈保德
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
4
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