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人类头颈鳞癌基因组单核苷酸多态性与肿瘤转移的关系 被引量:5
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作者 李雅冬 Ali Gowhere 洪苏玲 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期713-716,共4页
目的检测头颈鳞癌标本,寻找与头颈鳞癌转移高度相关的基因。方法采用单核苷酸多态性基因芯片技术,检测80例临床头颈鳞癌标本,包括舌癌17例,口腔癌13例,口咽癌14例,下咽癌36例。在随访期内,将发生远处转移的39例患者标本作为试验组,将未... 目的检测头颈鳞癌标本,寻找与头颈鳞癌转移高度相关的基因。方法采用单核苷酸多态性基因芯片技术,检测80例临床头颈鳞癌标本,包括舌癌17例,口腔癌13例,口咽癌14例,下咽癌36例。在随访期内,将发生远处转移的39例患者标本作为试验组,将未发生远处转移的41例患者标本作为对照组,利用Cox回归分析基因单核苷酸多态性对肿瘤远处转移的影响。结果单核苷酸多态性检测发现,在位于11q13的区域出现了一个基因组增多所致的独特的峰值。在这个基因组内,Cox回归分析显示,SHANK2基因的rs9651738位点的T等位基因相对G等位基因的相对危险度是3.61(P=0.003),FGF4基因的rs4980690位点的T等位基因相对G等位基因的相对危险度是3.63(P=0.006),ANO1基因的rs7929885位点的T等位基因相对G等位基因的相对危险度是4.35(P=0.008),PPFIA1基因的rs687660位点的T等位基因相对G等位基因的相对危险度是4.24(P=0.011),ORAOV1基因的rs6606651位点的T等位基因相对G等位基因的相对危险度是3.04(P=0.013),CCND1基因的rs592412位点的T等位基因相对G等位基因的相对危险度是4.07(P=0.013)。结论位于基因组11q13的SHANK2基因的rs9651738位点、FGF4基因的rs4980690位点、ANO1基因的rs7929885位点、PPFIA1基因的rs687660位点、ORAOV1基因的rs6606651位点、CCND1基因的rs592412位点的T等位基因相对G等位基因可增加头颈鳞癌发生转移的危险性。 展开更多
关键词 鳞状细胞癌 头颈部肿瘤 基因芯片 单核苷酸多态性 肿瘤转移
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下调FoxM1通过激活JNK/线粒体通路增加人鼻咽癌细胞对紫杉醇的敏感性 被引量:2
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作者 雷越 万婕 +4 位作者 李丹丹 叶琳 刘亚男 祝琳 陈鸿雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期780-787,共8页
目的探讨特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默转录因子叉头框M1(FoxM1)对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、凋亡、紫杉醇敏感性的影响及可能的分子机制。方法采用siRNA靶向沉默鼻咽癌HONE-1细胞FoxM1表达并通过RT-PCR、实时定量PC... 目的探讨特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默转录因子叉头框M1(FoxM1)对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、凋亡、紫杉醇敏感性的影响及可能的分子机制。方法采用siRNA靶向沉默鼻咽癌HONE-1细胞FoxM1表达并通过RT-PCR、实时定量PCR、Western blot检测转染后FoxM1的表达水平。siRNA转染后细胞的增殖和对紫杉醇的敏感性采用MTT法检测,流式细胞仪检测细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率。Western blot检测Ki67、CyclinE1、多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)及c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平。结果转染后FoxM1 mRNA及蛋白的表达均被下调(P<0.01)。siRNA转染组细胞增殖速率减缓(P<0.05),Ki67表达降低(P<0.05)。siRNA转染组G_1期细胞比例增加(P<0.01),S期比例减低(P<0.05),CyclinE1低表达(P<0.01)。同时,siRNA+紫杉醇组凋亡率明显高于阴性及空白对照+紫杉醇组(P<0.01)。siRNA转染组细胞MDR1水平下降(P<0.05),对紫杉醇的敏感性较两对照组明显增强(P<0.01)。siRNA+紫杉醇组与阴性对照+紫杉醇组相比p-JNK1、p-c-Jun、Bax表达上调(P<0.01),Bcl-2表达下调(P<0.01)。结论特异性siRNA沉默FoxM1表达可以影响JNK/线粒体通路活性,抑制鼻咽癌HONE-1细胞增殖,促进其凋亡,提高其对紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 鼻咽癌 转录因子叉头框M1 凋亡 化疗敏感性 紫杉醇 JNK/线粒体通路
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腺病毒介导的siRNA沉默PNUTS基因对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭的影响 被引量:1
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作者 刘霞 余维 +3 位作者 余丹 陈娟 骆小华 李兵 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期161-166,共6页
目的·探讨腺病毒介导小RNA干扰(small interfering RNA,siRNA)下调蛋白磷酸酶1核目标亚基(phosphatase nuclear targeting subunit,PNUTS)的表达对喉癌细胞Hep-2增殖、侵袭、迁移和上皮细胞间质化(epithelial-mesenchymal transiti... 目的·探讨腺病毒介导小RNA干扰(small interfering RNA,siRNA)下调蛋白磷酸酶1核目标亚基(phosphatase nuclear targeting subunit,PNUTS)的表达对喉癌细胞Hep-2增殖、侵袭、迁移和上皮细胞间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法·用携带表达PNUTS siRNA序列的重组腺病毒感染喉癌Hep-2细胞。实验分为空白对照(PBS)组、腺病毒空载(Ad-GFP)组和实验(Ad-siPNUTS)组。实时荧光定量PCR及Western blotting检测细胞中PNUTS的表达。MTT法检测细胞增殖情况。Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力。Western blotting检测细胞中总Rb、磷酸化Rb(p-Rb)、PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)、E2F1、E-cadherin、N-cadherin和ZEB1蛋白的表达。结果·与Ad-GFP组比较,Ad-si PNUTS组Hep-2细胞中PNUTS mRNA和蛋白(均P=0.000)表达水平降低;细胞增殖在第2日(P=0.004)、第3日(P=0.001)、第4日(P=0.000)受到抑制;细胞侵袭及迁移(均P=0.000)能力降低;总Rb(P=0.000)、p-Rb(P=0.000)、PI3K(P=0.023)、p-AKT(P=0.000)、E2F1(P=0.000)、N-cadherin(P=0.005)、ZEB1(P=0.000)蛋白表达水平降低,E-cadherin(P=0.003)蛋白表达水平增加。结论·Ad-si PNUTS抑制喉癌细胞Hep-2的增殖、侵袭及转移能力,并逆转EMT,其可能与PI3K/AKT信号通路、Rb信号通路有关。 展开更多
关键词 喉癌 磷酸酶1核目标亚基 磷酸化Rb 侵袭 上皮细胞间质化
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比较基因组杂交芯片筛选头颈部鳞状细胞癌患者转移相关的差异表达基因 被引量:2
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作者 李雅冬 A Gowhere 洪苏玲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期1974-1976,共3页
目的检测头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)标本,寻找与HNSCC转移有高度相关性的基因。方法采用比较基因组杂交芯片技术,分别检测80例临床HNSCC标本,包括舌癌17例,口腔癌13例,口咽癌14例,下咽癌36例。结... 目的检测头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)标本,寻找与HNSCC转移有高度相关性的基因。方法采用比较基因组杂交芯片技术,分别检测80例临床HNSCC标本,包括舌癌17例,口腔癌13例,口咽癌14例,下咽癌36例。结果比较基因组杂交CGH检测结果示同未发生转移的HNSCC组织标本相比,发生转移的HNSCC组织标本内,基因扩增有显著性差异的位置有1q、4q、7q、11q、Xq,基因缺失有显著性差异的位置有5p、8p、9p、11q、13q、17p。Cox单因素分析发现这些差异基因主要涉及到转录调控和信号传导等功能分类。结论 HNSCC标本中存在与HNSCC转移相关的扩增基因和缺失基因。 展开更多
关键词 头颈部鳞状细胞癌 基因芯片 转移
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微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12通过干扰微管蛋白酪氨酸硝基化促进Hep-2细胞生长 被引量:4
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作者 李雅冬 张劲松 +3 位作者 杨凯 张福军 陈睿 洪苏玲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期728-732,共5页
硝基化酪氨酸与酪氨酸在结构上相似,它在病理情况下会出现,并在细胞内与微管蛋白结合,从而阻碍微管的正常功能.硝基化酪氨酸在肿瘤中的作用,目前研究甚少.本文利用头颈鳞癌Hep-2细胞株,研究微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12(tubulin tyrosi... 硝基化酪氨酸与酪氨酸在结构上相似,它在病理情况下会出现,并在细胞内与微管蛋白结合,从而阻碍微管的正常功能.硝基化酪氨酸在肿瘤中的作用,目前研究甚少.本文利用头颈鳞癌Hep-2细胞株,研究微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12(tubulin tyrosine ligase like 12,TTLL12)和硝基化酪氨酸对头颈鳞癌Hep-2生长的影响,通过Western印迹试验和MTT试验发现,随着硝基化酪氨酸的浓度升高,细胞内生成的硝基化酪氨酸微管蛋白含量也增高,同时细胞生长受抑制的程度显著增高;对建立的TTLL12高表达细胞株加入硝基化酪氨酸培养,结果显示,TTLL12高表达细胞株内的硝基化酪氨酸微管蛋白含量明显低于对照组细胞;对照组细胞的生长明显受到抑制,而高表达细胞株的生长无明显改变,两者的细胞生长有显著性差异(P<0.05).本研究结果提示,TTLL12可通过阻碍硝基化酪氨酸与微管蛋白的结合,使头颈鳞癌Hep-2细胞逃避硝基化酪氨酸的打击.对这一调控机制的进一步研究,必将有助于控制肿瘤细胞的生长,为治疗肿瘤寻找到新的治疗靶点. 展开更多
关键词 微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12 硝基化酪氨酸 头颈鳞癌
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微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12和硝基化酪氨酸对前列腺癌细胞生长的影响
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作者 李雅冬 张劲松 +3 位作者 杨凯 张福军 陈睿 洪苏玲 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期1-4,共4页
目的研究微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12(TTLL12)和硝基化酪氨酸对前列腺癌细胞生长的影响。方法利用正常前列腺上皮细胞株PWR1E、RWPE1和前列腺癌细胞株DU145,通过蛋白质印迹分析检测TTLL12和硝基化酪氨酸微管蛋白的表达量,用MTT实验检... 目的研究微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12(TTLL12)和硝基化酪氨酸对前列腺癌细胞生长的影响。方法利用正常前列腺上皮细胞株PWR1E、RWPE1和前列腺癌细胞株DU145,通过蛋白质印迹分析检测TTLL12和硝基化酪氨酸微管蛋白的表达量,用MTT实验检测细胞的增殖情况。结果在硝基化酪氨酸的作用下,DU145细胞的硝基化酪氨酸微管蛋白表达量低于PWR1E和RWPE1细胞(P<0.05)。和对照组(以含800μmol/L盐酸培养)相比,实验组(以含800μmol/L硝基化酪氨酸的培养液培养)PWR1E和RWPE1细胞增殖受到抑制(P<0.05),而DU145细胞无明显改变(P>0.05)。在有效沉默TTLL12后,实验组(用siTTLL-12转染)的硝基化酪氨酸微管蛋白表达量高于对照组(用siControl转染,P<0.05);实验组内,硝基化酪氨酸使DU145细胞增殖受到抑制(P<0.05),而对照组内,硝基化酪氨酸对细胞增殖改变较小(P>0.05)。结论 TTLL12可使前列腺癌细胞逃避硝基化酪氨酸的打击,从而使前列腺癌细胞逃脱机体监控作用,获得异常增殖机会。 展开更多
关键词 微管蛋白酪氨酸连接酶类似物12 硝基化酪氨酸 前列腺肿瘤
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稳定高表达ANO1对Hep-2细胞生物学性状的影响
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作者 李雅冬 张劲松 +3 位作者 杨凯 张福军 陈睿 洪苏玲 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期952-956,F0003,共6页
目的:建立外源性ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,并观察其对Hep-2细胞生物学性状的影响。方法:设计引物,提取头颈鳞癌患者的临床标本DNA,并以其为模板行PCR,得到ANO1基因序列片段,将ANO1片段插入到PSG-5质粒,转染入Hep-2细胞株,将稳定高表... 目的:建立外源性ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,并观察其对Hep-2细胞生物学性状的影响。方法:设计引物,提取头颈鳞癌患者的临床标本DNA,并以其为模板行PCR,得到ANO1基因序列片段,将ANO1片段插入到PSG-5质粒,转染入Hep-2细胞株,将稳定高表达ANO1的Hep-2细胞株设为实验组,空白质粒转染的Hep-2细胞株设为对照组。并利用Western blotting法和免疫荧光实验检测已转染细胞,观察ANO1的表达情况。利用Boyden小室侵袭实验和黏附实验检测Hep-2细胞生物学性状的变化。结果:成功构建含ANO1片段的pSG-5质粒,Western blotting法检测结果显示,各组均出现目的条带,实验组的相对分子质量为100 000处条带明显较浓。间接免疫荧光实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞内显现出亮绿色荧光,而空白质粒转染的Hep-2细胞内仅有较暗、较浅的绿色荧光。Boyden小室侵袭实验和黏附实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞穿膜细胞百分比和黏附细胞百分比均明显高于对照组,两组结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功建立了ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,稳定高表达ANO1提高了Hep-2细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 头颈部肿瘤 ANO1 HEP-2细胞
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