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三种隐血检测法的方法学评价及结果分析 被引量:5
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作者 李月 代震宇 廖方洪 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1212-1216,共5页
目的:对血红蛋白单克隆抗体免疫胶体金法、血红蛋白与转铁蛋白联合免疫法、匹拉米洞化学法3种隐血检测法进行方法学评价,找出高临床符合度的隐血检测方法。方法:配制不同浓度的血红蛋白液,测出以上3种方法的最低检出限与最高检测浓度;利... 目的:对血红蛋白单克隆抗体免疫胶体金法、血红蛋白与转铁蛋白联合免疫法、匹拉米洞化学法3种隐血检测法进行方法学评价,找出高临床符合度的隐血检测方法。方法:配制不同浓度的血红蛋白液,测出以上3种方法的最低检出限与最高检测浓度;利用5种常见动物的抗凝血评价隐血检测方法的特异性;收集住院患者粪便和胃液标本同时进行3种方法的隐血检测,内镜检查为金标准,计算临床灵敏度、临床特异性、阴性似然比、阳性似然比、尤登指数、临床符合率。结果:凯创试剂卡胶体金的检测范围为200 ng/m L至10 mg/m L,沃文特试剂卡胶体金的检测范围为300 ng/m L至2.5 mg/m L,匹拉米洞化学法的最低检测限为2 500 ng/m L,联合免疫法的最低检测限为10 ng/m L;凯创试剂卡胶体金、沃文特试剂卡胶体金、匹拉米洞化学法、联合免疫法检测粪便与胃液隐血临床符合率分别为96.0%、95.8%、79.5%、97.5%;92.9%、92.9%、94.6%、90.2%。粪便隐血检测的结果,4组间有明显的差异(P=0.000),但胃液隐血检测结果组间无差异(P=0.083)。结论:粪便标本的隐血检测,联合免疫法的临床符合度优于血红蛋白免疫法,血红蛋白免疫法优于化学法;胃液标本的隐血检测,3种方法之间无明显差异。 展开更多
关键词 隐血 消化道出血 匹拉米洞法 血红蛋白 转铁蛋白
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ALEX1在乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 高月 黄艺 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期353-357,共5页
目的:检测乳腺癌组织中ALEX1的表达水平,明确ALEX1与其临床病理特征是否具有相关性。方法:应用real-time PCR、免疫组化方法检测乳腺癌组织中ALEX1含量。结果:乳腺癌组织ALEX1蛋白的表达水平低于癌旁组织(P<0.01);ALEX1的表达与乳腺... 目的:检测乳腺癌组织中ALEX1的表达水平,明确ALEX1与其临床病理特征是否具有相关性。方法:应用real-time PCR、免疫组化方法检测乳腺癌组织中ALEX1含量。结果:乳腺癌组织ALEX1蛋白的表达水平低于癌旁组织(P<0.01);ALEX1的表达与乳腺癌病理分级、临床分期和分子分型有关(P<0.05),而与病人年龄、肿瘤大小和肿瘤类型无关。此外,real-time PCR结果表明,乳腺癌组织中ALEX1的mRNA表达明显低于对应的癌旁组织(P<0.01)。结论:ALEX1在乳腺癌组织中的表达明显低于相应的癌旁组织,乳腺癌的病理分级、临床分期越高,ALEX1的表达水平越低。 展开更多
关键词 ALEX1 乳腺癌 病理分级 临床分期
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ALEX1基因过表达慢病毒载体的构建和鉴定 被引量:1
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作者 高月 邓小芳 雷继魁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期678-681,共4页
目的:探讨构建Arm重复蛋白1(ALEX1)基因过表达慢病毒表达载体,感染乳腺癌细胞系SK-BR3后观察ALEX1的表达,为研究ALEX1在乳腺癌中的作用及机制奠定基础。方法:利用DNA重组技术将ALEX1基因插入到慢病毒穿梭质粒LV5中,获得重组慢病毒质... 目的:探讨构建Arm重复蛋白1(ALEX1)基因过表达慢病毒表达载体,感染乳腺癌细胞系SK-BR3后观察ALEX1的表达,为研究ALEX1在乳腺癌中的作用及机制奠定基础。方法:利用DNA重组技术将ALEX1基因插入到慢病毒穿梭质粒LV5中,获得重组慢病毒质粒V-ALEX1,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,用Lipofectamine 2000将重组质粒和慢病毒包装质粒系统(p Gag/Pol、pRev、p VSV-G)转染293T细胞中包装成重组慢病毒颗粒,经流式细胞术测定重组慢病毒滴度。将成功包装的ALEX1过表达慢病毒载体(LV5-ALEX1)和阴性对照载体(LV5-NC),感染SK-BR3细胞(MOI为10)48~72 h,Realtime PCR和Western blot法分析ALEX1表达情况。结果:酶切鉴定结果显示:产生约1 500 bp的片段,片段大小与ALEX1基因cDNA大小一致。DNA测序比对说明测序结果与预期ALEX1基因序列完全一致,证实ALEX1基因正确插入载体中,成功构建ALEX1基因过表达载体。经293T细胞包装后,成功获得病毒滴度为4.25×10~8TU/ml的重组慢病毒LV5-ALEX1。Realtime PCR和western blot结果显示:与感染LV5-NC的SK-BR3细胞相比,LV5-ALEX1感染可明显增加ALEX1 mRNA及蛋白的表达水平。结论:成功构建ALEX1基因过表达慢病毒载体,ALEX1基因过表达慢病毒能够感染乳腺癌SK-BR3细胞,可使外源基因获得稳定过表达。 展开更多
关键词 ALEX1 慢病毒 构建 鉴定
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华蟾素通过wee1蛋白调控卵巢癌细胞SKOV3的增殖与凋亡 被引量:5
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作者 郭镜 高月 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期857-861,共5页
目的观察华蟾素(cinobufotalin, CINO)是否通过抑制wee1蛋白激酶的表达而影响卵巢癌细胞SKOV3增殖与凋亡。方法将pcDNA-wee1转染卵巢癌细胞,构建wee1过表达SKOV3细胞并用Real-time PCR和Western blotting鉴定过表达情况,按10μg/mL CIN... 目的观察华蟾素(cinobufotalin, CINO)是否通过抑制wee1蛋白激酶的表达而影响卵巢癌细胞SKOV3增殖与凋亡。方法将pcDNA-wee1转染卵巢癌细胞,构建wee1过表达SKOV3细胞并用Real-time PCR和Western blotting鉴定过表达情况,按10μg/mL CINO干预处理和分组。CCK8法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组作用48 h的细胞凋亡情况;Western blotting检测各组作用48 h时Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达情况。结果 Real-time PCR和Western blotting检测结果显示,pcDNA-wee1组wee1的表达明显高于空白对照组,而与pcDNA-wee1组比较,CINO+pcDNA-wee1组wee1的表达明显降低。与pcDNA-wee1组相比,CINO+pcDNA-wee1组卵巢癌细胞的增殖明显抑制(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05)。Western blotting结果显示,与pcDNA-wee1组比较,CINO+pcDNA-wee1组Bcl-2蛋白表达降低,而Bax和Caspase-3蛋白表达升高。结论 CINO可能通过降低wee1表达而抑制卵巢癌细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 wee1蛋白激酶 华蟾素 细胞增殖 细胞凋亡 卵巢癌
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ARMCX1对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 肖莉 高月 +4 位作者 马秀洁 孙雪竹 李亚娟 曹芳蕾 范雪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期170-174,共5页
目的:通过RNA干扰技术敲减含Armadillo重复序列X连锁蛋白1(Armadillo repeat-containing X-linked protein 1,ARMCX1)的表达,观察ARMCX1对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡等生物学特性的影响,为研究ARMCX1在宫颈癌发病机制中的作用提供依据... 目的:通过RNA干扰技术敲减含Armadillo重复序列X连锁蛋白1(Armadillo repeat-containing X-linked protein 1,ARMCX1)的表达,观察ARMCX1对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡等生物学特性的影响,为研究ARMCX1在宫颈癌发病机制中的作用提供依据。方法:敲减ARMCX1表达后,通过流式细胞术检测SiHa细胞的周期分布和凋亡的变化,利用平板技术观察敲减10 d后宫颈癌SiHa细胞的集落形成情况。利用Western blot实验检测细胞增殖和凋亡相关蛋白水平的变化。结果:敲减ARMCX1表达后SiHa细胞的集落形成能力明显受抑制(P<0.05),细胞周期阻滞在S期,细胞中细胞周期蛋白E(cyclin E)和磷酸化细胞分裂周期蛋白25A(cell division cycle 25A,Cdc25A)的蛋白水平降低。同时,敲减ARMCX1表达促进SiHa细胞的凋亡,Bcl-2蛋白表达量显著减少,Bax和active caspase-3蛋白量显著增加(P<0.05)。结论:敲减ARMCX1的表达抑制SiHa细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 SIHA细胞 细胞增殖 细胞凋亡 ARMCX1蛋白
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