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题名PLCζ在INS-1细胞中的表达及功能初步分析
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作者
周恒宇
邓华聪
吴明
罗娟
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机构
重庆医科大学附属第一医院内分泌科
重庆市云阳县妇幼保健医院
重庆市地勘局二零五地质队医院
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出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期1305-1308,共4页
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基金
国家自然科学基金(30700384)
重庆市自然科学基金资助项目(2006BB5098)
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文摘
目的:探讨磷脂酶Cζ(PhospholipaseCζ,PLCζ)在INS-1细胞中的表达,并初步分析PLCζ对葡萄糖刺激胰岛素分泌(Glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响。方法:(1)设计6类PLC的引物,RT-PCR检测INS-1细胞中各类PLC的表达。(2)设定葡萄糖浓度梯度:10、20、40、80、100 mmol/L,分别刺激INS-1细胞40 min,ELISA检测细胞培养上清液中胰岛素的含量,确定最适葡萄糖刺激浓度,设定时间梯度:20、40、60、80、120 min,以最适葡萄糖浓度刺激后ELISA检测细胞培养上清液中胰岛素含量,确定最适刺激时间。(3)用最适葡萄糖浓度刺激INS-1细胞适当时间后,半定量RT-PCR、Western Blot检测PLCζ的表达变化。结果:(1)6类PLC中PLCβ、PLCγ、PLCδ、PLCζ、PLCη在INS-1细胞中表达,PLCε不表达。(2)用40 mmol/L葡萄糖刺激60 min,INS-1细胞的胰岛素分泌量最大,半定量RT-PCR、Western Blot检测葡萄糖刺激INS-1细胞后PLCζ的表达上调。结论:(1)先前发现在精子中特异表达的PLCζ在INS-1细胞中有表达。(2)葡萄糖刺激INS-1细胞后PLCζ的表达明显增加,提示PLCζ可能参与GSIS信号转导。
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关键词
磷脂酶cζ
表达
RT-PCR
葡萄糖刺激胰岛素分泌
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Keywords
PLCζ
Expression
RT-PCR
Glucose-stimulated insulin secretion
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分类号
R587
[医药卫生—内分泌]
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