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人类pEGFP/H2B真核表达质粒的构建及表达
被引量：
1
1
作者
徐远久
熊异平
+4 位作者
吴建敏
陈仕银
夏洪安
郑爱华
徐海波
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期1060-1062,共3页
目的:构建人H2B基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达质粒,并在HEK293细胞中表达。方法:通过RT-PCR从HEK293细胞总RNA中扩增获得H2B基因的部分cDNA序列,与载体pEGFP-C1连接构建H2B基因与GFP融合表达的真核表达质粒pEGFP/H2B,经酶切和测...
目的:构建人H2B基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达质粒,并在HEK293细胞中表达。方法:通过RT-PCR从HEK293细胞总RNA中扩增获得H2B基因的部分cDNA序列,与载体pEGFP-C1连接构建H2B基因与GFP融合表达的真核表达质粒pEGFP/H2B,经酶切和测序鉴定;应用脂质体转染技术将重组质粒转染HEK293细胞观察融合蛋白的表达。结果:成功构建H2B基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达载体,与对照组中转染空载体pEGFP-C1的HEK293细胞中的弥漫荧光相比,转染重组质粒的细胞中可观察到绿色荧光蛋白集中表达在细胞核内,分裂期细胞中可见与染色体形态一致的绿色荧光。结论:该载体的成功构建为研究染色体的分离机制建立了有效的观察体系。
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关键词
H2B基因
绿色荧光蛋白
HEK293细胞
染色体分离
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职称材料
题名
人类pEGFP/H2B真核表达质粒的构建及表达
被引量：
1
1
作者
徐远久
熊异平
吴建敏
陈仕银
夏洪安
郑爱华
徐海波
机构
四川省广安市人民
医院
检验
科
重庆市合川区中医院检验科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期1060-1062,共3页
文摘
目的:构建人H2B基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达质粒,并在HEK293细胞中表达。方法:通过RT-PCR从HEK293细胞总RNA中扩增获得H2B基因的部分cDNA序列,与载体pEGFP-C1连接构建H2B基因与GFP融合表达的真核表达质粒pEGFP/H2B,经酶切和测序鉴定;应用脂质体转染技术将重组质粒转染HEK293细胞观察融合蛋白的表达。结果:成功构建H2B基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达载体,与对照组中转染空载体pEGFP-C1的HEK293细胞中的弥漫荧光相比,转染重组质粒的细胞中可观察到绿色荧光蛋白集中表达在细胞核内,分裂期细胞中可见与染色体形态一致的绿色荧光。结论:该载体的成功构建为研究染色体的分离机制建立了有效的观察体系。
关键词
H2B基因
绿色荧光蛋白
HEK293细胞
染色体分离
Keywords
H2B gene
Green fluorescence protein
HEK293 cell
Chromosome segregation
分类号
R44 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
人类pEGFP/H2B真核表达质粒的构建及表达
徐远久
熊异平
吴建敏
陈仕银
夏洪安
郑爱华
徐海波
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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