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肿瘤坏死因子诱导凋亡配体TRAIL研究进展被引量：5: 1; 作者范开罗岚刘洪洪《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2011年第2期47-52,67,共7页; 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员之一,能通过与死亡受体结合选择性诱导多种肿瘤细胞系的凋亡,而对正常细胞无明显影响,有望成为一种新的抗肿瘤制剂。介绍了TRAIL及其受体的诱导凋亡机制、开发现状及临... 展开更多; 关键词肿瘤坏死因子相关凋亡配体受体细胞凋亡肿瘤治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

荧光定量PCR法检测重组毕赤酵母工程菌的外源基因拷贝数被引量：7: 2; 作者郭晋霞何云凤范开《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2016年第2期77-83,共7页; 提出了重组毕赤酵母工程菌p PICZ-DT30/GS115基因组中外源基因DT30拷贝数的实时荧光定量PCR方法。该重组工程菌用来表达人胰岛素前体(PI-DT30),其表达量的高低、菌种稳定性对工艺研究及整体项目成本等有重大影响。外源基因拷贝数是检测... 展开更多; 关键词荧光定量PCR 表达胰岛素前体基因拷贝数; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组可逆转水蛭素制备及活性测定: 3; 作者黄程李红亮 +4 位作者冯一建陈勇陈海容王林范开《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2012年第3期33-37,共5页; 将重组可逆转水蛭素(G4-HV1)的cDNA序列插入工程质粒pPIC9K,构建表达质粒pPIC9K-G4-HV1,并电转至毕赤酵母GS115;然后进行高表达筛选,表达后的菌液经离心、纯化得到了纯度95%以上的G4-HV1;最后通过生色底物法测定G4-HV1抗凝活性约为14 00... 展开更多; 关键词水蛭素可逆转制备活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人角质细胞生长因子-Ⅰ的聚乙二醇修饰及体外活性: 4; 作者冯一建陈勇 +4 位作者张增涛黄程李红亮胡春兰范开《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2012年第4期40-44,共5页; 研究大肠杆菌表达的重组人角质细胞生长因子-Ⅰ型N端缺失突变体(△N23KGF-Ⅰ)的mPEG-马来酰亚胺(mPEG-maleimide、mPEG-Mal)修饰工艺及修饰位点和初步体外生物活性。首先修饰得到聚乙二醇化的△N23KGF-Ⅰ,然后对△N23KGF-Ⅰ作还原和非... 展开更多; 关键词重组人角质细胞生长因子质量肽图聚乙二醇修饰; 在线阅读下载PDF 职称材料

聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物的修饰条件优化被引量：2: 5; 作者贺晓强范开 +2 位作者蔡晓娜刘立平陈清《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2014年第2期45-48,共4页; 用化学合成法获得C末端氨基酸为半胱氨酸的Byetta类似物(ByC39),再采用分子量为40 kDa的马来酰亚胺活化单甲氧基聚乙二醇(mPEG-mal-40kDa)对ByC39的半胱氨酸巯基进行定点修饰,修饰产物通过阳离子交换层析和反向层析纯化获得。在已建立... 展开更多; 关键词促胰岛素分泌肽聚乙二醇修饰条件; 在线阅读下载PDF 职称材料

A1位PEG化的重组人胰岛素类似物的制备和鉴定: 6; 作者刘立平曹宇 +2 位作者蔡晓娜贺晓强范开《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2014年第2期49-53,91,共6页; 在pH值为8.0的条件下用分子量20 kD的单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丙酸酯(mPEG-succinimidyl propionate,mPEG-SPA)特异性地修饰到去B链第30位氨基酸的重组人胰岛素类似物(DET)的A链第一位氨基酸甘氨酸上,经过阳离子Source 30Q层析得到... 展开更多; 关键词人胰岛素重组人胰岛素聚乙二醇修饰; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组精氨酸脱亚胺酶的制备工艺: 7; 作者何云凤郭晋霞范开《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2016年第4期73-78,共6页; 研究了重组精氨酸脱亚胺酶(r ADIES)的30 L规模发酵、制备工艺及其生物学活性。将构建好的工程菌先进行摇瓶活化获得种子液,转入30 L发酵罐进行培养,用IPTG进行诱导表达;表达产物进行高压匀浆破菌、包涵体洗涤、溶解稀释复性后经DEAE阴... 展开更多; 关键词精氨酸脱亚胺酶发酵复性分离纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

KGF-1二硫键突变体对肝纤维化的保护作用: 8; 作者谢敏万颖 +3 位作者张增涛何建军杨黎范开《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2012年第4期45-49,共5页; 观察KGF-1二硫键突变体对人肝星状细胞的抑制作用和其对试验性肝损伤的修复作用,同时探讨二硫键对蛋白质生物活性的影响。运用CCl4诱导的肝纤维化模型对△23KGF-1组、△23Ser102 KGF-1组(不含二硫键)和△23Ser102 C40-C106 KGF-1组(含... 展开更多; 关键词重组人角质细胞生长因子-1突变体二硫键肝纤维化四氯化碳; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠紫外线皮肤损伤模型的建立及T4N5给药实验: 9; 作者章伟韬曹宇 +2 位作者梅翔陈海容范开《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2012年第4期50-52,共3页; 评价T4N5蛋白脂质体剂型在紫外线辐射所导致的皮肤损伤中的作用。正常小鼠脱毛并给以一定剂量紫外线照射后给药,对各组进行比较。结果表明:照射组和安慰剂组皮肤外观及组织结构可见显著改变,给药组情况明显优于上述2组。初步表明T4N5蛋... 展开更多; 关键词紫外线损伤 T4核酸内切酶V 脂质体小鼠模型; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肿瘤坏死因子诱导凋亡配体TRAIL研究进展被引量：5: 1; 作者范开罗岚刘洪洪; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2011年第2期47-52,67,共7页; 基金重大新药研制"十一五"候选药物项目(20092X09103-682); 文摘肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员之一,能通过与死亡受体结合选择性诱导多种肿瘤细胞系的凋亡,而对正常细胞无明显影响,有望成为一种新的抗肿瘤制剂。介绍了TRAIL及其受体的诱导凋亡机制、开发现状及临床应用方面的研究进展。; 关键词肿瘤坏死因子相关凋亡配体受体细胞凋亡肿瘤治疗; Keywords TRAIL receptor apoptosis tumor therapy; 分类号 Q5 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名荧光定量PCR法检测重组毕赤酵母工程菌的外源基因拷贝数被引量：7: 2; 作者郭晋霞何云凤范开; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2016年第2期77-83,共7页; 文摘提出了重组毕赤酵母工程菌p PICZ-DT30/GS115基因组中外源基因DT30拷贝数的实时荧光定量PCR方法。该重组工程菌用来表达人胰岛素前体(PI-DT30),其表达量的高低、菌种稳定性对工艺研究及整体项目成本等有重大影响。外源基因拷贝数是检测表达量的一个重要指标。该方法中,利用毕赤酵母的看家基因GAP(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)为内参,分别建立含GAP基因和DT30基因的双标准曲线。将工程菌基因组进行荧光定量PCR,根据标准曲线和Ct值计算目的基因DT30在重组毕赤酵母工程菌中的拷贝数,结果为7个。; 关键词荧光定量PCR 表达胰岛素前体基因拷贝数; Keywords fluorescent quantitative PCR expression pro-insulin copy number; 分类号 Q39 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组可逆转水蛭素制备及活性测定: 3; 作者黄程李红亮冯一建陈勇陈海容王林范开; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2012年第3期33-37,共5页; 文摘将重组可逆转水蛭素(G4-HV1)的cDNA序列插入工程质粒pPIC9K,构建表达质粒pPIC9K-G4-HV1,并电转至毕赤酵母GS115;然后进行高表达筛选,表达后的菌液经离心、纯化得到了纯度95%以上的G4-HV1;最后通过生色底物法测定G4-HV1抗凝活性约为14 000ATU。与凝血酶结合的动力学实验表明,G4-HV1可被凝血酶逆转,可逆转率为30%～40%。; 关键词水蛭素可逆转制备活性; Keywords hirudin reversible preparation activity; 分类号 R973.2 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人角质细胞生长因子-Ⅰ的聚乙二醇修饰及体外活性: 4; 作者冯一建陈勇张增涛黄程李红亮胡春兰范开; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2012年第4期40-44,共5页; 基金国家科技重大专项资助项目(2012ZX09103-301-052) 重庆市自然科学基金资助项目(CSTC2007BB5412); 文摘研究大肠杆菌表达的重组人角质细胞生长因子-Ⅰ型N端缺失突变体(△N23KGF-Ⅰ)的mPEG-马来酰亚胺(mPEG-maleimide、mPEG-Mal)修饰工艺及修饰位点和初步体外生物活性。首先修饰得到聚乙二醇化的△N23KGF-Ⅰ,然后对△N23KGF-Ⅰ作还原和非还原质量肽图,确定其各肽段,对△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K做还原质量肽图,确定修饰位点。最后,通过BAF-3细胞对△N23KGF-Ⅰ国际标准品、△N23KGF-Ⅰ、△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K测活。结果表明,在尿素环境下,mPEG-MAl被均一修饰在△N23KGF-I的Cys40位。与国际活性标准品相比,△N23KGF-Ⅰ的活性保留了116%,△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K的活性保留了36%。; 关键词重组人角质细胞生长因子质量肽图聚乙二醇修饰; Keywords keratinoeyte growth factor peptide mass mapping（PPM） PEGylation; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物的修饰条件优化被引量：2: 5; 作者贺晓强范开蔡晓娜刘立平陈清; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2014年第2期45-48,共4页; 基金国家重大新药创新"十一五"候选药物项目(2009ZX09103-6837); 文摘用化学合成法获得C末端氨基酸为半胱氨酸的Byetta类似物(ByC39),再采用分子量为40 kDa的马来酰亚胺活化单甲氧基聚乙二醇(mPEG-mal-40kDa)对ByC39的半胱氨酸巯基进行定点修饰,修饰产物通过阳离子交换层析和反向层析纯化获得。在已建立的定点修饰反应和分离纯化工艺基础上,通过改变反应条件中修饰pH值、修饰缓冲体系,以及修饰保护剂等因素来得到优化修饰条件:pH值为6.5的CH3COONa-CH3COOH缓冲液,保护剂为2.0mmol/L Lys和5.0 mmol/L EDTA,mPEG-mal-40 kDa/ByC39摩尔比3∶1,25℃反应4 h;经SDSPAGE和RP-HPLC检测,可知提高了修饰率以及增加了修饰产物的稳定性;最后加入TFA终止反应。; 关键词促胰岛素分泌肽聚乙二醇修饰条件; Keywords glucogan-like peptide-1 polyethylene glycol modified conditions; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名A1位PEG化的重组人胰岛素类似物的制备和鉴定: 6; 作者刘立平曹宇蔡晓娜贺晓强范开; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2014年第2期49-53,91,共6页; 基金国家"重大新药创制"科技重大专项(2009ZX09103683); 文摘在pH值为8.0的条件下用分子量20 kD的单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丙酸酯(mPEG-succinimidyl propionate,mPEG-SPA)特异性地修饰到去B链第30位氨基酸的重组人胰岛素类似物(DET)的A链第一位氨基酸甘氨酸上,经过阳离子Source 30Q层析得到一种纯度大于90%的PEG化重组人胰岛素类似物(PEG-DET-A1)。经SAX-HPLC、质谱、质量肽图对PEG-DET-A1进行鉴定,确认了单甲氧基聚乙二醇修饰在DET的A链第一位氨基酸甘氨酸,PEG-DET-A1结构正确,为研制一种长效胰岛素奠定了基础。; 关键词人胰岛素重组人胰岛素聚乙二醇修饰; Keywords human insulin recombinant human insulin PEG-modified; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组精氨酸脱亚胺酶的制备工艺: 7; 作者何云凤郭晋霞范开; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2016年第4期73-78,共6页; 文摘研究了重组精氨酸脱亚胺酶(r ADIES)的30 L规模发酵、制备工艺及其生物学活性。将构建好的工程菌先进行摇瓶活化获得种子液,转入30 L发酵罐进行培养,用IPTG进行诱导表达;表达产物进行高压匀浆破菌、包涵体洗涤、溶解稀释复性后经DEAE阴离子交换层析柱和Butyl疏水层析柱纯化;通过SDS-PAGE和RP-HPLC等方法检测表达和纯度;用体外测活法检测活性。将工程菌进行放大培养并诱导表达,获得了相对分子质量在46 k Da的r ADIES。重组蛋白表达量占总蛋白的25%以上,经制备工艺获得的r ADIES纯度高于95%,酶活性为42IU。实验结果表明:该工艺具有可行性,可以获得较高活性的重组精氨酸脱亚胺酶。; 关键词精氨酸脱亚胺酶发酵复性分离纯化; Keywords arginine deiminase fermentation refold purification; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名KGF-1二硫键突变体对肝纤维化的保护作用: 8; 作者谢敏万颖张增涛何建军杨黎范开; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2012年第4期45-49,共5页; 基金国家科技重大专项资助项目(2012zx09103301-052) 重庆市自然科学基金资助项目(CSTC2007BB5412); 文摘观察KGF-1二硫键突变体对人肝星状细胞的抑制作用和其对试验性肝损伤的修复作用,同时探讨二硫键对蛋白质生物活性的影响。运用CCl4诱导的肝纤维化模型对△23KGF-1组、△23Ser102 KGF-1组(不含二硫键)和△23Ser102 C40-C106 KGF-1组(含二硫键)进行体内抗纤维化活性的比较,并研究其对人肝星状细胞系的抑制作用。结果表明,与模型组相比,KGF-1突变体的各项指标均优于模型组,并且△23Ser102 KGF-1可明显抑制人肝星状细胞系的生长,可见KGF-1突变体不含二硫键组对大鼠试验性肝损伤有明显保护作用。此外实验还证明二硫键的有无会直接影响蛋白质的生物活性。; 关键词重组人角质细胞生长因子-1突变体二硫键肝纤维化四氯化碳; Keywords KGF-1 mutant disulfide bond hepatic fibrosis CCl4; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠紫外线皮肤损伤模型的建立及T4N5给药实验: 9; 作者章伟韬曹宇梅翔陈海容范开; 机构重庆理工大学药学与生物工程学院重庆富进生物医药有限公司; 出处《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS 2012年第4期50-52,共3页; 文摘评价T4N5蛋白脂质体剂型在紫外线辐射所导致的皮肤损伤中的作用。正常小鼠脱毛并给以一定剂量紫外线照射后给药,对各组进行比较。结果表明:照射组和安慰剂组皮肤外观及组织结构可见显著改变,给药组情况明显优于上述2组。初步表明T4N5蛋白具有较强的修复紫外线所导致的皮肤损伤的特性。; 关键词紫外线损伤 T4核酸内切酶V 脂质体小鼠模型; Keywords ultraviolet injury T4 endonuclease V lipidosome mice model; 分类号 R45 [医药卫生—治疗学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	肿瘤坏死因子诱导凋亡配体TRAIL研究进展	范开罗岚刘洪洪	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	荧光定量PCR法检测重组毕赤酵母工程菌的外源基因拷贝数	郭晋霞何云凤范开	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2016	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	重组可逆转水蛭素制备及活性测定	黄程李红亮冯一建陈勇陈海容王林范开	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组人角质细胞生长因子-Ⅰ的聚乙二醇修饰及体外活性	冯一建陈勇张增涛黄程李红亮胡春兰范开	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物的修饰条件优化	贺晓强范开蔡晓娜刘立平陈清	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	A1位PEG化的重组人胰岛素类似物的制备和鉴定	刘立平曹宇蔡晓娜贺晓强范开	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	重组精氨酸脱亚胺酶的制备工艺	何云凤郭晋霞范开	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	KGF-1二硫键突变体对肝纤维化的保护作用	谢敏万颖张增涛何建军杨黎范开	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
9	小鼠紫外线皮肤损伤模型的建立及T4N5给药实验	章伟韬曹宇梅翔陈海容范开	《重庆理工大学学报（自然科学）》 CAS	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料