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WTAP通过调控SIRT1诱导小胶质细胞M1型极化的研究
1
作者
周虹秀
高煦
侯胜平
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期620-629,共10页
目的探讨Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(Wilms’tumor 1-associating protein,WTAP)在小胶质细胞活化调控中的作用及其可能的分子机制。方法用100 ng/mL IFNγ联合1μg/mL LPS诱导HMC3小胶质细胞M1极化作为实验组,以未处理的细胞作为空白...
目的探讨Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(Wilms’tumor 1-associating protein,WTAP)在小胶质细胞活化调控中的作用及其可能的分子机制。方法用100 ng/mL IFNγ联合1μg/mL LPS诱导HMC3小胶质细胞M1极化作为实验组,以未处理的细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和N6-甲基腺苷(m6A)相关基因的表达,在HMC3小胶质细胞中转染RNAi慢病毒敲低WTAP,使用实时荧光定量PCR和Western blot检测敲低效率,Western blot检测敲低HMC3小胶质细胞WTAP后促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白表达,Western blot检测敲低WTAP后HMC3小胶质细胞沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating-type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)、COP1、USP18、EP4、促炎转录因子和部分炎症相关通路受体的表达,使用SIRT1激动剂SRT1720和SIRT1抑制剂EX527分别处理空载病毒组和敲低WTAP组HMC3细胞后,Western blot检测c/EBPβ的表达。结果与空白对照组比较,100 ng/mL IFNγ联合1μg/mL LPS诱导的HMC3细胞IL-6、IL-1β、TNF-α表达上调(P<0.05)。M1极化的HMC3小胶质细胞中WTAP高表达(P<0.05)。敲低WTAP后,HMC3细胞促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达降低(P<0.05),SIRT1表达升高(P<0.05),且促炎转录因子c/EBPβ表达降低(P<0.05)。SIRT1激动剂SRT1720使空载病毒组相对高表达的c/EBPβ降低(P<0.01)。SIRT1抑制剂EX527使敲低WTAP的HMC3细胞相对低表达的c/EBPβ升高(P<0.05)。结论WTAP促进HMC3小胶质细胞M1极化,其作用机制可能与通过调控SIRT1表达进而影响c/EBPβ信号通路有关。
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关键词
小胶质细胞
Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白
沉默信息调节因子2相关酶1
N6-甲基腺苷
细胞极化
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职称材料
题名
WTAP通过调控SIRT1诱导小胶质细胞M1型极化的研究
1
作者
周虹秀
高煦
侯胜平
机构
重庆医科大学附属第一院眼科
重庆
市璧山区人民医
院
眼科
出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第7期620-629,共10页
基金
重庆市教委创新科研团队项目(CXQT19015)
重庆市教委项目(KJQN202000406)
+1 种基金
重庆市自然科学基金面上项目(cstc2019jcyjmsxmX0120)
重庆市留学创新支持计划项目(cx2018010)
文摘
目的探讨Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白(Wilms’tumor 1-associating protein,WTAP)在小胶质细胞活化调控中的作用及其可能的分子机制。方法用100 ng/mL IFNγ联合1μg/mL LPS诱导HMC3小胶质细胞M1极化作为实验组,以未处理的细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和N6-甲基腺苷(m6A)相关基因的表达,在HMC3小胶质细胞中转染RNAi慢病毒敲低WTAP,使用实时荧光定量PCR和Western blot检测敲低效率,Western blot检测敲低HMC3小胶质细胞WTAP后促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白表达,Western blot检测敲低WTAP后HMC3小胶质细胞沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating-type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)、COP1、USP18、EP4、促炎转录因子和部分炎症相关通路受体的表达,使用SIRT1激动剂SRT1720和SIRT1抑制剂EX527分别处理空载病毒组和敲低WTAP组HMC3细胞后,Western blot检测c/EBPβ的表达。结果与空白对照组比较,100 ng/mL IFNγ联合1μg/mL LPS诱导的HMC3细胞IL-6、IL-1β、TNF-α表达上调(P<0.05)。M1极化的HMC3小胶质细胞中WTAP高表达(P<0.05)。敲低WTAP后,HMC3细胞促炎细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达降低(P<0.05),SIRT1表达升高(P<0.05),且促炎转录因子c/EBPβ表达降低(P<0.05)。SIRT1激动剂SRT1720使空载病毒组相对高表达的c/EBPβ降低(P<0.01)。SIRT1抑制剂EX527使敲低WTAP的HMC3细胞相对低表达的c/EBPβ升高(P<0.05)。结论WTAP促进HMC3小胶质细胞M1极化,其作用机制可能与通过调控SIRT1表达进而影响c/EBPβ信号通路有关。
关键词
小胶质细胞
Wilms肿瘤抑制因子1相关蛋白
沉默信息调节因子2相关酶1
N6-甲基腺苷
细胞极化
Keywords
microglia
Wilms’tumor 1-associating protein
silent mating-type information regulation 2 homolog 1
N6-methyladenosine
polarization
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
WTAP通过调控SIRT1诱导小胶质细胞M1型极化的研究
周虹秀
高煦
侯胜平
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
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