心肌细胞损伤与多种心血管疾病的发生发展有关,而氧化应激和细胞凋亡是造成心肌损伤的重要原因。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)可调控细胞氧化还原状态,并诱导氧化应激的产生,最终可诱导炎症或细胞凋...心肌细胞损伤与多种心血管疾病的发生发展有关,而氧化应激和细胞凋亡是造成心肌损伤的重要原因。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)可调控细胞氧化还原状态,并诱导氧化应激的产生,最终可诱导炎症或细胞凋亡。miR-16-5p能抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的炎症反应和A549细胞损伤。但TXNIP是否受miR-16-5p的调控还鲜有报道。本实验旨在研究miR-16-5p与TXNIP的关系,以及miR-16-5p是否通过结合TXNIP影响心肌细胞氧化应激和凋亡。通过TargetScan数据库预测到TXNIP与miR-16-5p存在结合位点。双荧光素酶报告结果验证miR-16-5p靶向调控TXNIP。转染miR-16-5p过表达载体和TXNIP抑制表达载体后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,细胞凋亡率(10.44±1.13 vs 29.65±2.87,P<0.01)、(13.54±1.33 vs 29.14±2.76,P<0.01)均降低。采用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测丙二醛含量和SOD、GSH-Px活力。结果显示,miR-16-5p组丙二醛含量降低(13.58±1.55 vs 42.18±4.69,P<0.01),SOD活力(79.68±7.65 vs 34.87±3.49,P<0.01)、GSH-Px活力(687.99±35.42 vs 376.48±29.87,P<0.01)升高;si-TXNIP组丙二醛含量(18.69±1.84 vs 45.21±4.33,P<0.01)降低,SOD活力(71.65±7.32 vs 31.69±4.05,P<0.01)、GSH-Px活力(654.12±34.57 vs 367.43±33.54,P<0.01)升高。以上结果表明,过表达miR-16-5p或可抑制TXNIP表达,均可抑制脂多糖诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激反应。综上所述,miR-16-5p可通过抑制TXNIP表达抑制脂多糖诱导的心肌细胞损伤。展开更多
目的探讨NF-κB和TNF-α等炎性因子在高血糖大鼠急性心肌缺血组织的加重损伤机制。方法选择SPF级雄性SD大鼠48只,按随机数字表法分为假手术组、高血糖合并急性心肌梗死(AMI)组(高血糖AMI组)、正常血糖AMI组,每组16只。采用分光光度法和...目的探讨NF-κB和TNF-α等炎性因子在高血糖大鼠急性心肌缺血组织的加重损伤机制。方法选择SPF级雄性SD大鼠48只,按随机数字表法分为假手术组、高血糖合并急性心肌梗死(AMI)组(高血糖AMI组)、正常血糖AMI组,每组16只。采用分光光度法和酶联免疫吸附法检测各组大鼠心肌组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6水平,Western blot法检测缺血心肌组织NF-κB和TNF-α表达。结果与假手术组比较,高血糖AMI组MPO、IL-1β、IL-6水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与高血糖AMI组比较,正常血糖AMI组MPO、IL-1β、IL-6水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,高血糖AMI组NF-κB和TNF-α表达明显升高(P<0.01)。与高血糖AMI组比较,正常血糖AMI组NF-κB和TNF-α表达明显降低(1.231±0.245 vs 1.743±0.383,1.109±0.247 vs 1.624±0.413,P<0.01)。结论高血糖介导的炎性因子MPO、IL-1β、IL-6、NF-κB和TNF-α表达增加可能是加重急性心肌缺血损伤的主要机制之一。展开更多
文摘心肌细胞损伤与多种心血管疾病的发生发展有关,而氧化应激和细胞凋亡是造成心肌损伤的重要原因。硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)可调控细胞氧化还原状态,并诱导氧化应激的产生,最终可诱导炎症或细胞凋亡。miR-16-5p能抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的炎症反应和A549细胞损伤。但TXNIP是否受miR-16-5p的调控还鲜有报道。本实验旨在研究miR-16-5p与TXNIP的关系,以及miR-16-5p是否通过结合TXNIP影响心肌细胞氧化应激和凋亡。通过TargetScan数据库预测到TXNIP与miR-16-5p存在结合位点。双荧光素酶报告结果验证miR-16-5p靶向调控TXNIP。转染miR-16-5p过表达载体和TXNIP抑制表达载体后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,细胞凋亡率(10.44±1.13 vs 29.65±2.87,P<0.01)、(13.54±1.33 vs 29.14±2.76,P<0.01)均降低。采用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测丙二醛含量和SOD、GSH-Px活力。结果显示,miR-16-5p组丙二醛含量降低(13.58±1.55 vs 42.18±4.69,P<0.01),SOD活力(79.68±7.65 vs 34.87±3.49,P<0.01)、GSH-Px活力(687.99±35.42 vs 376.48±29.87,P<0.01)升高;si-TXNIP组丙二醛含量(18.69±1.84 vs 45.21±4.33,P<0.01)降低,SOD活力(71.65±7.32 vs 31.69±4.05,P<0.01)、GSH-Px活力(654.12±34.57 vs 367.43±33.54,P<0.01)升高。以上结果表明,过表达miR-16-5p或可抑制TXNIP表达,均可抑制脂多糖诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激反应。综上所述,miR-16-5p可通过抑制TXNIP表达抑制脂多糖诱导的心肌细胞损伤。
文摘目的探讨NF-κB和TNF-α等炎性因子在高血糖大鼠急性心肌缺血组织的加重损伤机制。方法选择SPF级雄性SD大鼠48只,按随机数字表法分为假手术组、高血糖合并急性心肌梗死(AMI)组(高血糖AMI组)、正常血糖AMI组,每组16只。采用分光光度法和酶联免疫吸附法检测各组大鼠心肌组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6水平,Western blot法检测缺血心肌组织NF-κB和TNF-α表达。结果与假手术组比较,高血糖AMI组MPO、IL-1β、IL-6水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与高血糖AMI组比较,正常血糖AMI组MPO、IL-1β、IL-6水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,高血糖AMI组NF-κB和TNF-α表达明显升高(P<0.01)。与高血糖AMI组比较,正常血糖AMI组NF-κB和TNF-α表达明显降低(1.231±0.245 vs 1.743±0.383,1.109±0.247 vs 1.624±0.413,P<0.01)。结论高血糖介导的炎性因子MPO、IL-1β、IL-6、NF-κB和TNF-α表达增加可能是加重急性心肌缺血损伤的主要机制之一。
