期刊文献+
共找到3篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化 被引量:4
1
作者 彭方毅 姜海蓉 +5 位作者 陈远翔 陈盛珍 林治华 彭方亮 赵卫兵 陈保德 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期395-398,418,共5页
目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109... 目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆。其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功。提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定。结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV16L1抗体发生特异性反应。结论:HPV16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 病毒蛋白质类/生物合成 病毒蛋白质类/遗传学 大肠杆菌/遗传学 基因表达 克隆 分子 乳头状瘤病毒 人/遗传学 HPV16L1 原核表达 GST融合蛋白 疫苗
在线阅读 下载PDF
喉癌中HPV不同亚型的检测及测序 被引量:3
2
作者 彭方毅 姜海蓉 +4 位作者 刘芳 杜志银 林治华 彭方亮 赵卫兵 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1689-1692,共4页
目的:检测人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)各型DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用。方法:用PCR检测123例喉癌组织及123例喉粘膜上皮组织中HPV各型DNA。同时进行DNA测序,结果:在123例喉癌标本中,HPV-L1,-16E6/E7,... 目的:检测人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)各型DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用。方法:用PCR检测123例喉癌组织及123例喉粘膜上皮组织中HPV各型DNA。同时进行DNA测序,结果:在123例喉癌标本中,HPV-L1,-16E6/E7,-18E6/E7阳性率都明显高于其他各型。123例喉粘膜PCR结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高;HPV-L1的阳性率高于HPV-16E6、E7,随着组织病变程度加重,HPV-L1的检出率逐渐增高。结论:HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用;L1片段适合用于检测HPV感染。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 聚合酶链反应 序列测定 喉癌
在线阅读 下载PDF
HPV16E7基因的原核克隆及表达 被引量:1
3
作者 姜海蓉 彭方毅 +4 位作者 刘芳 杜志银 林治华 彭方亮 赵卫兵 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1215-1217,共3页
目的:探讨从喉癌组织中HPV16E7蛋白的原核克隆及表达。方法:采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切pET28a(+)载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和We... 目的:探讨从喉癌组织中HPV16E7蛋白的原核克隆及表达。方法:采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切pET28a(+)载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测目标蛋白表达情况。结果:成功构建了原核表达质粒pET28/E7、HPV16E7融合蛋白在BL21(DE3)菌株中高效表达。结论:HPV16E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 HPV16E7 原核表达 SDS-PAGE WESTERN BLOT
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部