目的:制备携带人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)的重组腺病毒乳酸聚乙烯醇(poly-DL-lactide-poly,PELA)微球,探讨其对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法:采用溶剂挥发法双乳液体系,以可...目的:制备携带人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)的重组腺病毒乳酸聚乙烯醇(poly-DL-lactide-poly,PELA)微球,探讨其对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法:采用溶剂挥发法双乳液体系,以可降解的生物材料PELA包被携带TIMP-1基因的重组腺病毒制成微球,测定其粒径、载病毒量、包封率及释放规律。重组腺病毒微球感染HepG2细胞,荧光显微镜观测感染效率,透射电镜观测超微结构,半定量RT-PCR检测TIMP-1mRNA表达;MTT法检测HepG2细胞增殖。结果:成功构建包载TIMP-1重组腺病毒的PELA微球,直径约1.965μm,包封率为60%,载病毒率为10.5×108efu/mg,在120h内释放病毒量接近60%,总的释放时间长于240h。空白微球无毒性PELA病毒微球感染HepG2细胞后,细胞稳定表达TIMP-1mRNA;对HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,抑制率表达47%。结论:包载TIMP-1重组腺病毒的PELA微球可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,为化学高分子载体运载基因治疗肝癌提供了实验依据。展开更多
文摘目的:制备携带人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)的重组腺病毒乳酸聚乙烯醇(poly-DL-lactide-poly,PELA)微球,探讨其对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法:采用溶剂挥发法双乳液体系,以可降解的生物材料PELA包被携带TIMP-1基因的重组腺病毒制成微球,测定其粒径、载病毒量、包封率及释放规律。重组腺病毒微球感染HepG2细胞,荧光显微镜观测感染效率,透射电镜观测超微结构,半定量RT-PCR检测TIMP-1mRNA表达;MTT法检测HepG2细胞增殖。结果:成功构建包载TIMP-1重组腺病毒的PELA微球,直径约1.965μm,包封率为60%,载病毒率为10.5×108efu/mg,在120h内释放病毒量接近60%,总的释放时间长于240h。空白微球无毒性PELA病毒微球感染HepG2细胞后,细胞稳定表达TIMP-1mRNA;对HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,抑制率表达47%。结论:包载TIMP-1重组腺病毒的PELA微球可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,为化学高分子载体运载基因治疗肝癌提供了实验依据。
