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基因功能研究策略在病原真菌中的应用
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作者 蓝天敏 李中元 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2009年第5期85-87,90,共4页
昆虫病原真菌是病原真菌中一个大的类群,寄主达5目24科200余种昆虫。以昆虫病原真菌为主的杀虫剂在害虫的生物防治中起着重要的作用,其致病机制一直被人们广泛的研究。随着后基因组时代的到来,大规模基因的功能研究正成为热点,为进一步... 昆虫病原真菌是病原真菌中一个大的类群,寄主达5目24科200余种昆虫。以昆虫病原真菌为主的杀虫剂在害虫的生物防治中起着重要的作用,其致病机制一直被人们广泛的研究。随着后基因组时代的到来,大规模基因的功能研究正成为热点,为进一步阐明病原真菌致病机理奠定了基础,因此,基因功能的分析方法也日趋成熟和多样化。对RNA干涉、基因敲除、生物信息学等基因功能分析策略的特异性和优缺点及其在病原真菌中的应用进行了综述。 展开更多
关键词 病原真菌 RNA干涉 基因敲出 生物信息学
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食品中4种致病微生物的多重PCR快速检测技术研究 被引量:35
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作者 杨平 杨迎伍 +2 位作者 陈伟 王国民 李正国 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期90-94,共5页
传统微生物检测方法耗时长、灵敏性差,难以满足食品安全快速检测要求,建立和完善食品中致病微生物快速检测技术具有重要的现实意义.本研究针对沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生性李斯特菌,根据其特异基因设计出4对引物... 传统微生物检测方法耗时长、灵敏性差,难以满足食品安全快速检测要求,建立和完善食品中致病微生物快速检测技术具有重要的现实意义.本研究针对沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生性李斯特菌,根据其特异基因设计出4对引物,通过对食品样品进行梯度离心处理、改良异硫氰酸胍法提取基因组DNA和多重PCR(multiplex PCR)条件的优化,建立了这4种食源性致病微生物的多重PCR检测方法.通过人工污染检测和市场样品检测,同时进行传统方法验证,结果表明:该检测方法简单、快速、准确、灵敏度高,只需经过增菌4~8h其最低检出限可达1cfu/mL,具有较强的实际应用价值,可广泛应用于食品卫生检测和临床检验等领域. 展开更多
关键词 食源性致病微生物 多重PCR 快速检测
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天然除虫菊酯检测方法的研究进展 被引量:2
3
作者 段伟 李正国 +2 位作者 夏玉先 胡应红 殷红莲 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期12-16,共5页
天然除虫菊酯已成为当今无公害生物杀虫剂的研究热点之一,广泛应用于农业、林业、生物农药和食品卫生安全等多个领域。本文总结了目前相关研究的现状与成果,分析了目前应用于检测天然除虫菊酯的薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法及联... 天然除虫菊酯已成为当今无公害生物杀虫剂的研究热点之一,广泛应用于农业、林业、生物农药和食品卫生安全等多个领域。本文总结了目前相关研究的现状与成果,分析了目前应用于检测天然除虫菊酯的薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法及联用技术的优缺点。重点讨论了在天然除虫菊酯残留检测方法中,代表其发展趋势的免疫学方法及生物传感器技术,并在此基础上提出实现检测的设想。 展开更多
关键词 天然除虫菊酯 色谱法 免疫学方法 生物传感器 检测
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马铃薯病毒病分子检测技术研究进展 被引量:7
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作者 袁青 殷幼平 王中康 《中国马铃薯》 2003年第1期33-36,共4页
快速、准确地定性或定量检测马铃薯植株中病毒、类病毒的种类和数量是有效地控制马铃薯病毒病害的需要 ,也是马铃薯种薯品质的重要保证。
关键词 病毒病 分子检测技术 马铃薯 病毒 RT-PCR 核酸斑点杂交技术 聚合酶链式反应
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杀虫真菌与苏云金芽胞杆菌对草地贪夜蛾的联合室内杀虫活性研究 被引量:15
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作者 彭国雄 张淑玲 +1 位作者 张维 夏玉先 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期735-740,共6页
草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J. E. Smith)是一种迁飞性重大害虫。为了弄清不同微生物联合使用对草地贪夜蛾的生防潜力,在室内条件下采用直接喷雾方法,测定了金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliaeCQMa421、球孢白僵菌Beauveriabassi... 草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J. E. Smith)是一种迁飞性重大害虫。为了弄清不同微生物联合使用对草地贪夜蛾的生防潜力,在室内条件下采用直接喷雾方法,测定了金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliaeCQMa421、球孢白僵菌BeauveriabassianaZJU435和苏云金芽胞杆菌(Baci1lusthuringiensis,Bt)G033A两两之间对草地贪夜蛾幼虫的室内联合杀虫活性。结果表明:金龟子绿僵菌CQMa421与球孢白僵菌ZJU435悬浮液联合接种10 d后,1~3龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率分别为65.6%、58.8%和35.4%,都显著高于CQMa421和ZJU435单剂处理组。CQMa421与Bt联合接种5 d后,2龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率为82.6%,显著高于CQMa421(21.1%)和Bt(65.5%)单剂处理;ZJU435与Bt联合接种5 d后,2龄和4龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率为80.4%和68.6%,显著高于Bt和ZJU435单剂处理组。上述试验结果表明:不同杀虫真菌联合使用、杀虫真菌与Bt联合使用能有效提高对草地贪夜蛾幼虫的杀虫活性,为田间利用不同微生物农药有效防控草地贪夜蛾提供了依据。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 金龟子绿僵菌 球孢白僵菌 苏云金芽胞杆菌 杀虫活性
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金龟子绿僵菌CQMa421对棉蚜、绿盲蝽的田间防效 被引量:4
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作者 卓富彦 周若男 +5 位作者 蒙玲玲 李白成 张莉 郭荣 夏玉先 彭国雄 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期350-354,360,共6页
棉花是我国重要的经济作物,虫害严重制约了棉花生产,造成棉农的经济损失。目前,化学杀虫剂仍是防治棉花虫害的主要手段,长期使用化学杀虫剂导致棉蚜Aphis gossypii、绿盲蝽Apolygus lucorum产生抗药性,降低防治效果。本研究使用80亿孢子... 棉花是我国重要的经济作物,虫害严重制约了棉花生产,造成棉农的经济损失。目前,化学杀虫剂仍是防治棉花虫害的主要手段,长期使用化学杀虫剂导致棉蚜Aphis gossypii、绿盲蝽Apolygus lucorum产生抗药性,降低防治效果。本研究使用80亿孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421可分散油悬浮剂防治棉蚜、绿盲蝽,室内生测结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421能有效侵染棉蚜和绿盲蝽,随着浓度的升高,对棉蚜和绿盲蝽的毒力增强。田间试验结果表明,该药剂能有效控制棉花主要害虫棉蚜和绿盲蝽。采用1200 mL/hm 2用量,药后14 d对棉蚜的防效达94.42%;采用1350 mL/hm 2用量,药后14 d对绿盲蝽的防效分别达到87.25%(新疆),91.62%(湖北)。 展开更多
关键词 棉花 绿僵菌 棉蚜 绿盲蝽
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3种致病菌多重PCR检测体系的建立及应用 被引量:11
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作者 陈伟 杨迎伍 +1 位作者 邓伟 李正国 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期132-136,共5页
金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogen,LM)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus,BC)是食品中重要的致病菌,建立其多重PCR的快速检测体系,对开发食源性致病微生物快速检测试剂盒具有重要意... 金黄葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogen,LM)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus,BC)是食品中重要的致病菌,建立其多重PCR的快速检测体系,对开发食源性致病微生物快速检测试剂盒具有重要意义。根据SA的nuc基因、LM的hly基因和BC的hemolysin基因,设计合成3对特异性引物,然后进行单基因PCR反应特异性验证。在此基础上建立了3种致病菌的多重PCR检测体系,并应用于食品检测中,同时以国标法进行对比验证。结果表明,建立的多重PCR检测方法简单、快速、灵敏度高,检测灵敏度可达到1 cfu/mL,整个检测时间在16 h以内,具有较大的应用价值,可广泛应用于食品卫生检测以及临床检验等领域。 展开更多
关键词 食源性致病菌 多重PCR 食品 检测
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生长期喷钙对脐橙果实果皮褐变和品质的影响 被引量:20
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作者 李正国 李道高 +3 位作者 李纯凡 黄仁湖 高雪 杨迎伍 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第6期922-925,共4页
奉节脐橙是重庆柑桔的一个优势品种,但奉节脐橙采前采后均易发生果皮褐变,严重影响其商品性和耐贮性,已成为内外销的最重要的制约因素。研究通过生长期叶面喷钙,研究了钙对奉节脐橙果实果皮褐变和品质的影响。结果表明,果树钙营养缺乏... 奉节脐橙是重庆柑桔的一个优势品种,但奉节脐橙采前采后均易发生果皮褐变,严重影响其商品性和耐贮性,已成为内外销的最重要的制约因素。研究通过生长期叶面喷钙,研究了钙对奉节脐橙果实果皮褐变和品质的影响。结果表明,果树钙营养缺乏是导致果实果皮褐变的重要因素之一,叶面喷钙可有效提高果皮的钙含量,显著地降低果实采前果皮褐变率,极显著降低果实采后贮藏过程中的果皮褐变率,显著增强果面红色改善果实商品性。 展开更多
关键词 脐橙 果皮褐变 品质
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桑粒肩天牛幼虫肠道菌群的种类及分布 被引量:18
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作者 张伟 何正波 +1 位作者 邓新平 殷幼平 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第2期169-172,共4页
对47头野外采集的桑粒肩天牛幼虫肠道进行定性与定量检测,发现了13种菌群。其中葡萄球菌属在前中肠、中中肠、后中肠和后肠中的分离率为100%,是常住菌群。链球菌属、肠杆菌属、埃希氏菌属、志贺氏菌属和芽孢杆菌属在上述4个肠段都能分离... 对47头野外采集的桑粒肩天牛幼虫肠道进行定性与定量检测,发现了13种菌群。其中葡萄球菌属在前中肠、中中肠、后中肠和后肠中的分离率为100%,是常住菌群。链球菌属、肠杆菌属、埃希氏菌属、志贺氏菌属和芽孢杆菌属在上述4个肠段都能分离到,但分离率较低。而其他菌群只能在某些肠道分离到,为过路菌群。各个肠段菌群菌量分布不同,即后中肠<中中肠<前中肠<后肠。葡萄球菌属菌量在各肠段分布同总的菌群菌量一致。可见葡萄球菌属在桑粒肩天牛生长发育过程中起了积极的作用。 展开更多
关键词 桑粒肩天牛 幼虫 肠道菌群 葡萄球菌属
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美洲大蠊血细胞对金龟子绿僵菌CQMa102菌株的免疫反应 被引量:4
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作者 钟伟 殷幼平 《重庆大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期89-92,100,共5页
将蜚蠊的非致病菌———金龟子绿僵菌 (Metarhiziumanisopliae)CQMa1 0 2菌株的分生孢子注入美洲大蠊 (Periplanetaamericana)血腔后 ,诱导了蜚蠊血淋巴强烈的免疫反应 ,其血细胞数量发生了显著变化 ,血细胞通过吞噬作用及形成结节使绿... 将蜚蠊的非致病菌———金龟子绿僵菌 (Metarhiziumanisopliae)CQMa1 0 2菌株的分生孢子注入美洲大蠊 (Periplanetaamericana)血腔后 ,诱导了蜚蠊血淋巴强烈的免疫反应 ,其血细胞数量发生了显著变化 ,血细胞通过吞噬作用及形成结节使绿僵菌孢子钝化 ,萌发受到抑制 ,或被彻底分解 ;注射高浓度孢子时 ,蜚蠊的免疫体系受到严重破坏 ,容易感染细菌而死亡 ;但注射低浓度孢子却能够增强蜚蠊的免疫机能。生理盐液也能诱导蜚蠊血淋巴的免疫反应。 展开更多
关键词 美洲大蠊 金龟子绿僵菌 血细胞 吞噬作用 结节作用 免疫反应
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PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术 被引量:1
11
作者 孙宪昀 王中康 +1 位作者 周常勇 夏玉先 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第2期148-150,154,共4页
采用依据柑桔溃疡病菌独有蛋白基因的保守区段设计的特异性引物及其扩增体系进行测试。4种浸泡液中,浸泡液B的浸提效果最好,最佳浸泡时间为10~15min。浸提液进行加热灭活与不加热灭活处理,PCR扩增结果无明显差异。对于无症柑桔样品,浸... 采用依据柑桔溃疡病菌独有蛋白基因的保守区段设计的特异性引物及其扩增体系进行测试。4种浸泡液中,浸泡液B的浸提效果最好,最佳浸泡时间为10~15min。浸提液进行加热灭活与不加热灭活处理,PCR扩增结果无明显差异。对于无症柑桔样品,浸泡液中加入终浓度为0.3%的Na2SO3可以降低植物色素、多元酚和铜制剂残留的Cu2+等抑制PCR反应物质的干扰作用。样品浸提液经过离心处理,不仅可以有效浓缩靶细菌,提高检测灵敏度,而且可以除去PCR反应抑制物质,大大降低了检测的假阴性。 展开更多
关键词 制样技术 浸泡 PCR 柑桔溃疡病
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理化因子对白僵菌附着胞形成的影响 被引量:4
12
作者 李文华 王中康 +2 位作者 殷幼平 夏玉先 彭国雄 《重庆大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期102-106,共5页
研究了2种营养液、3种化学诱导物、6种基物以及微生态条件对球孢白僵菌分生孢子萌发和附着胞形成的影响。结果表明:白僵菌分生孢子在0.01%YEM、1%1/4SDY培养基中附着胞形成率最高。在1×106~5×106mL-1的孢子浓度下,接种4mL0.0... 研究了2种营养液、3种化学诱导物、6种基物以及微生态条件对球孢白僵菌分生孢子萌发和附着胞形成的影响。结果表明:白僵菌分生孢子在0.01%YEM、1%1/4SDY培养基中附着胞形成率最高。在1×106~5×106mL-1的孢子浓度下,接种4mL0.01%YEM,同时在(26±1)℃、pH7.0、先黑暗后光照培养条件下最有利于附着胞形成。不饱和脂肪酸对附着胞的形成有诱导作用或抑制作用。基物的表面结构、疏水性以及硬度与附着胞的形成有关。 展开更多
关键词 白僵菌 附着胞 微生态条件 诱导因子
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柑橘溃疡病菌检测方法及其在检疫中的优选 被引量:1
13
作者 马利 宁红 +3 位作者 郭迪金 熊玉兰 张敏 王中康 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期103-105,共3页
采用常规检测法、免疫斑点法、酶联免疫检测法和PCR检测法对柑橘溃疡病菌纯培养和柑橘叶片提取液进行平行测定。结果表明,对柑橘叶片提取液的检测,4种检测法检出的样品带菌率分别为11.12%、27.22%、18.69%、20.31%;对柑橘溃疡病菌纯培... 采用常规检测法、免疫斑点法、酶联免疫检测法和PCR检测法对柑橘溃疡病菌纯培养和柑橘叶片提取液进行平行测定。结果表明,对柑橘叶片提取液的检测,4种检测法检出的样品带菌率分别为11.12%、27.22%、18.69%、20.31%;对柑橘溃疡病菌纯培养的检测,4种方法检测结果一致。本实验同时比较了几种方法的灵敏度、特异性和稳定性,以及不同方法在各级检验检疫中的适应性。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病菌 检测 优选
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甘蔗黄叶综合症的RT-PCR检测初报 被引量:12
14
作者 王伯辉 朱秋珍 +4 位作者 莫磊兴 王维赞 邓展云 黄冬发 王中康 《甘蔗(福建)》 2003年第4期1-3,共3页
对2002年12月采自南宁的4个田间症状程度不同的样品作RT-PCR检测,结果表明,A1(粤糖93/159)、A2(粤糖93/159)、B1(CP88/1508)3个样品为阳性,确认田间发生的是甘蔗黄叶综合症(YLS),是我国甘蔗新病害。建议尽快对病害加以控制,并加强甘蔗... 对2002年12月采自南宁的4个田间症状程度不同的样品作RT-PCR检测,结果表明,A1(粤糖93/159)、A2(粤糖93/159)、B1(CP88/1508)3个样品为阳性,确认田间发生的是甘蔗黄叶综合症(YLS),是我国甘蔗新病害。建议尽快对病害加以控制,并加强甘蔗引用检疫工作。 展开更多
关键词 甘蔗黄叶综合症 RT-PCR 广西 反转录多聚酶链式反应
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昆虫病原真菌防控草地贪夜蛾的现状、问题与展望 被引量:21
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作者 张维 彭国雄 夏玉先 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期674-681,共8页
草地贪夜蛾是世界性重大农业害虫,危害大、防控难。昆虫病原真菌菌种资源丰富,具有易流行、害虫不易产生抗性等突出优点,在草地贪夜蛾防控中应用潜力大。本文综述了昆虫病原真菌在草地贪夜蛾防治中的现状,分析了存在的问题,重点指出了... 草地贪夜蛾是世界性重大农业害虫,危害大、防控难。昆虫病原真菌菌种资源丰富,具有易流行、害虫不易产生抗性等突出优点,在草地贪夜蛾防控中应用潜力大。本文综述了昆虫病原真菌在草地贪夜蛾防治中的现状,分析了存在的问题,重点指出了昆虫病原真菌在草地贪夜蛾防治中的发展方向,为进一步发挥昆虫病原真菌在草地贪夜蛾防控中的作用提供参考。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 化学农药 抗药性 真菌生物农药 综合防治
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金龟子绿僵菌CQMa421农药及应用情况 被引量:33
16
作者 彭国雄 张淑玲 夏玉先 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期850-857,共8页
金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae是一种重要的生防真菌,具有安全、易在害虫种群中流行、环境友好、不易产生抗药性等优点,已在中国、美国、欧盟等多个国家或地区登记和应用。本文对我国广谱金龟子绿僵菌CQMa421农药的菌株选育、产... 金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae是一种重要的生防真菌,具有安全、易在害虫种群中流行、环境友好、不易产生抗药性等优点,已在中国、美国、欧盟等多个国家或地区登记和应用。本文对我国广谱金龟子绿僵菌CQMa421农药的菌株选育、产品登记、应用技术及产品应用情况等方面进行了概述。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 CQMa421农药 菌株选育 应用技术
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杀虫真菌对草地贪夜蛾不同虫态的室内活性 被引量:28
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作者 彭国雄 张淑玲 夏玉先 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期729-734,共6页
草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J. E. Smith)是一种联合国粮农组织预警的全球重大害虫。为了评价杀虫真菌对草地贪夜蛾的生防潜力,在室内条件下测定了杀虫真菌金龟子绿僵菌CQMa421、球孢白僵菌ZJU435对草地贪夜蛾不同龄期幼虫、蛹、... 草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J. E. Smith)是一种联合国粮农组织预警的全球重大害虫。为了评价杀虫真菌对草地贪夜蛾的生防潜力,在室内条件下测定了杀虫真菌金龟子绿僵菌CQMa421、球孢白僵菌ZJU435对草地贪夜蛾不同龄期幼虫、蛹、成虫和卵的杀虫活性以及对卵孵化率、蛹羽化率等影响。结果显示:26℃条件下,菌株CQMa421和ZJU435对草地贪夜蛾低龄幼虫具有杀虫活性,接种10 d后对1龄幼虫的校正死亡率分别为35.6%和50.5%,但随虫龄增大杀虫活性降低,其中菌株CQMa421对4龄幼虫几乎没有杀虫活性;菌株CQMa421和ZJU435都引起草地贪夜蛾蛹黑化,降低其羽化率50%以上;但对成虫没有杀虫活性,也不影响成虫的产卵;卵接种菌株CQMa421和ZJU435后,孵化率分别为82.8%和90.7%,显著低于空白对照的100%,并极大地降低新孵化幼虫的存活率,分别为20.8%和0.0%,而空白对照为79.4%。结果表明,杀虫真菌CQMa421和ZJU435对草地贪夜蛾低龄幼虫、蛹和卵具有杀虫活性,同时降低卵的孵化率、新孵化幼虫存活率和蛹羽化率,对草地贪夜蛾种群控制极具潜力。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 金龟子绿僵菌 球孢白僵菌 杀虫活性
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金龟子绿僵菌CQMa421与杀虫剂、杀菌剂的兼容性 被引量:33
18
作者 彭国雄 谢佳沁 夏玉先 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期747-751,共5页
本研究通过测试杀虫剂和杀菌剂在田间使用剂量下对金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421孢子萌发率的影响,筛选了与菌株CQMa421兼容的25种防治水稻、蔬菜和茶叶重要害虫的常用杀虫剂和11种防治水稻、蔬菜重要病害的杀菌剂。结果... 本研究通过测试杀虫剂和杀菌剂在田间使用剂量下对金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421孢子萌发率的影响,筛选了与菌株CQMa421兼容的25种防治水稻、蔬菜和茶叶重要害虫的常用杀虫剂和11种防治水稻、蔬菜重要病害的杀菌剂。结果表明,农药有效成分、浓度影响绿僵菌CQMa421孢子萌发率外,制剂组成也是重要影响因素,不同厂家的同一有效成分的杀虫剂对菌株CQMa421活性影响存在差异,研究结果为活体微生物农药与其他杀虫剂、杀菌剂的联合使用提供了依据。 展开更多
关键词 金龟子绿僵菌 化学杀虫剂、杀菌剂 兼容性
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从寄主昆虫血淋巴中分离纯化病原真菌菌体的方法
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作者 李春梅 张沧桑 +4 位作者 王中康 彭国雄 殷幼平 曹月青 夏玉先 《重庆大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第10期109-113,117,共6页
采用正交实验方法,对东亚飞蝗(Locusta m igratoria)血细胞裂解及其DNA和RNA降解的条件进行了优化.在优化条件下,不仅去除了感病东亚飞蝗血淋巴中的血细胞及DNA和RNA,而且成功地分离和纯化了绿僵菌(Metarhizium anisopliae)菌体.裂解血... 采用正交实验方法,对东亚飞蝗(Locusta m igratoria)血细胞裂解及其DNA和RNA降解的条件进行了优化.在优化条件下,不仅去除了感病东亚飞蝗血淋巴中的血细胞及DNA和RNA,而且成功地分离和纯化了绿僵菌(Metarhizium anisopliae)菌体.裂解血细胞及其DNA和RNA的最佳酶解条件为:蛋白酶K的浓度为1 mg/mL,作用温度为26℃,时间为60 m in,脱氧核糖核酸酶(DNAase I)的用量为5U,核糖核酸酶(RNAase A)的浓度为0.5 mg/mL,作用时间为35 m in,作用温度为30℃.以蝗虫特异引物进行PCR及RT-PCR检测结果表明,从绿僵菌侵染后的蝗虫血淋巴中分离纯化无蝗虫DNA和RNA污染的绿僵菌菌体,为后续分离和克隆绿僵菌侵入蝗虫体内后表达的基因,研究它们在致病机理中的作用奠定了基础. 展开更多
关键词 绿僵菌 东亚飞蝗 血淋巴 正交实验
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