超声联合微泡造影剂携p53基因转染宫颈癌HeLa细胞的实验研究 被引量：3

1

作者 唐艳 熊正爱 +2 位作者 李攀 王志刚 董培婷 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第23期2323-2326,共4页

目的探讨超声联合微泡造影剂介导野生型p53(wtp53)基因转染宫颈癌HeLa细胞的可行性、效率性及作用效果。方法以前期实验所筛选的超声辐照参数(300kHz,0.5W/cm2,30s)为实验条件,将HeLa细胞分为质粒组(A组)、质粒+超声组(B组)、质粒+超声... 目的探讨超声联合微泡造影剂介导野生型p53(wtp53)基因转染宫颈癌HeLa细胞的可行性、效率性及作用效果。方法以前期实验所筛选的超声辐照参数(300kHz,0.5W/cm2,30s)为实验条件,将HeLa细胞分为质粒组(A组)、质粒+超声组(B组)、质粒+超声+微泡组(C组)、质粒+脂质体组(D组)、空白对照组(E组),分别进行处理。转染24～48h后,收集各组细胞,荧光显微镜观察细胞基因转染效率、RT-PCR检测p53mRNA表达,流式细胞仪检测细胞周期,MTT检测细胞增殖抑制情况。结果荧光显微镜下见C、D组均有较多绿色荧光蛋白表达的细胞(转染率分别为14.15%和10.86%),B组仅有极少的荧光细胞(0.81%);A组和E组无荧光表达;RT-PCR结果显示,C组和D组均可见特异性p53电泳条带,C组的电泳条带的光密度比值高于D组(P<0.05);流式细胞仪测细胞周期显示,转染野生型p53基因能使细胞周期出现明显的G1期阻滞,C、D组与E组相比差异有显著性(P<0.05);MTT测定结果显示C组细胞生长明显受抑,且随时间的延长,抑制程度逐渐增强。结论适当浓度的微泡和优化的超声辐照条件可增强基因转染效率,野生型p53基因能使HeLa细胞产生G1期阻滞,抑制宫颈癌细胞生长。 展开更多

关键词 超声 微泡造影剂 宫颈癌 基因治疗

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心腔内超声辐照增加基因表达技术的安全性研究 被引量：1

2

作者 袁侨英 黄晶 +1 位作者 司良毅 李兴升 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期299-302,共4页

目的建立一套包括经皮介入心肌内基因投递、心腔内超声辐照增强基因表达的技术体系,并探讨其安全性。方法研制心腔内超声辐照导管(intracardiac ultrasound,US),经常规介入法置于活体犬左心室,并经导管中特制的微型针刺入心肌注射报告... 目的建立一套包括经皮介入心肌内基因投递、心腔内超声辐照增强基因表达的技术体系,并探讨其安全性。方法研制心腔内超声辐照导管(intracardiac ultrasound,US),经常规介入法置于活体犬左心室,并经导管中特制的微型针刺入心肌注射报告基因增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)质粒;12月龄健康杂种犬12只,体质量15～20 kg,雌雄不拘,分为EGFP+US组、单纯EGFP组。在EGFP+US组,注射质粒500μg后,心腔内超声辐照1 min(1 MHz、1 W/cm2、60s)。单纯EGFP组仅注射质粒,继续饲养犬,测定照射前、照射过程中、照射后心肌酶谱变化,7 d后,测定心肌、肝、肾、肺脏、肌肉中EGFP mRNA及蛋白质表达,观察心肌及上述脏器的病理形态变化。结果经超声导管成功实现了经皮心肌内注入EGFP质粒,心肌形态正常,心腔内超声辐照后明显增加EGFP基因在心肌表达,与单纯EGFP组相比,EGFP+US组EGFP mRNA表达增加6.5倍,蛋白表达增加3.4倍(P<0.01)。心肌无损伤、出血,辐照前后心肌酶谱没有变化(P>0.05)。光镜下肺脏、肝脏、肾脏形态无改变,也未见EGFP表达,心肌外未见质粒沉积。结论心腔内超声辐照能增强裸质粒在活体心肌组织中转染表达,未见超声辐照对心脏的毒副作用,心腔内超声辐照增强基因表达安全有效。 展开更多

关键词 心腔内超声 导管 基因表达 安全性

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4项指标7个关节超声诊断类风湿关节炎 被引量：9

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作者 游岚岚 郑元义 +5 位作者 王志刚 张萍 周璇 蒋玲 高维 唐琳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1478-1483,共6页

目的:探讨超声应用4项指标在判定类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断中的价值。方法:对77例临床疑似RA的患者采用双盲法分别用肌骨超声(musculoskeletal ultrasound,MSUS)及临床方法诊断RA。MSUS通过检测患侧腕关节,第2、3掌指... 目的:探讨超声应用4项指标在判定类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断中的价值。方法:对77例临床疑似RA的患者采用双盲法分别用肌骨超声(musculoskeletal ultrasound,MSUS)及临床方法诊断RA。MSUS通过检测患侧腕关节,第2、3掌指关节(metacarpophalangeal joints,MCP),第2、3近端指间关节(proximal interphalangeal joints,PIP),第2、5跖趾关节(metatarsophalangeal joints,MTP)等7个关节,观察滑膜增生、滑膜内血流信号、骨侵蚀及关节积液4项指标,以4步半定量分级系统中滑膜病变为主的病例超声诊断RA。对2种诊断方法进行对比分析。同时对这4项指标进行等级评分,评分总和与同期血清学指标进行相关Pearson分析。结果:MSUS诊断RA 55例,非RA 22例,临床诊断RA 53例,非RA 24例。MSUS和临床2种诊断方法间的差异无统计学意义(P=0.774)。滑膜血流评分总和、积液评分总和与血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)成正相关(r值分别是0.739、0.564,P值均=0.000)。结论:MSUS同时应用4项指标对RA的诊断同临床诊断基本吻合,且其滑膜血流评分总和及积液评分总和与血清学指标存在正相关性,MSUS可作为RA的筛查方法,为临床早期确诊提供更多影像学依据,值得推广应用。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 肌骨超声 7个关节 诊断

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低强度超声及联合光敏剂对癌细胞的杀伤作用 被引量：3

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作者 王萍 夏新蜀 +1 位作者 王志刚 许川山 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期75-76,共2页

目的:低强度超声及联合光敏剂治疗在对癌细胞的杀伤作用方面具有较好的研究前景。本文就低强度超声对肿瘤细胞的杀伤作用及超声联合光敏剂治疗的发展概况进行简述和探讨。

关键词 低强度超声 光敏剂 声动力治疗

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超声联合紫杉醇微泡对卵巢癌细胞株A2780/DDP增殖和凋亡的影响 被引量：1

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作者 刘红霞 常淑芳 +1 位作者 孙江川 王志刚 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期389-392,共4页

目的:探讨超声联合紫杉醇微泡对人卵巢癌细胞A2780/DDP细胞的增殖和凋亡的影响。方法:将人卵巢癌细胞株A2780/DDP随机分为5组:对照组、紫杉醇组、紫杉醇+超声组、紫杉醇微泡组和紫杉醇微泡+超声组。采用噻唑蓝(Methylthiazolyl tetrazol... 目的:探讨超声联合紫杉醇微泡对人卵巢癌细胞A2780/DDP细胞的增殖和凋亡的影响。方法:将人卵巢癌细胞株A2780/DDP随机分为5组:对照组、紫杉醇组、紫杉醇+超声组、紫杉醇微泡组和紫杉醇微泡+超声组。采用噻唑蓝(Methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法检测作用24、48 h和72 h后卵巢癌细胞的增殖活性,并用Hochst 33258和TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。结果:MTT法检测显示紫杉醇微泡+超声组24、48 h和72 h抑制率分别为(37.20±2.01)%、(51.60±2.10)%和(57.47±2.85)%,明显高于其他各处理组(P<0.05);Hochst 33258和TUNEL染色均显示紫杉醇微泡+超声组凋亡率最高,作用24 h后的凋亡率为(46.10±4.15)%,明显高于其余各组(P<0.05)。结论:超声联合紫杉醇微泡能明显抑制人卵巢癌细胞A2780/DDP的增殖和诱导其凋亡。 展开更多

关键词 紫杉醇微泡 卵巢癌 增殖 凋亡

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低强度超声对鼻咽癌CNE2细胞增值和凋亡的影响 被引量：1

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作者 王萍 夏新蜀 +8 位作者 王志刚 余和平 白定群 徐静 王昕娜 何勇 谭勇 向君彦 许川山 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期76-77,共2页

目的:观察低强度超声对人鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响。方法:以低强度超声(频率1.7MHz,剂量1.35W/cm2)辐照CNE2细胞,采用MTT观察超声对COC1细胞增殖的抑制作用;光镜观察细胞形态,细胞核荧光染色法检测凋亡细胞。结果:超声波能够显... 目的:观察低强度超声对人鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响。方法:以低强度超声(频率1.7MHz,剂量1.35W/cm2)辐照CNE2细胞,采用MTT观察超声对COC1细胞增殖的抑制作用;光镜观察细胞形态,细胞核荧光染色法检测凋亡细胞。结果:超声波能够显著抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖,辐照后孵育18h,其MTT光吸收值与对照组相比显著降低:光镜下可见细胞形态学改变,同时Hoechst33258荧光染色法观察到亮蓝色着染的凋亡细胞。结论:低强度超声辐照对人鼻咽癌CNE2细胞体外生长具有明显的抑制作用,并可诱导其凋亡。 展开更多

关键词 低强度超声 细胞凋亡 CNE2细胞

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携HSV_1-TK自杀基因超声微泡造影剂联合前药更昔洛韦对前列腺癌细胞的抑制 被引量：8

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作者 谢鑫 姜庆 +4 位作者 梁培禾 王志刚 郑元义 谭小军 乔娟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1285-1288,共4页

目的观察超声微泡造影剂携单纯疱疹病毒Ⅰ型胸昔激酶(HSV1-TK)基因体外转染及联合前药更昔洛韦(GCV)对前列腺癌细胞株PC-3的抑制效应。方法超声辐照PC-3细胞,MTT筛选出最适辐照时间;将含有HSV1-TK基因的质粒通过静电吸附在脂质微泡表面... 目的观察超声微泡造影剂携单纯疱疹病毒Ⅰ型胸昔激酶(HSV1-TK)基因体外转染及联合前药更昔洛韦(GCV)对前列腺癌细胞株PC-3的抑制效应。方法超声辐照PC-3细胞,MTT筛选出最适辐照时间;将含有HSV1-TK基因的质粒通过静电吸附在脂质微泡表面,采用最适超声辐照转染,并用荧光显微镜及Western blot观察TK基因的转入及表达;MTT法观察使用不同浓度的前药更昔洛韦(GCV)后细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测最适浓度的前药GCV对转染后的前列腺癌细胞PC-3的周期的影响;MTT法观察HSV1-TK/GCV自杀基因系统对前列腺癌PC-3细胞杀伤效应。结果 MTT检测显示超声强度为1.0 W/cm2,频率为1 MHz,辐照时间30 s时超声辐照对细胞无明显的抑制作用;通过超声辐照后HSV1-TK基因可以顺利转入PC-3细胞中并有稳定的表达。与对照组相比,当前药GCV浓度在100μg/ml时,超声+微泡+TK组细胞杀伤率明显高于其他各组,细胞存活率约32%,低于其他各组(P<0.05);流式细胞术检测显示大多数细胞被阻断在S期,细胞生长受到明显抑制。结论以超声辐照微泡造影剂为载体转染自杀基因联合前药GCV,对人前列腺癌细胞有明显杀伤作用。 展开更多

关键词 前列腺癌 超声微泡 基因治疗

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乳腺癌腋窝淋巴结转移影像学诊断的研究进展 被引量：22

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作者 林周谊 张群霞 冉海涛 《中国医学影像学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期552-555,560,共5页

腋窝淋巴结（axillary lymph node,ALN）是否转移是临床评估乳腺癌预后的重要因素。传统ALN清扫术（axillary lymph node dissection,ALND）对乳腺癌的分期起决定性作用;但易导致严重术后并发症,影响术后恢复。

关键词 乳腺肿瘤 淋巴转移 超声检查 乳房 造影剂 活组织检查 针吸 弹性成像技术 磁共振成像 正电子发射断层显像术 体层摄影术 X线计算机 综述

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双靶向超声微泡造影剂评价小鼠缺血再灌注心肌 被引量：1

9

作者 柳阳 王志刚 +2 位作者 刘兴钊 任建丽 李攀 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2012年第12期2113-2116,共4页

目的制备同时携载P选择素和ICAM-1抗体的靶向超声微泡造影剂,以评估小鼠缺血再灌注损伤心肌声学造影显像效果。方法采用生物素-亲和素方法制备靶向微泡,于激光共聚焦显微镜下观察微泡形态,流式细胞仪检测连接效率。将24只健康昆明小鼠... 目的制备同时携载P选择素和ICAM-1抗体的靶向超声微泡造影剂,以评估小鼠缺血再灌注损伤心肌声学造影显像效果。方法采用生物素-亲和素方法制备靶向微泡,于激光共聚焦显微镜下观察微泡形态,流式细胞仪检测连接效率。将24只健康昆明小鼠随机分成3组:结合双抗体选择素微泡组(MBd组)10只、结合P选择素单抗组(MBp组)10只,空白微泡组(MBc组)4只。结扎冠状动脉左前降支近左主干分支,制作心肌缺血再灌注模型,60min后经尾静脉分别注射MBd、MBp及MBc,采集心肌对比造影图像。所有图像均采用Sonomath超声影像分析仪处理。结果 MBd组和MBp组对缺氧内皮细胞的黏附力以及对缺血再灌注区心肌显像增强程度显著高于MBc组(P均<0.05),MBd组对缺血再灌注区心肌显像延迟时间高于MBp组(P<0.05)。结论双靶向微泡联合超声造影是检测和评估小鼠缺血再灌注心肌的无创性手段。 展开更多

关键词 微泡 缺血再灌注 造影剂 超声检查 P选择素

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ATP敏感性钾通道在乳化异氟醚心肌保护效应中的作用 被引量：8

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作者 杨孟昌 陈玉培 +4 位作者 张文胜 刘进 徐茜 曹德钧 李攀 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期169-172,共4页

目的探讨ATP敏感性钾通道(KATP)是否参与乳化异氟醚(EI)对心肌细胞的保护作用。方法原代培养乳鼠离体心肌细胞,建立缺氧/复氧(H/R)损伤模型,随机分为6组,正常组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、H/R+脂肪乳组(F组)、H/R+10mmol.L-1格列本脲... 目的探讨ATP敏感性钾通道(KATP)是否参与乳化异氟醚(EI)对心肌细胞的保护作用。方法原代培养乳鼠离体心肌细胞,建立缺氧/复氧(H/R)损伤模型,随机分为6组,正常组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、H/R+脂肪乳组(F组)、H/R+10mmol.L-1格列本脲组(G组)、H/R+1.68mmol.L-1EI组(EI组)和H/R+1.68mmol.L-1EI+10mmol.L-1格列本脲组(EIG组),n=6。各组取细胞培养上清液测定LDH活力与cTnI含量,心肌细胞匀浆后测定SOD活力与MDA含量;用倒置显微镜观察心肌细胞生长特性及形态的变化。结果与N组比较,各组的LDH、MDA、cTnI均升高(P<0.05),SOD下降(P<0.05)。与H/R组比较,F组的SOD下降(P<0.05),LDH、MDA、cTnI的差异均无统计学意义(P>0.05),G组的SOD、LDH、MDA、cTnI的差异均无统计学意义;EI组和EIG组的LDH、MDA、cTnI均降低(P<0.05),SOD升高(P<0.05)。与F组比较,EI组和EIG组的LDH、MDA、cTnI均下降(P<0.05),SOD升高(P<0.05)。与EI组比较,EIG组的LDH活力、MDA和cT-nI含量均升高,SOD活力降低(P<0.05)。结论乳化异氟醚对原代培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用可能与其激活ATP敏感性钾通道有关。 展开更多

关键词 乳化异氟醚 原代培养 心肌细胞 缺氧 复氧 ATP敏感性钾通道

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pshRNA-survivin脂质体的制备及初步稳定性考察

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作者 李耀威 孙江川 +3 位作者 常淑芳 张勇 陈佳 王志刚 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1211-1214,共4页

目的:制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的pshRNA-survivin脂质体,并对其质量进行评价。方法:采用逆相蒸发法制备pshRNA-survivin脂质体;正交设计优选制备处方;考察脂质体的粒径分布、zeta电位;用超滤离心法测定脂质体的包封率;离心加... 目的:制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的pshRNA-survivin脂质体,并对其质量进行评价。方法:采用逆相蒸发法制备pshRNA-survivin脂质体;正交设计优选制备处方;考察脂质体的粒径分布、zeta电位;用超滤离心法测定脂质体的包封率;离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性。结果:所得优化处方为磷脂与药物比为100∶1,油水比为4∶1,磷脂与胆固醇之比为1.5∶1,旋转蒸发温度为37℃;以优化处方制得的脂质体平均粒径为123.4 nm,zeta电位为(-8.42±0.88)mV,平均包封率达77.9%。结论:选用逆相蒸发法优化pshRNA-survivin脂质体处方合理,工艺简便可行,包封率高,稳定性好。 展开更多

关键词 pshRNA-survivin脂质体 正交设计 超滤离心法 包封率 稳定性

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磁调控微/纳米机器人的理化性质及其医学应用现状和进展

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作者 邹卫娟 吴建荣 郑元义 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1039-1045,共7页

体内靶向递送一直是临床医学迫切希望攻克的难题。磁调控微/纳米机器人具有远程控制移动、无束缚接触、精确的靶向能力和对生物物质不敏感等优点而受到研究者的青睐。其应用范围涉及靶向给药、精准手术、细胞操作、疾病诊疗等,在多种生... 体内靶向递送一直是临床医学迫切希望攻克的难题。磁调控微/纳米机器人具有远程控制移动、无束缚接触、精确的靶向能力和对生物物质不敏感等优点而受到研究者的青睐。其应用范围涉及靶向给药、精准手术、细胞操作、疾病诊疗等,在多种生物医学应用方面具有巨大的潜力。近年来关于磁调控微/纳米机器人的研究取得了一定进展。本文就磁调控微/纳米机器人的磁性和可操作性、生物医学、可视化追踪及生物安全性4个方面的研究和应用进展进行综述。 展开更多

关键词 磁调控微/纳米机器人 生物医学应用 可视化追踪 生物安全性

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