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人结肠癌耐药细胞系HT29／L-OHP的建立及其生物学特性 被引量：11
1
作者 向征 张才全 汤为学 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期840-843,共4页
目的建立人结肠癌奥沙利铂耐药细胞系HT29/L-OHP,探讨结肠癌对奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)产生耐药的特征规律和耐药的机制。方法采用逐步递增L-OHP浓度,间歇作用体外诱导法培养建立了人结肠癌L-OHP耐药细胞模型HT29/L-OHP。MTT法测定... 目的建立人结肠癌奥沙利铂耐药细胞系HT29/L-OHP,探讨结肠癌对奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)产生耐药的特征规律和耐药的机制。方法采用逐步递增L-OHP浓度,间歇作用体外诱导法培养建立了人结肠癌L-OHP耐药细胞模型HT29/L-OHP。MTT法测定生长曲线、交叉耐药性和耐药指数;并用光镜、电镜、流式细胞仪(FCM)等方法观察其一般生物学特性的改变。结果历时3个月建成了L-OHP耐药细胞模型HT29/L-OHP,其耐药性能稳定,耐药指数为10.64;并且与5-氟尿嘧啶、长春新碱、阿霉素等多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性。HT29/L-OHP的细胞形态及染色体数目发生了改变;体外细胞群体倍增时间较亲代细胞延长29.71h;细胞周期分析结果显示其S期与G0/G1期细胞减少、G2/M期细胞增多。结论HT29/L-OHP细胞是模拟临床用药特点建立的耐药性较稳定的多药耐药细胞,具有耐药细胞的基本生物学特性,是研究L-OHP耐药机制及筛选逆转剂的理想细胞模型。 展开更多
关键词 人结肠癌细胞 多药耐药 奥沙利铂
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结肠癌中VEGF-D和uPA的表达与侵袭转移的关系 被引量：11
2
作者 李竹林 朱明才 董蒲江 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第22期2146-2149,共4页
目的探讨血管内皮生长因子-D(endothelial growth factor-D,VEGF-D)和尿激酶型纤维蛋白酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)在结肠癌中的表达特点及临床意义。方法选取30例结肠癌组织及同一段肠管距离肿瘤组织5cm以... 目的探讨血管内皮生长因子-D(endothelial growth factor-D,VEGF-D)和尿激酶型纤维蛋白酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)在结肠癌中的表达特点及临床意义。方法选取30例结肠癌组织及同一段肠管距离肿瘤组织5cm以上的正常组织,分别应用免疫组化S-P法、Western blot方法检测VEGF-D和uPA在结肠癌组织和正常组织中的表达特点,分析它们与临床病理分期之间的关系。结果VEGF-D和uPA在结肠癌组织和正常组织中均有表达,主要表达于细胞质,胞核也有表达,并且在肿瘤组织中的表达明显高于正常组织(P<0.01)。VEGF-D或uPA的表达活性在Dukes C+D期明显高于A+B期(P<0.01),在有淋巴结转移组和远处转移组的表达也高于相应无转移组(P<0.05、P<0.01),随着肿瘤组织分化程度的增高活性依次降低(P<0.05)。结论VEGF-D和uPA在结肠癌组织中的高表达可能在结肠癌的发生发展过程中扮演重要角色。 展开更多
关键词 结肠癌 VEGF—D UPA 转移
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奥沙利铂抗人结肠癌细胞株HT29增殖及其机制的研究 被引量：6
3
作者 向征 张才全 汤为学 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期606-609,共4页
目的观察抗肿瘤药物奥沙利铂对人结肠癌细胞株HT29体外增殖的影响,初步探讨其作用机制。方法采用人结肠癌细胞株HT29作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的奥沙利铂对细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察细胞形态和超微结构的改变;... 目的观察抗肿瘤药物奥沙利铂对人结肠癌细胞株HT29体外增殖的影响,初步探讨其作用机制。方法采用人结肠癌细胞株HT29作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的奥沙利铂对细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察细胞形态和超微结构的改变;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡的情况;免疫细胞化学法检测细胞周期蛋白及凋亡相关基因蛋白的表达。结果奥沙利铂对HT29细胞的增殖有抑制作用而且呈剂量和时间依赖性。奥沙利铂作用72h后,电镜可见凋亡细胞及凋亡小体;流式细胞仪检测发现细胞阻滞于G2/M期,G0/G1、S期细胞减少及出现凋亡峰;免疫细胞化学显示Bax和Fas表达增强,CyclinB1、Bcl-2、PCNA表达减弱。结论奥沙利铂对HT29结肠癌细胞的增殖有抑制作用,其作用机制与细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 奥沙利铂 结肠癌 增殖 细胞周期 凋亡
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TSG101-siRNA对肝癌耐药细胞株QGY／CDDP的逆转作用 被引量：4
4
作者 向征 张才全 汤为学 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期170-173,共4页
目的构建TSG101(tumor susceptibility gene101)小干扰RNA(TSG101-siRNA)的真核表达载体,观察RNA干扰沉默TSG101基因后化疗药物顺铂(CDDP)对肝癌耐药细胞株QGY/CDDP增殖的影响。方法根据小干扰RNA的设计原则由计算机软件辅助设计TSG101... 目的构建TSG101(tumor susceptibility gene101)小干扰RNA(TSG101-siRNA)的真核表达载体,观察RNA干扰沉默TSG101基因后化疗药物顺铂(CDDP)对肝癌耐药细胞株QGY/CDDP增殖的影响。方法根据小干扰RNA的设计原则由计算机软件辅助设计TSG101的靶序列,应用DNA重组技术将目的序列克隆入小干扰RNA的表达载体;RT-PCR检测TSG101-siRNA对QGY/CDDP细胞tsg101mRNA表达的影响;Western blot检测TSG101-siRNA对TSG101基因表达蛋白的抑制效率;采用MTT法测定TSG101-siRNA联合化疗药物CDDP对QGY/CDDP的增殖抑制作用。结果测序显示干扰载体构建成功,TSG101-siRNA能抑制tsg101mRNA表达,使QGY/CDDP细胞TSG101蛋白的表达下降,抑制QGY/CDDP细胞的增殖,明显增强CDDP对QGY/CDDP的增殖抑制。结论TSG101-siRNA的真核表达载体能有效地抑制QGY/CDDP细胞的增殖,提高化疗药物CDDP对QGY/CDDP的抑制率,能逆转肝癌耐药细胞株QGY/CDDP对CDDP的耐药性。 展开更多
关键词 肝癌 耐药 小干扰RNA TSG101
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结肠癌α-catenin和FAK的表达与侵袭转移的关系 被引量：4
5
作者 王吉明 程勇 +1 位作者 董蒲江 胡祥 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期833-836,共4页
目的:探讨α-catenin和黏着斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK)在结肠癌中的表达特点及临床意义。方法:分别应用免疫组化、Western blot方法来检测34例结肠癌患者肿瘤组织及相应正常组织的α-catenin和FAK的表达。结果:α-catenin和FAK... 目的:探讨α-catenin和黏着斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK)在结肠癌中的表达特点及临床意义。方法:分别应用免疫组化、Western blot方法来检测34例结肠癌患者肿瘤组织及相应正常组织的α-catenin和FAK的表达。结果:α-catenin和FAK在肿瘤组织和正常组织中均有表达,主要表达于细胞膜和细胞浆。α-catenin的表达在肿瘤组织中明显低于正常组织(t=10.693,P<0.01),FAK在肿瘤组织中的表达明显高于正常组织(χ2=10.350,P=0.001),两者在肿瘤组织中的表达呈弱负相关(Pearson相关系数为-0.383,P=0.025)。α-catenin和FAK的表达在结肠癌TNM分期、有无远处转移、和有无淋巴转移方面差异有显著意义(P<0.01),与患者的年龄、性别之间未发现关系。α-catenin的表达在肿瘤的病理组织分化程度方面差异亦有显著意义,FAK在不同肿瘤病理组织分化程度之间表达没有统计学意义。结论:肿瘤组织中FAK的高表达与α-catenin的低表达,共同在结肠癌的发生发展过程中扮演着重要角色。 展开更多
关键词 结肠癌α-连接蛋白 黏着斑激酶 转移
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运用激光捕获显微切割对食管鳞状上皮癌蛋白质组的分析 被引量：2
6
作者 汪斌 李俊材 +1 位作者 傅仲学 董蒲江 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第19期1869-1872,共4页
目的分析食管鳞癌与正常食管上皮细胞蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。方法激光捕获显微切割技术分离食管鳞癌和正常食管上皮细胞的纯细胞,双向电泳和质谱的方法检测两者表达的差异蛋白。结果48个差异蛋白点,通过质谱鉴定... 目的分析食管鳞癌与正常食管上皮细胞蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。方法激光捕获显微切割技术分离食管鳞癌和正常食管上皮细胞的纯细胞,双向电泳和质谱的方法检测两者表达的差异蛋白。结果48个差异蛋白点,通过质谱鉴定出20种有意义的蛋白,其中11种蛋白如galectin7、14-3-3proteinε等在食管鳞癌细胞表达明显增高,9种蛋白如MTCBP-1等表达下调。结论激光捕获显微切割可以有效地解决组织异质性的问题;食管鳞癌和正常食管上皮细胞的2-DE蛋白质图谱具有明显的差异表达,提示食管鳞癌的发生是多种蛋白质功能共同作用的结果。 展开更多
关键词 食管鳞癌 蛋白质组 激光捕获显微切割
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热休克处理诱导小鼠心脏HO-1表达并延长其移植至大鼠的存活时间
7
作者 刘胜春 姚榛祥 +2 位作者 唐华 孙正魁 董蒲江 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第14期1483-1486,共4页
目的探索热休克诱导NIH小鼠心脏表达HO-1的方法及其对延迟性异种心脏移植排斥反应的影响。方法采用取暖器加热NIH小鼠，使其温度维持在42℃20min，分别于加热后1、6、12、24、48、72h切取心脏，应用RT-PCR、Western blot分别检测HO-1 m... 目的探索热休克诱导NIH小鼠心脏表达HO-1的方法及其对延迟性异种心脏移植排斥反应的影响。方法采用取暖器加热NIH小鼠，使其温度维持在42℃20min，分别于加热后1、6、12、24、48、72h切取心脏，应用RT-PCR、Western blot分别检测HO-1 mRNA、HO-1蛋白以及HO-1酶活性检测。借助NIH小鼠-Wistar大鼠颈部异位心脏移植模型，对热休克处理供体并结合CoPP（cobalt protoporphyrin，CoPP）、ZnPP（zinc protoporphyrin，ZnPP）了解热休克诱导HO-1对移植心脏存活时间的影响。结果热休克预处理6h后心脏组织HO-1 mRNA、蛋白表达及酶活性开始增多，以24～48h为高峰，24h组和48h组与其余任意组比较均有显著性差异（t=3．507，P〈0．05），72h后开始下降。热休克组心脏存活时间明显长于空白对照组（t=5．703，P〈0．01）和ZnPP＋热休克组（t=4．913，P〈0．001）。而热休克＋CoPP组移植心脏存活时间[（6．250±1．512）d]明显长于热休克组[（4．750±1．363）d]（t=2．084，P〈0．01）。当热休克与ZnPP和CoPP同时使用时，移植心脏存活时间略短于热休克组，但其差异无显著性（t=0．816，P〉0．05）。结论取暖器加热NIH小鼠可诱导心脏HO-1的产生，能延长NIH小鼠-Wister大鼠心脏移植存活时间，推迟DXR的发生。 展开更多
关键词 预处理 热休克 血红素氧合酶-1 异种心脏移植
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低位直肠癌行腹腔镜会阴直肠切除术的应用
8
作者 张军 王子卫 +1 位作者 程勇 魏正强 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期1721-1722,共2页
目的 探讨经腹腔镜会阴直肠切除术（laparoscopic rectoperineal resection，LAPR）治疗低位直肠癌的可行性。方法 对42例直肠癌患者经腹腔镜实施LAPR的临床资料进行回顾分析。结果 42例患者手术顺利。手术时间2～4．5h，平均3．5h；术... 目的 探讨经腹腔镜会阴直肠切除术（laparoscopic rectoperineal resection，LAPR）治疗低位直肠癌的可行性。方法 对42例直肠癌患者经腹腔镜实施LAPR的临床资料进行回顾分析。结果 42例患者手术顺利。手术时间2～4．5h，平均3．5h；术中出血20～60ml，平均40ml；术后1～2d恢复胃肠功能并下床活动；住院6～14d，平均8d。术后随访时间1～4年，术后因肝转移死亡1例，失访2例，有10例术后不足1年的患者，未发现转移及复发。结论 全直肠系膜切除（total mesorectal excision，TME）是直肠癌根治切除术必须遵循的原则，经LAPR治疗低位直肠癌安全可行，且创伤小、术后疼痛轻、恢复快． 展开更多
关键词 直肠癌 全直肠系膜切除术 腹腔镜会阴直肠切除术
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老年直肠癌患者经腹会阴联合直肠癌切除术的危险因素分析
9
作者 向征 张才全 王子卫 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期846-848,共3页
目的分析影响老年直肠癌患者经腹会阴联合直肠癌切除术的危险因素。方法对1995年7月至2005年7月60岁以上的137例直肠癌患者行经腹会阴联合直肠癌切除术(Miles式)的资料进行回顾性分析,确定影响老年直肠癌患者Miles手术的危险因素。结果... 目的分析影响老年直肠癌患者经腹会阴联合直肠癌切除术的危险因素。方法对1995年7月至2005年7月60岁以上的137例直肠癌患者行经腹会阴联合直肠癌切除术(Miles式)的资料进行回顾性分析,确定影响老年直肠癌患者Miles手术的危险因素。结果术前并有疾病、血红蛋白质低于70g/L、身体质量指数(BMI)低于18.5kg/m2、术中失血量大于或等于1000ml、手术时间6h以上是老年直肠癌患者Miles手术的危险因素,发生死亡的相对危险度分别为4.76、5.85、6.49、5.47、3.90,发生并发症的相对危险度分别为2.02、2.27、1.83、2.01、1.70。结论老年直肠癌患者行直肠癌切除时应综合考虑以上危险因素,以便提高手术的安全性。 展开更多
关键词 老年人 直肠肿瘤 腹会阴联合直肠癌切除术 危险因素
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