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女黄扶正提取液体外抗羊痘病毒活性及对小鼠免疫功能的影响
1
作者 牟豪 周建方 +4 位作者 余远迪 朱买勋 许国洋 闫志强 伍涛 《甘肃农业大学学报》 北大核心 2025年第1期19-26,共8页
【目的】研究女黄扶正提取液体外对羊痘病毒(goat pox virus,GTPV)的抑制作用及其机制,以及调节小鼠免疫功能的作用。【方法】测定女黄扶正提取液对羊肾细胞的毒性、确定最佳的用药浓度,分别测定病毒感染12、24、36、48 h后病毒拷贝数和... 【目的】研究女黄扶正提取液体外对羊痘病毒(goat pox virus,GTPV)的抑制作用及其机制,以及调节小鼠免疫功能的作用。【方法】测定女黄扶正提取液对羊肾细胞的毒性、确定最佳的用药浓度,分别测定病毒感染12、24、36、48 h后病毒拷贝数和TCID50。通过qPCR分析药物处理组、对照组、空白组的细胞炎性因子IL-1β、TNF-α、IFN-β表达量。检测给药后免疫抑制小鼠血清中免疫指标及脾T淋巴细胞转化能力。【结果】女黄扶正提取液对羊肾细胞存在一定细胞毒性,在添加量为1 mg/mL时对细胞毒性最小,感染羊痘病毒12、24、36、48 h后,病毒拷贝数低于对照组,在48 h呈现显著性差异(P<0.05);病毒TCID50低于对照组,在24、48 h呈现显著性差异(P<0.05、P<0.01)。感染病毒后的药物处理组与对照组的细胞炎性因子IL-1β、TNF-α、IFN-β的表达量无显著性差异。给药后,女黄扶正提取液中剂量组小鼠脾T淋巴细胞转化能力明显升高,与模型组相比,差异极显著(P<0.01);免疫抑制小鼠血清中IFN-γ、IL-2升高,与模型组相比,差异极显著(P<0.01)。【结论】女黄扶正提取液可以体外抑制羊肾细胞中GTPV的增殖,提高小鼠IFN-γ、IL-2水平,调节机体免疫功能,为提高机体免疫及未来抗病毒药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 女黄扶正提取液 GTPV 抗病毒活性 免疫调节
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山羊痘病毒在不同日龄山羊睾丸细胞中的生长特性研究 被引量：1
2
作者 牟豪 余远迪 +1 位作者 许国洋 杨柳 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期799-803,共5页
【目的】明确山羊痘病毒(GTPV)AV41弱毒疫苗株在不同日龄山羊原代睾丸细胞中的增殖效率,为选择病毒或疫苗株的培养细胞提供数据支撑。【方法】通过传统方式对7日龄和60日龄山羊睾丸细胞分离培养,利用长时间动态细胞成像及数据分析系统比... 【目的】明确山羊痘病毒(GTPV)AV41弱毒疫苗株在不同日龄山羊原代睾丸细胞中的增殖效率,为选择病毒或疫苗株的培养细胞提供数据支撑。【方法】通过传统方式对7日龄和60日龄山羊睾丸细胞分离培养,利用长时间动态细胞成像及数据分析系统比较2个日龄细胞的生长效率;接种GTPV,观察2个日龄细胞在感染病毒后的形态特征;通过间接免疫荧光和荧光定量PCR比较GTPV的增殖效率。【结果】7日龄和60日龄山羊睾丸细胞的形态特征和生长速率无明显差异;接种GTPV后,2个日龄的原代山羊睾丸细胞均能产生细胞病变,但是出现细胞病变的时间以及病变特征存在差别。间接免疫荧光和荧光定量PCR结果表明:GPTV在60日龄山羊睾丸细胞中的增殖效率高于7日龄。【结论】GTPV在7日龄和60日龄山羊原代睾丸细胞中均能发生病毒增殖,且2种细胞均能发生明显的细胞病变,但60日龄细胞的增殖效率高于7日龄细胞。研究结果对采用山羊睾丸细胞培养GTPV弱毒株有一定的指导作用。 展开更多
关键词 山羊原代睾丸细胞 山羊痘病毒 细胞病变 增殖效率
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弗氏柠檬酸杆菌的鉴定及其药敏试验
3
作者 许国洋 付文贵 +6 位作者 付利芝 闫志强 高广亮 邓娟 戴玉娇 庞丽霞 翟少钦 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期92-96,共5页
为进一步明确分离自仔猪腹泻肛拭子样本的弗氏柠檬酸杆菌病原特性、耐药情况及其对小鼠的致病性,试验通过5%兔鲜血TSA培养基培养、生化指标测定、敏感药物和耐药基因筛选对其进行鉴定,并用其腹腔注射攻毒小白鼠,分析其对小鼠的致病性。... 为进一步明确分离自仔猪腹泻肛拭子样本的弗氏柠檬酸杆菌病原特性、耐药情况及其对小鼠的致病性,试验通过5%兔鲜血TSA培养基培养、生化指标测定、敏感药物和耐药基因筛选对其进行鉴定,并用其腹腔注射攻毒小白鼠,分析其对小鼠的致病性。结果显示,分离到的弗氏柠檬酸杆菌在血平板上生长时导致溶血现象。生化试验中,硝酸盐还原、山梨醇和葡萄糖发酵等9个检测指标为阳性;且该菌对氧氟沙星、诺氧沙星、万古霉素、青霉素和链霉素耐药,并携带aacA-aphD、ileS和vanA3种耐药基因。该菌对小鼠的致死率为60%,剖检发现小鼠肝脏、肺脏、肠道、肾脏和脾脏组织发生不同程度病理变化,其中,小鼠肝脏和肺脏组织的出血症状最为明显;组织病理学观察发现,肝脏组织可见多量中央静脉淤血,肝窦内可见淤血;肺脏组织可见大量血管淤血,大面积肺泡壁间质淤血;肠绒毛黏膜上皮与固有层轻度分离。试验结果可为弗氏柠檬酸杆菌致病机理的进一步研究提供参考,也可为仔猪潜在细菌性疫病防治提供了数据支撑。 展开更多
关键词 猪 弗氏柠檬酸杆菌 分离鉴定 耐药基因 致病性
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鸡常见细菌性疾病及防治措施 被引量：1
4
作者 郑华 闫志强 +1 位作者 许国洋 余远迪 《现代畜牧科技》 2024年第1期58-60,共3页
鸡是人类重要的食用禽类之一,其肉类和蛋类是人类的重要食品来源。由于鸡的生长环境和生活习性容易受到各种细菌的感染,导致鸡细菌性疾病是鸡养殖业中常见的疾病之一。该文通过对鸡常见细菌性疾病及其传播途径、药物和生物安全防治等方... 鸡是人类重要的食用禽类之一,其肉类和蛋类是人类的重要食品来源。由于鸡的生长环境和生活习性容易受到各种细菌的感染,导致鸡细菌性疾病是鸡养殖业中常见的疾病之一。该文通过对鸡常见细菌性疾病及其传播途径、药物和生物安全防治等方面进行综述,旨在喂养鸡业提供科学依据和参考,促进鸡养殖业的健康发展。 展开更多
关键词 鸡 细菌性疾病 传播途径 防治
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猪流行性腹泻病的流行特点及防控概述 被引量：3
5
作者 李波 尹乐子 +3 位作者 余远迪 王瑶 王苗利 杨晓雪 《现代畜牧科技》 2024年第4期115-117,共3页
猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是一种由猪流行性腹泻病毒(PorcineEpidemicDiarrheaVirus,PEDV)引起的一种急性接触性肠道传染病。该病毒主要通过粪-口途径传播,猪感染后会引起严重的腹泻、呕吐和脱水,致死率极高,可达100... 猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是一种由猪流行性腹泻病毒(PorcineEpidemicDiarrheaVirus,PEDV)引起的一种急性接触性肠道传染病。该病毒主要通过粪-口途径传播,猪感染后会引起严重的腹泻、呕吐和脱水,致死率极高,可达100%。即使有仔猪能够侥幸存活,相比健康仔猪,幸存仔猪的日增重等生长性能远远达不到生猪养殖生产指标,只能淘汰处理,给养猪业造成了巨大的经济损失。自20世纪80年代初在欧洲首次发现以来,猪流行性腹泻已经成为全球猪业面临的重要问题之一。该文旨在综述猪流行性腹泻的病原特征、流行特征、致病机制、疫苗研发等方面进行综述,以期为养猪业提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 传播途径 感染机制 防控措施
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羊口疮病毒F1L蛋白对山羊痘病毒黏附BHK21细胞的影响 被引量：2
6
作者 杨柳 许国洋 +2 位作者 牟豪 白运川 余远迪 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期95-102,共8页
以提取羊口疮痂皮中病毒的DNA为模板,用PCR扩增羊口疮病毒(ORFV)的059基因序列,并进行基因克隆、测序鉴定和生物信息学分析;优化合成059基因编码序列,连接载体pET42a(+),转化Escherichia coli BL21(DE3);用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱... 以提取羊口疮痂皮中病毒的DNA为模板,用PCR扩增羊口疮病毒(ORFV)的059基因序列,并进行基因克隆、测序鉴定和生物信息学分析;优化合成059基因编码序列,连接载体pET42a(+),转化Escherichia coli BL21(DE3);用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导阳性克隆菌,采用免疫印迹检测表达的F1L蛋白,并以His柱纯化蛋白、梯度法复性及Bradford法测定蛋白浓度;将BHK21细胞铺于12孔板中培养至单层,分别作F1L蛋白、山羊痘病毒(GTPV)、先蛋白后病毒、蛋白和病毒混液4种方式孵育,利用荧光定量PCR测定孵育至1.0、6.0 h的细胞黏附GTPV的量,研究ORFV F1L蛋白对GTPV黏附BHK21细胞的影响。结果表明:成功获得了ORFV重庆石柱分离株(ORFV–CQsz)的059基因编码序列,其编码的F1L蛋白包含1个结合细胞表面硫酸乙酰肝素受体的结构域,显示出肝素结合活性;该蛋白羧基端有2个跨膜区,不利于蛋白质的表达,但优化DNA序列构建的重组质粒菌,经IPTG诱导后获得对F1L蛋白的高效表达;免疫印迹显示F1L蛋白对ORFV抗体有较好的反应原性;Bradford法测定的纯化复性的F1L蛋白质量浓度为1.06 mg/mL;荧光定量PCR检测数据显示,不同孵育处理下GTPV黏附细胞的拷贝数不同,表明F1L蛋白对GTPV黏附BHK21细胞呈现一定的干扰作用,能降低病毒黏附到细胞的拷贝数。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 F1L蛋白 山羊痘病毒 BHK21细胞 黏附
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化脓隐秘杆菌肝素结合蛋白的提取及铁结合蛋白的黏附特性分析
7
作者 沈克飞 许国洋 +3 位作者 付利芝 杨柳 牟豪 张素辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期241-249,共9页
肝素可剂量依赖性地抑制化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)黏附宿主细胞。本研究旨在认识化脓隐秘杆菌肝素结合蛋白及其黏附特性,采用肝素琼脂糖凝胶从化脓隐秘杆菌裂解物中提取蛋白,运用蛋白质质谱和免疫印迹对所提取的蛋白质进行鉴... 肝素可剂量依赖性地抑制化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)黏附宿主细胞。本研究旨在认识化脓隐秘杆菌肝素结合蛋白及其黏附特性,采用肝素琼脂糖凝胶从化脓隐秘杆菌裂解物中提取蛋白,运用蛋白质质谱和免疫印迹对所提取的蛋白质进行鉴定。采用免疫印迹检测所提取蛋白质与自然感染化脓隐秘杆菌山羊血清的反应原性。制备重组蛋白,对重组蛋白的的肝素结合活性及肝素、抗血清对肝素结合活性的抑制作用进行了分析,对重组蛋白细胞黏附活性和抗血清抑制化脓隐秘杆菌黏附宿主细胞活性进行了分析。结果表明,提取到包含铁结合蛋白(iron-binding protein,IBP)在内的多种ATP结合盒(ATP binding cassette)转运体的底物结合蛋白(substrate binding proteins)。在自然感染山羊血清中检测到抗IBP的IgG抗体,表明IBP在化脓隐秘杆菌感染过程中表达。SDS-PAGE结果显示,rIBP能结合肝素琼脂糖凝胶,生理浓度的NaCl能部分解离与肝素琼脂糖凝胶结合的rIBP。免疫印迹结果显示肝素能剂量依赖性地抑制rIBP结合肝素琼脂糖凝胶,表明rIBP特异性结合肝素。rIBP能黏附MDBK细胞。免疫印迹显示rIBP抗血清不能明显抑制rIBP结合肝素,但活菌计数结果显示能抑制化脓隐秘杆菌黏附MDBK细胞。本研究为深入认识化脓隐秘杆菌肝素结合蛋白及其在化脓隐秘杆菌黏附宿主细胞过程中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 化脓隐秘杆菌 肝素结合蛋白 铁结合蛋白 黏附 肝素
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不同饲料添加剂对妊娠母羊和初生羔羊的影响 被引量：3
8
作者 许国洋 付利芝 +2 位作者 徐登峰 王孝友 张素辉 《安徽农业科学》 CAS 2019年第23期118-120,共3页
为研究微生态制剂、抗菌肽制剂及中药作为饲料添加剂对妊娠母羊及羔羊的影响,试验选用40只妊娠期母羊,随机分为福邦酵母组、态康利保组、扶正解毒散组和对照组4组,每组10只。分别在日粮中添加福邦酵母、态康利保、扶正解毒散,对照组不... 为研究微生态制剂、抗菌肽制剂及中药作为饲料添加剂对妊娠母羊及羔羊的影响,试验选用40只妊娠期母羊,随机分为福邦酵母组、态康利保组、扶正解毒散组和对照组4组,每组10只。分别在日粮中添加福邦酵母、态康利保、扶正解毒散,对照组不添加药物,连续饲喂30 d后,测定母羊平均产羔数及血清生化指标,同时统计羔羊出生30 d后的死亡率及平均日增重,分析不同添加剂对母羊生产性能及羔羊生长性能的影响。结果表明,各组母羊平均产羔数差异不显著(P>0.05);血清生化指标检测发现,福邦酵母组总蛋白(TP)含量高于对照组,且差异显著(P<0.05),而甘油三酯(TG)含量与对照组差异极显著(P<0.01);福邦酵母组葡萄糖(GLU)含量与态康利保组差异显著(P<0.05),与扶正解毒散组和对照组差异极显著(P<0.01);对照组羔羊的死亡率最高,福邦酵母组最低,且福邦酵母组羔羊平均日增重最高,与对照组差异显著(P<0.05)。综上所述,福邦酵母可以有效改善母羊的生产性能和羔羊的生长水平。 展开更多
关键词 妊娠母羊 添加剂 羔羊 生长
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CapIFN-γ重组富硒酵母对免疫低下模型小鼠免疫功能的影响 被引量：1
9
作者 许国洋 郑华 +3 位作者 牟豪 余远迪 杨柳 付文贵 《现代畜牧科技》 2022年第11期22-25,共4页
为研究CapIFN-γ重组富硒酵母对免疫低下模型小鼠的免疫功能的影响,试验选取40只健康昆明小鼠,随机分为模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组。各组小鼠均腹腔注射环磷酰胺50μg/g,连续3 d,制备免疫力低下小鼠,高剂量组、中剂量组、低... 为研究CapIFN-γ重组富硒酵母对免疫低下模型小鼠的免疫功能的影响,试验选取40只健康昆明小鼠,随机分为模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组。各组小鼠均腹腔注射环磷酰胺50μg/g,连续3 d,制备免疫力低下小鼠,高剂量组、中剂量组、低剂量组口腔灌服不同浓度的重组富硒酵母菌悬液,模型组口腔灌服PBS,连续灌服28 d。采集样品,测定各组小鼠的脾脏指数、胸腺指数、淋巴细胞增殖活性、NK细胞活性、CD4∶CD8比值和细胞因子水平,分析重组富硒酵母对小鼠的免疫功能的影响。结果表明,高剂量组和中剂量组的胸腺指数、脾脏指数均差异极显著高于模型组(P<0.01);模型组的脾淋巴细胞增殖活力与高剂量组差异极显著(P<0.01),与中剂量组和低剂量组差异显著(P<0.05);模型组的CD4∶CD8与高剂量组、中剂量组和低剂量组均差异极显著(P<0.01)。模型组的IL-2水平、IFN-γ水平与其他组均差异极显著(P<0.01)。说明Cap IFN-γ重组富硒酵母有利于缓解环磷酰胺对小鼠的免疫抑制,中剂量组最佳。 展开更多
关键词 重组富硒酵母 免疫低下模型小鼠 环磷酰胺 免疫调节 饲料添加剂
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