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呼吸科门诊非器质性呼吸困难的临床分析 被引量:6
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作者 彭印印 郭述良 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1158-1161,共4页
目的调查非器质性呼吸困难在呼吸困难中的发生率及临床特征。方法选择在呼吸科门诊因呼吸困难就诊的783例患者进行调查,确定非器质性呼吸困难的诊断标准,对首次因呼吸困难就诊或在外院多次就诊未发现明确病因的呼吸困难患者进行Nijmege... 目的调查非器质性呼吸困难在呼吸困难中的发生率及临床特征。方法选择在呼吸科门诊因呼吸困难就诊的783例患者进行调查,确定非器质性呼吸困难的诊断标准,对首次因呼吸困难就诊或在外院多次就诊未发现明确病因的呼吸困难患者进行Nijmegen症状学问卷和阿森斯失眠量表(AIS)的自我评估调查,分析临床特征并收集其对呼吸困难的描述语。结果在783例呼吸困难患者中,明确病因的有721例(92.08%),非器质性疾病62例(7.92%)。非器质性呼吸困难患者的发病时间和频率不等,但临床表现典型,常见描述语包括"空气堵在胸口提不上来气""胸口不适及压迫感""呼吸费力"等。发病前有43例(69.53%)患者感觉工作、生活和学习压力大,54例(87.10%)患者有焦虑和(或)抑郁症状,48例(77.42%)患者有失眠症状,所有患者有上述3种状态中的至少1种表现,经抗焦虑、镇静、安眠、暗示治疗等对症处理后可迅速缓解。结论临床医师应提高对非器质性呼吸困难的认识及诊治水平,早期诊断并适当治疗,降低漏诊率和误诊率,避免过度医疗。 展开更多
关键词 呼吸困难 焦虑 失眠
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慢性咳嗽临床诊治的多中心回顾性研究 被引量:29
2
作者 程晓明 曹国强 +5 位作者 戴晓天 陈虹 黎友伦 张巧 马千里 王长征 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期181-183,187,共4页
目的分析慢性咳嗽的临床特征,了解其诊治现状。方法收集2008年10月-2009年12月,重庆4家教学医院呼吸内科门诊和住院部收治的238例慢性咳嗽患者的病例资料,对其临床特征、诊断和治疗情况进行回顾性分析。结果共238例慢性咳嗽患者入选,咳... 目的分析慢性咳嗽的临床特征,了解其诊治现状。方法收集2008年10月-2009年12月,重庆4家教学医院呼吸内科门诊和住院部收治的238例慢性咳嗽患者的病例资料,对其临床特征、诊断和治疗情况进行回顾性分析。结果共238例慢性咳嗽患者入选,咳嗽特点以干咳为主,多数患者有夜间咳嗽。在伴随症状中,以咽喉症状最常见,包括咽喉痒和异物感、清喉、胃食道反流症状。最常见的体征为咽部充血和咽后壁鹅卵石样改变。辅助检查中,以支气管激发试验的阳性率最高。进行慢性咳嗽病因诊断的患者共计254例次,其中拟诊为上气道咳嗽综合征(UACS)、咳嗽变异性哮喘(CVA)和胃食管反流性咳嗽(GERC)依次为115、42和53例次。针对该3大拟诊病因进行针对性治疗,152例次完成治疗后随访,其中562、7和21例次治疗有效,治疗有效率68.4%(104/152)。其他44例次由少见病因引起,分别为慢性扁桃体炎、慢性支气管炎、嗜酸细胞性支气管炎、血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)诱发。总计确诊病因148例次,病因确诊率为58.3%(148/254)。结论目前我国对于慢性咳嗽患者的病因确诊率仍不理想,经验性治疗仍然是主要诊疗策略。 展开更多
关键词 咳嗽 慢性病 胃食管反流 经验医学
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噬菌体Legendre的生物学特性及抗耐药结核潜力的初步研究 被引量:6
3
作者 刘平 邬亭亭 +2 位作者 彭丽 郭述良 罗永艾 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期821-826,共6页
目的研究噬菌体Legendre的生物学特性并初步探索其用于抗耐药结核的潜力。方法双层平板法制备Legendre的噬菌斑,观察其特点,纯化噬菌体,电镜观察Legendre形态;提取Legendre基因组,限制性内切酶酶切分析确定其核酸类型;以不同感染复数扩... 目的研究噬菌体Legendre的生物学特性并初步探索其用于抗耐药结核的潜力。方法双层平板法制备Legendre的噬菌斑,观察其特点,纯化噬菌体,电镜观察Legendre形态;提取Legendre基因组,限制性内切酶酶切分析确定其核酸类型;以不同感染复数扩增Legendre,找出最佳MOI和最小MOI;通过一步生长实验找出Legendre潜伏期、裂解期和裂解量;纯化Legendre颗粒,免疫家兔,获得抗血清,通过中和反应实验测定Legendre以及其他8种噬菌体和Legendre抗血清之间的吸附反应常数K值;采用单斑法测定Legendre的宿主谱;检测Legendre对紫外线、温度、氯仿、酒精、酸碱度的耐受性。结果 Legendre的噬菌斑圆形透明,边界清楚,Legendre头部呈多面体立体对称,直径平均为65 nm,尾长平均为215 nm;基因组核酸能被双链DNA内切酶EcoRⅠ,HindⅢ及BamHⅠ切开,大小约65 kb;Legendre最佳MOI为10-4,最小MOI为10-3,Legendre对耻垢分枝杆菌极度易感;Legendre感染宿主菌的潜伏期为180 min,裂解期为120 min,裂解量为13;Legendre K值为697,Legendre抗血清对非对应噬菌体的中和活性有差异,对DNAⅢ、Bo4、Clark、Sedge、Leo高,对TM4、D29中和活性较低;Legendre能裂解耻垢分枝杆菌、结核分枝杆菌标准株、多数临床耐药株;Legendre对紫外线、温度、氯仿、酒精、酸碱度均敏感。结论 Legendre属于长尾噬菌体科,双链DNA噬菌体,抗原性低,宿主谱广,具有抗耐药结核潜力。 展开更多
关键词 LEGENDRE 耻垢分枝杆菌 结核分枝杆菌 生物学特性 耐药结核病
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分枝杆菌噬菌体Chy2的分离及生物学特性 被引量:5
4
作者 刘平 邬亭亭 +2 位作者 彭丽 郭述良 罗永艾 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1176-1180,共5页
目的分离鉴定新分枝杆菌噬菌体并研究其生物学特性。方法以平板法从泥土中分离纯化噬菌体,紫外线诱导法鉴定溶原性,从噬菌斑大小、颗粒形态和限制性内切酶分析三方面比较Chy2、D29、TM4异同;以不同感染复数(MOI)扩增Chy2,测定最佳MOI;... 目的分离鉴定新分枝杆菌噬菌体并研究其生物学特性。方法以平板法从泥土中分离纯化噬菌体,紫外线诱导法鉴定溶原性,从噬菌斑大小、颗粒形态和限制性内切酶分析三方面比较Chy2、D29、TM4异同;以不同感染复数(MOI)扩增Chy2,测定最佳MOI;通过一步生长实验测出Chy2潜伏期、裂解期和裂解量;采用单斑法测定MOI的裂解谱;检测MOI在不同pH值培养基中裂解耻垢分枝杆菌mc2155的能力。结果成功分离纯化1株分枝杆菌噬菌体,命名为Chy2,其噬菌斑圆形透明,紫外线诱导法处理宿主菌后不能形成噬菌斑,头部呈椭圆形,长尾,基因组核酸能被双链DNA内切酶EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ及XbaⅠ切开,大小约49 kb,与D29、TM4差异大;Chy2最佳MOI为9.58×10-5;Chy2一步生长周期为270 min,潜伏期210 min,裂解期60 min,裂解量为23;Chy2能裂解耻垢分枝杆菌mc2155、结核菌标准株H37Rv、多数临床耐药株;在7H9固体培养基pH值为5.0和7.4时,Chy2均能裂解耻垢分枝杆菌mc2155。结论 Chy2属长尾噬菌体科,基因组为双链DNA,宽噬谱广,是一种潜在的抗结核药物资源。 展开更多
关键词 分枝杆菌噬菌体 耻垢分枝杆菌 结核分枝杆菌 生物学特性 耐药结核病
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非结核分枝杆菌病的流行趋势、诊断及治疗 被引量:20
5
作者 吴琪茵 黎友伦 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期491-494,共4页
关键词 非结核分枝杆菌病 获得性免疫缺陷综合征(acquired IMMUNODEFICIENCY 流行趋势 结核分枝杆菌复合群 非结核分支杆菌病 治疗 诊断
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应用ROC曲线评价神经元特异性烯醇化酶对肺癌诊断的意义 被引量:6
6
作者 李岱容 谌丽君 +1 位作者 薛亚军 吴亚梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期198-200,共3页
目的:应用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析评价肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)对肺癌的诊断价值。方法:利用回顾性分析方法,分析了123例肺癌患者及109例肺部良性疾... 目的:应用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析评价肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)对肺癌的诊断价值。方法:利用回顾性分析方法,分析了123例肺癌患者及109例肺部良性疾病患者的血清NSE水平,采用ROC评价NSE对肺癌的诊断效能。结果:①不同病理分型的肺癌患者组血清NSE水平均明显高于肺部良性疾病患者组(P<0.01);②通过ROC曲线分析,NSE对肺癌诊断的敏感度、特异度、曲线下面积分别为64.2%6、7.9%、0.73%;③NSE与CEA、CYFRA21-1联合检测分析对肺癌的诊断敏感度可达93.5%。结论:NSE单一指标检测对肺癌辅助诊断有一定的价值,其与CEA、CYFRA21-1联合检测可增加对肺癌诊断的敏感性。 展开更多
关键词 神经元特异性烯醇化酶 肺癌 肿瘤标志物 ROC曲线
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结核分枝杆菌噬菌体试剂盒的研制与初步评价 被引量:6
7
作者 彭丽 沈小兵 +1 位作者 罗永艾 王国治 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期389-392,共4页
目的:研制能快速检测标本中结核分枝杆菌的噬菌体试剂盒,并对之在临床上的应用做出初步评价。方法:采用不同方法对噬菌体的生产和保存工艺进行探讨,并且观察该方法中所用试剂的稳定性。建立噬菌体快速检测结核分枝杆菌的方法,分别用噬... 目的:研制能快速检测标本中结核分枝杆菌的噬菌体试剂盒,并对之在临床上的应用做出初步评价。方法:采用不同方法对噬菌体的生产和保存工艺进行探讨,并且观察该方法中所用试剂的稳定性。建立噬菌体快速检测结核分枝杆菌的方法,分别用噬菌体法与传统培养法检测34份临床标本中的结核分枝杆菌,以培养法作为金标准观察噬菌体法的敏感度、特异度和符合率。结果:①在37℃环境中采用琼脂双层法进行噬菌体扩增生产,48h后采用孵育-过滤法收集,可以获得较为理想的产量且简单易行。②噬菌体以液体形式4℃保存或以噬菌体宿主菌的无细胞菌苗作为保护剂进行真空冻干后4℃保存,28周后效价下降不足10的一个数量级。③噬菌体法中的重要试剂:辅助细菌和杀病毒剂,4℃保存40周均具有良好的稳定性。④34份痰标本培养4周,其中2份污染,29份阳性,3份阴性;噬菌体法检测标本中结核分枝杆菌的敏感度、特异度和符合率分别为86.2%(25/29)、66.7%(2/3)、84.4%(27/32)。结论:噬菌体法在48h内可以快速检测标本中的结核分枝杆菌活菌,并且具有以试剂盒形式进行商业化生产的可行性,将有助于临床结核病的快速诊断。 展开更多
关键词 噬菌体 分枝杆菌 结核 诊断
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肺炎链球菌3型多糖对支气管哮喘小鼠气道炎症及Treg/Th17细胞的影响 被引量:4
8
作者 周丽蓉 张劼 罗永艾 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期471-476,共6页
目的观察肺炎链球菌3型多糖(T3P)对支气管哮喘小鼠气道炎症以及Treg/Th17细胞的影响,探讨T3P对哮喘小鼠的免疫调节作用。方法 BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组和T3P组,每组8只。哮喘组以卵清蛋白(OVA)致敏、气道激发建立哮喘模型,对... 目的观察肺炎链球菌3型多糖(T3P)对支气管哮喘小鼠气道炎症以及Treg/Th17细胞的影响,探讨T3P对哮喘小鼠的免疫调节作用。方法 BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组和T3P组,每组8只。哮喘组以卵清蛋白(OVA)致敏、气道激发建立哮喘模型,对照组以PBS代替,T3P组在OVA致敏前皮下注射T3P进行干预。观察小鼠肺组织病理改变,对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类,ELISA法检测血清OVA特异性IgE(OVA-IgE)以及BALF中白介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-10、IL-17浓度,实时荧光定量PCR法检测肺组织中转录因子Foxp3和RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测Treg和Th17细胞占CD4^+细胞百分比。结果 T3P组小鼠肺组织炎症反应程度弱于哮喘组,血清OVA-IgE,BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞比例以及IL-4、IL-17浓度均低于哮喘组(P<0.05),IFN-γ、IL-10浓度高于哮喘组(P<0.05),小鼠肺组织Foxp3 mRNA表达水平及Treg占CD4^+细胞百分比均高于哮喘组(P<0.05),RORγt mRNA表达水平和Th17细胞占CD4^+细胞百分比均低于哮喘组(P<0.05)。哮喘组和T3P组小鼠肺组织Foxp3-mRNA/RORγt-mRNA比值及Treg/Th17细胞比例与BALF中嗜酸粒细胞数量呈负相关。结论 T3P可以通过抑制过敏原特异性IgE表达调节Th1/Th2、Treg/Th17细胞平衡,抑制气道炎症。 展开更多
关键词 3型多糖 哮喘 调节性T淋巴细胞 TH17细胞 炎症
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肺炎链球菌溶血素经死亡受体/Fas途径和线粒体途径诱导RAW264.7细胞凋亡 被引量:3
9
作者 董姗姗 王虹 +6 位作者 贺潇 李忱伟 董杰 姜慧 袁军 何於娟 李岱容 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期196-199,204,共5页
目的:探讨肺炎链球菌溶血素(Pneumolysin,Ply)对小鼠RAW264.7细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用及机制。方法:Ply蛋白加入RAW264.7细胞培养上清与细胞共孵育。倒置显微镜观察Ply对RAW264.7细胞形态的影响。MTT法检测Ply对RAW264.7细胞的... 目的:探讨肺炎链球菌溶血素(Pneumolysin,Ply)对小鼠RAW264.7细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用及机制。方法:Ply蛋白加入RAW264.7细胞培养上清与细胞共孵育。倒置显微镜观察Ply对RAW264.7细胞形态的影响。MTT法检测Ply对RAW264.7细胞的增殖抑制。Annexin V法检测细胞凋亡率。分光光度法检测Caspase-3、8、9活性。免疫细胞化学法检测到Bax、Fas、Bcl-2蛋白的表达。结果:Ply对小鼠RAW264.7细胞有明显的增殖抑制作用,呈剂量和时间依赖性;1μg/ml Ply处理RAW264.7细胞24小时后,可见典型的凋亡形态学改变;1μg/ml Ply处理RAW264.7细胞1小时和3小时后,细胞凋亡率分别为32.90%和51.56%(P<0.05);1μg/ml Ply蛋白处理RAW264.7细胞24小时,Caspase-3、8、9活性均比对照组升高(P<0.05);免疫细胞化学法检测到Bax、Fas表达较对照组增强,Bcl-2表达减弱(P<0.01)。结论:Ply可诱导小鼠RAW264.7细胞凋亡,诱导凋亡的机制可能是通过死亡受体/Fas途径和线粒体途径双重机制的介导实现。 展开更多
关键词 Ply RAW264.7细胞 凋亡 Fas途径 线粒体途径
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糠酸莫米松吸入治疗过敏性鼻炎对支气管哮喘的影响 被引量:11
10
作者 江程澄 吴亚梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期467-469,共3页
目的:为探明糠酸莫米松吸入治疗过敏性鼻炎对支气管哮喘的影响。方法:采用自身前后对照试验。将澳大利亚皇家王子爱费尔德(Royal Prince Alfred)医院呼吸内科的25例支气管哮喘合并过敏性鼻炎的患者先单一吸入沙美特罗/丙酸氟替卡松干粉... 目的:为探明糠酸莫米松吸入治疗过敏性鼻炎对支气管哮喘的影响。方法:采用自身前后对照试验。将澳大利亚皇家王子爱费尔德(Royal Prince Alfred)医院呼吸内科的25例支气管哮喘合并过敏性鼻炎的患者先单一吸入沙美特罗/丙酸氟替卡松干粉剂50μg/250μg(英文名:Seretide)治疗,每次1吸,每天2次,3月后,然后加用糠酸莫米松鼻腔喷雾剂50μg(商品名:内舒纳)(英文名:Nasonex)治疗,每次每侧鼻腔1喷,每日2次,分别于治疗前、治疗3月后以及加用糠酸莫米松治疗3月后观察用力肺活量(FVC)、第一秒呼气容积(FEV1)、日间哮喘评分及夜间憋醒次数的变化,比较不同治疗方法的疗效。结果:加用糠酸莫米松治疗过敏性鼻炎后,患者的FVC、FEV1、短效β2受体激动剂应用次数、日间哮喘评分及夜间憋醒次数有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:应用糠酸莫米松治疗过敏性鼻炎,可显著提高支气管哮喘患者的治疗效果。 展开更多
关键词 支气管哮喘 过敏性鼻炎 沙美特罗/丙酸氟替卡松 糠酸莫米松鼻腔喷雾剂
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82例弥漫性肺浸润病例的临床分析 被引量:3
11
作者 余纪会 敖敏 郭述良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期257-260,共4页
目的分析、总结弥漫性肺浸润(diffuse pulmonary infiltrates,DPI)的病因构成、临床特点、胸部影像学特点、鉴别诊断要点、实验室检查要点,以提高临床医师对DPI的认识和诊治水平。方法前瞻性研究我院2010年3月至2011年7月诊治的82例DPI... 目的分析、总结弥漫性肺浸润(diffuse pulmonary infiltrates,DPI)的病因构成、临床特点、胸部影像学特点、鉴别诊断要点、实验室检查要点,以提高临床医师对DPI的认识和诊治水平。方法前瞻性研究我院2010年3月至2011年7月诊治的82例DPI患者的临床资料,包括病史、体征、影像学、实验室检查等资料,并进行分析总结。结果 82例DPI患者的病因构成如下:感染性疾病30例(36.6%),特发性间质性肺炎(idiopathic interstitial pneumonia,IIP)17例(20.7%),结缔组织疾病(connective tissue disease,CTD)肺部浸润9例(11%),肺癌6例(7.3%),血管炎4例(4.9%),肺水肿4例(4.9%),结节病3例(3.7%),肺泡蛋白沉着症2例(2.4%),淋巴瘤、肺泡微石症、放射性肺炎、吸入性肺炎、药物因素致肺纤维化、弥漫性泛细支气管炎、特发性肺含铁血黄素沉着症各1例(1.2%)。不同病因的DPI在临床病史、体征、胸部影像学、实验室检查及肺活检病理学检查等方面都有各自的特点。结论 DPI病因复杂,以感染性疾病及IIP、CTD较常见,发热、Velcro啰音等是重要的有鉴别诊断价值的临床特点,磨玻璃影、网格影、结节影等是特征性的有鉴别诊断价值的影像学表现,感染性疾病应注重病原学检查,非感染性疾病应注重一些特殊实验室检查及病理学检查。 展开更多
关键词 弥漫性肺浸润 临床 影像学 病因 鉴别诊断
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IL-4调控DC-SIGN表达对树突状细胞免疫学功能的影响及与结核病发生的关系 被引量:3
12
作者 刘平 郭述良 罗永艾 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第13期1295-1298,共4页
目的研究IL-4调控树突状细胞特异性非整合素(dendritic-cell specific ICAM-3 grabbing non-integrin,DC-SIGN)的表达对树突状细胞免疫学功能的影响,以探讨DC-SIGN表达与结核病发生的关系。方法用不同剂量的IL-4(5、10、50、100、200ng/... 目的研究IL-4调控树突状细胞特异性非整合素(dendritic-cell specific ICAM-3 grabbing non-integrin,DC-SIGN)的表达对树突状细胞免疫学功能的影响,以探讨DC-SIGN表达与结核病发生的关系。方法用不同剂量的IL-4(5、10、50、100、200ng/ml)调控DCs表面DC-SIGN的表达水平;根据加入IL-4剂量将DCs分为5ng/ml组和50ng/ml组,分别加入100ng/ml的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、结核杆菌H37Rv菌悬液共培养。应用流式细胞仪检测各组DCs表型(CD11c、DC-SIGN、CD83、CD86、HLA-DR),ELISA法检测细胞培养液中IL-12、IL-10含量,混合淋巴细胞培养法检测各组DCs刺激T淋巴细胞增殖的能力。结果①IL-4能调控DC-SIGN的表达水平,并呈剂量依赖性,当加入IL-4的剂量由5ng/ml增加到50ng/ml时,DC-SIGN的表达水平显著增加(P<0.05)。当IL-4的剂量由50ng/ml增至200ng/ml时,DC-SIGN的表达水平虽仍随IL-4剂量增加而增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。②表达不同水平DC-SIGN的DCs成熟度无显著差异(P>0.05)。③表达不同水平DC-SIGN的DCs加入LPS、H37Rv诱导后,培养液中IL-12含量无显著差异(P>0.05),加入LPS诱导后培养液中IL-10含量也无显著差异(P>0.05),但DC-SIGNhigh-DCs加入H37Rv诱导后培养液中IL-10含量明显高于DC-SIGNlow-DCs(P<0.05)。④表达不同水平DC-SIGN的DCs加入LPS诱导后刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。DC-SIGNhigh-DCs加入H37Rv诱导成熟后与DCs加入LPS诱导成熟后刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力相当(P>0.05),但DC-SIGNlow-DCs加入H37Rv诱导后刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力明显低于其他3组(P<0.05)。结论DC-SIGNhigh-DCs加入H37Rv诱导后分泌IL-10水平明显高于DC-SIGNlow-DCs,但DC-SIGNlow-DCs加入H37Rv诱导后刺激T淋巴细胞增殖的能力明显降低。DC-SIGN表达过高或过低均不利于机体抗结核免疫应答。 展开更多
关键词 树突状细胞 结核 免疫应答 DC-SIGN IL4
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耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌噬菌体的分离鉴定及其生物学特性 被引量:7
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作者 张劼 罗永艾 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期589-593,共5页
目的通过分离耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)噬菌体,研究其生物学特性,为噬菌体治疗CRAB感染提供实验依据。方法利用噬菌斑法从医院污水中分离CRAB噬菌体,电子显微镜观察噬菌体的形态特征,提取其基因组行酶切电泳,SDS-PAGE分析噬菌体... 目的通过分离耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)噬菌体,研究其生物学特性,为噬菌体治疗CRAB感染提供实验依据。方法利用噬菌斑法从医院污水中分离CRAB噬菌体,电子显微镜观察噬菌体的形态特征,提取其基因组行酶切电泳,SDS-PAGE分析噬菌体表面衣壳蛋白,测定噬菌体感染复数和耐受突变率,并观察其一步生长曲线。结果筛选出1株具有较宽裂解谱的无尾双链DNA的CRAB噬菌体,命名为噬菌体AB3。其基因组大小约35 kb,表面主要衣壳蛋白相对分子质量约为35×103。该噬菌体感染宿主菌的潜伏期为20 min,爆发期为60 min,裂解量为350,耐受突变率为2.5×10-10,对pH值耐受范围广,热稳定性好。结论噬菌体AB3具有较宽的噬菌谱,潜伏期短、裂解量大、耐受突变率低,对理化因素稳定性好,具有临床应用前景。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 噬菌体 生物学特性
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磷脂转运蛋白参与烟草提取物诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡 被引量:3
14
作者 廖科 陈虹 +2 位作者 赵绿翠 巫凤苹 陈亚娟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期941-946,共6页
目的研究磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物对大鼠Ⅱ型肺泡上皮凋亡中的作用。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h,分别加入0.5%,1.0%和2.0%烟草提取物共培养24 h或48 h;委托上海吉玛公司合成siRNA-PLTP,并将siRNA-PLTP转染入RLE-... 目的研究磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物对大鼠Ⅱ型肺泡上皮凋亡中的作用。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h,分别加入0.5%,1.0%和2.0%烟草提取物共培养24 h或48 h;委托上海吉玛公司合成siRNA-PLTP,并将siRNA-PLTP转染入RLE-6TN中,下调PLTP的表达后,观察烟草烟雾对RLE-6TN细胞凋亡的影响。Hochest染色后观察细胞核的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法(Western blot)检测PLTP的表达量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性。结果经不同浓度的(0.5%,1.0%,2.0%)烟草提取物作用后,细胞早期凋亡率由(1.68±0.098)%增加至(18.663±0.964)%(P<0.001);Hoechst染色可见部分凋亡细胞,核发白、固缩、染色质边集等现象;PLTP的表达和caspase-3的活性增加;将PLTP敲降后,可部分逆转烟草提取物诱导的RLE-6TN细胞中caspase-3的活性的增加(P<0.05)。结论 PLTP参与烟草提取物诱导大鼠肺泡上皮细胞的凋亡。 展开更多
关键词 烟草提取物 大鼠肺泡上皮细胞 凋亡 磷脂转运蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
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组织胞浆菌病1例报告并文献复习 被引量:1
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作者 余纪会 郭述良 +2 位作者 黄仕聪 王璞 杨丹 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1151-1152,共2页
组织胞浆菌病(Histoplasmosis,HP)是一种由组织胞浆菌引起的以侵犯网状内皮系统或肺部为主的深部真菌病,在我国少见,常经呼吸道感染,侵犯肺部引起急慢性损害,严重者可累及全身单核巨噬细胞系统,引起多系统症状,
关键词 组织胞浆菌病 文献复习 单核巨噬细胞系统 网状内皮系统 深部真菌病 呼吸道感染 慢性损害 系统症状
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低频低强度超声对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的损伤效应 被引量:3
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作者 谢霜 杨敏 +1 位作者 杜永洪 李岱容 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期1476-1482,共7页
目的探讨低频低强度超声(low frequency low intensity ultrasound,LFLIU)对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的损伤效应及机制。方法将巨噬细胞RAW264.7分为超声辐照0、5、10 min和15 min组(n=3),应用MTT比色法分析不同超声强度对RAW264.7细胞... 目的探讨低频低强度超声(low frequency low intensity ultrasound,LFLIU)对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的损伤效应及机制。方法将巨噬细胞RAW264.7分为超声辐照0、5、10 min和15 min组(n=3),应用MTT比色法分析不同超声强度对RAW264.7细胞存活率的影响,采用流式细胞术检测RAW264.7细胞经超声辐照以及吞噬细菌后的凋亡率和坏死率,使用平板计数法评估RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌活性,使用激光共聚焦显微镜观察RAW264.7细胞经超声辐照后活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。结果超声辐照声强为0.14 W/cm^2,辐照时间为5、10 min时,RAW264.7细胞活性未见明显影响,存活率分别为(116.37±9.54)%、(97.14±9.26)%;经0.14 W/cm2超声辐照5 min后,RAW264.7细胞的凋亡率和坏死率显著大于超声辐照0 min组(P<0.05);平板菌落计数结果显示,RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌经声强0.14 W/cm^2超声辐照5、10 min后活性均低于超声辐照0 min组(P<0.05);激光共聚焦观察到0.14 W/cm^2超声刺激RAW264.7细胞产生了ROS。结论 LFLIU能诱导RAW264.7细胞凋亡和产生ROS,并导致RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌活性下降。 展开更多
关键词 低频低强度超声 巨噬细胞 耻垢分枝杆菌 凋亡 活性氧
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鲍曼不动杆菌噬菌体AB3裂解酶基因的表达及其抗菌活性分析 被引量:1
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作者 张劼 周丽蓉 罗永艾 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期1823-1826,共4页
目的构建噬菌体AB3裂解酶LysAB3原核表达载体,测定LysAB3对鲍曼不动杆菌的抗菌活性。方法PCR扩增LysAB3基因,以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达LysAB3,金属离子螯合亲和层析法纯化重组蛋白。检测LysAB3的抗菌力... 目的构建噬菌体AB3裂解酶LysAB3原核表达载体,测定LysAB3对鲍曼不动杆菌的抗菌活性。方法PCR扩增LysAB3基因,以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达LysAB3,金属离子螯合亲和层析法纯化重组蛋白。检测LysAB3的抗菌力、裂解谱、作用的最佳pH和温度,以及对细胞壁肽聚糖的降解力。结果扩散法表明LysAB3对40株鲍曼不动杆菌均有抗菌作用,并可降解其肽聚糖。LysAB3作用的最佳pH为7,最佳温度为25℃。经LysAB3作用后的鲍曼不动杆菌,在扫描电镜下可见菌体表面粗糙、皱缩,部分裂解为碎片。结论噬菌体AB3裂解酶LysAB3对鲍曼不动杆菌具有明显的抗菌活性。 展开更多
关键词 噬菌体 裂解酶 鲍曼不动杆菌 抗菌活性
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优化方案治疗复治药物敏感肺结核的疗效评价 被引量:9
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作者 戈启萍 杜建 +35 位作者 舒嶶 马艳 马丽萍 赵彩燕 陈瑜晖 张立杰 黄学锐 韩喜琴 陈盛玉 王飞 李波 曹文利 刘倩颖 陈东进 石莲 王鑫 黎友伦 杨尚鹏 彭章丽 吴超 欧阳兵 王芙蓉 李钋 吴湘 席秀娥 冷学艳 张海晴 李华 李鹃 杨澄清 张朋 崔洪哲 谢莉 刘宇红 李亮 高微微 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2021年第4期328-334,共7页
目的评价优化方案治疗复治药物敏感肺结核患者的临床疗效及安全性。方法采取多中心、随机、开放、平行、对照的前瞻性队列研究,中心单位统一发放随机号随机分组,选取复治涂阳培阳或涂阴培阳肺结核患者共381例为研究对象,其中优化治疗方... 目的评价优化方案治疗复治药物敏感肺结核患者的临床疗效及安全性。方法采取多中心、随机、开放、平行、对照的前瞻性队列研究,中心单位统一发放随机号随机分组,选取复治涂阳培阳或涂阴培阳肺结核患者共381例为研究对象,其中优化治疗方案组(简称"优化方案组")244例和标准化治疗方案组(简称"标准方案组")137例。采用SPSS 19.0软件进行数据统计,计数资料采用χ^(2)检验,当理论频数<1时,采用Fisher确切概率法检验,以P<0.05为差异有统计学意义。比较两组方案治疗成功率及不良反应发生等情况。结果疗程结束,优化方案组治愈175例,完成治疗30例,治疗成功率为84.0%(205/244);标准方案组治愈92例,完成治疗10例,治疗成功率为74.5%(102/137),两组比较差异有统计学意义(χ^(2)=5.128,P=0.024)。优化方案组和标准方案组不良反应发生率分别为25.8%(63/244)和21.2%(29/137),两组比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.037,P=0.309);严重不良反应发生率分别为2.5%(6/244)和4.4%(6/137),两组差异无统计学意义(χ^(2)=0.525,P=0.469)。结论优化方案可提高复治药物敏感肺结核患者治疗成功率,且不增加药物不良反应的发生率。 展开更多
关键词 结核 抗结核药 再治疗 临床方案
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腐胺对小鼠成纤维细胞中Atp8a1基因表达的影响
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作者 万涛 李朝幸 +5 位作者 田园园 王李英 秦栋栋 李凯 曲嘉琳 汤华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期133-135,共3页
目的:研究腐胺对小鼠成纤维细胞中Atp8a1基因表达的影响,初步探讨其作用机制。方法:用基因芯片和Real-timePCR检测正常小鼠和Azin1(Antizyme inhibitor 1)基因敲除小鼠肝脏组织中Atp8a1基因的在mRNA水平上的表达;构建Atp8a1基因启动子... 目的:研究腐胺对小鼠成纤维细胞中Atp8a1基因表达的影响,初步探讨其作用机制。方法:用基因芯片和Real-timePCR检测正常小鼠和Azin1(Antizyme inhibitor 1)基因敲除小鼠肝脏组织中Atp8a1基因的在mRNA水平上的表达;构建Atp8a1基因启动子的虫荧光素酶报告质粒pGL3-Atp8a1-P;将重组质粒转染NTH3T3成纤维细胞中,分别在含有4μg/ml腐胺和不含腐胺的条件下,用双荧光素酶检测系统检测虫荧光素酶活性。结果:在含有腐胺的培养条件下,转染Atp8a1基因启动子虫荧光素酶报告质粒的细胞虫荧光素酶的活性明显改变。结论:腐胺能够抑制Atp8a1基因启动子活性而降低其在NIH3T3成纤维细胞中的表达。 展开更多
关键词 腐胺 Atp8a1 启动子 基因表达 Azin1基因敲除小鼠
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Ipr1/PPE68穿梭质粒构建及诱导BALB/c小鼠免疫应答的探讨
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作者 张壮苗 杨春 +5 位作者 靳志栋 何永林 徐蕾 王静娴 董志玲 李岱容 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期429-432,共4页
目的构建Ipr1/PPE68共表达穿梭质粒pBIPO(pBud-Ipr1-PPE68-OriM),探讨其诱导BALB/C小鼠的免疫应答特征。方法将Ipr1基因和PPE68编码序列以及结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的复制子OriM分别插入质粒pBudCE4.1的多克隆位... 目的构建Ipr1/PPE68共表达穿梭质粒pBIPO(pBud-Ipr1-PPE68-OriM),探讨其诱导BALB/C小鼠的免疫应答特征。方法将Ipr1基因和PPE68编码序列以及结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的复制子OriM分别插入质粒pBudCE4.1的多克隆位点,构建共表达穿梭质粒pBIPO,经酶切测序及Western blotting鉴定后,用其免疫BALB/c小鼠,于末次免疫后2w处死小鼠,ELISA法分别检测小鼠血清中lgG2a、IL-12及IFN-γ的水平,流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞数量,MTT法检测特异性脾淋巴细胞增殖,同时观察肺脾组织病理学变化。结果酶切测序鉴定PPE68和Ipr1基因序列与理论值相符,Western-blotting鉴定PPE68和Ipr1蛋白表达成功。质粒pBIPO免疫后小鼠血清中的lgG2a、IFN-γ及IL-12水平与CD4+和CD8+T细胞表达均呈现出有意义的提高,脾淋巴细胞增殖与BCG组相比差异无统计学意义,肺脾组织未见病理学改变。结论成功构建DNA疫苗(pBIPO),该疫苗能够有效诱导BALB/c小鼠的细胞免疫应答,为进一步研究其抗MTB的免疫保护作用奠定基础。 展开更多
关键词 MTB Ipr1 PPE68 DNA疫苗 免疫应答
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