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脐带间充质干细胞外泌体修复骨质疏松大鼠颅骨缺损的研究
被引量：
2
1
作者
刘耘佟
李汶洋
向学熔
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期18-23,共6页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HucMSCs)来源外泌体对骨质疏松大鼠颅骨缺损的修复作用。方法:提取HucMSCs来源外泌体,使用透射电镜及纳米颗粒追踪分析鉴定其形态及大小,使用Western blot鉴...
目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HucMSCs)来源外泌体对骨质疏松大鼠颅骨缺损的修复作用。方法:提取HucMSCs来源外泌体,使用透射电镜及纳米颗粒追踪分析鉴定其形态及大小,使用Western blot鉴定其表面标志物;分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)并使用流式细胞术鉴定其表面标志物;将外泌体(空白对照、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL)与BMSCs共培养,检测不同浓度的外泌体对BMSCs增殖及成骨向分化的影响;选取SD大鼠通过卵巢切除术(ovariectomy,OVX)构建骨质疏松模型,在颅骨缺损模型建立的同时注射外泌体悬液,术后8周处死大鼠,取术区组织进行micro-CT扫描并进行骨量分析,HE染色后显微镜下观察骨缺损愈合情况,评价HucMSCs来源外泌体对骨质疏松大鼠颅骨缺损的修复潜能。结果:透射电镜及纳米颗粒追踪分析结果显示,提取的HucMSCs来源外泌体形态及大小符合要求,表面蛋白标志物CD63及CD81表达均呈阳性。大鼠BMSCs表面标志物CD29高表达(99.86%)、CD90高表达(99.50%),CD45低表达(4.12%),符合间充质干细胞特征。将60μg/mL的外泌体与BMSCs共培养5 d后细胞活力为对照组的(127.782±7.184)%(P=0.001),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达为对照组的(2.715±0.095)倍(P=0.003),Runx家族转录因子2(Runx family transcription factor 2,Runx2)的表达为对照组的(2.175±0.731)倍(P=0.140)。在OVX诱导的骨质疏松SD大鼠颅骨缺损模型的修复中,micro-CT显示外泌体组相对于对照组出现了明显的骨愈合增加,骨量分析结果显示外泌体组骨组织比例为(11.000±1.708)%(P=0.008),骨小梁数目为(0.742±0.112)mm-1(P=0.014),骨小梁厚度为(0.175±0.008)mm(P=0.005),骨小梁间隙为(1.402±0.507)mm(P=0.022)。组织学结果显示新生骨的结构完整、层次清晰,为致密的板层样骨,有均匀的骨基质和骨陷窝。结论:HucMSCs来源的外泌体能够促进BMSCs的增殖活性及成骨向分化,具有修复骨质疏松骨缺损的能力。
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关键词
脐带间充质干细胞
外泌体
骨质疏松
颅骨缺损
骨再生
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题名
脐带间充质干细胞外泌体修复骨质疏松大鼠颅骨缺损的研究
被引量：
2
1
作者
刘耘佟
李汶洋
向学熔
机构
重庆医科大学附属口腔医院、口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室、重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室牙周科
重庆医科大学
附属
口腔
医院
、口腔疾病
与生物医学
重庆市
重点
实验室
、重庆市
高校
市级
口腔
生物医学
工程
重点
实验室
颌面外一
科
重庆医科大学
附属
口腔
医院
、口腔疾病
与生物医学
重庆市
重点
实验室
、重庆市
高校
市级
口腔
生物医学
工程
重点
实验室
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出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期18-23,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:82071088)
重庆医科大学未来医学青年创新团队支持计划资助项目(编号:W0095)。
文摘
目的:探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HucMSCs)来源外泌体对骨质疏松大鼠颅骨缺损的修复作用。方法:提取HucMSCs来源外泌体,使用透射电镜及纳米颗粒追踪分析鉴定其形态及大小,使用Western blot鉴定其表面标志物;分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)并使用流式细胞术鉴定其表面标志物;将外泌体(空白对照、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL)与BMSCs共培养,检测不同浓度的外泌体对BMSCs增殖及成骨向分化的影响;选取SD大鼠通过卵巢切除术(ovariectomy,OVX)构建骨质疏松模型,在颅骨缺损模型建立的同时注射外泌体悬液,术后8周处死大鼠,取术区组织进行micro-CT扫描并进行骨量分析,HE染色后显微镜下观察骨缺损愈合情况,评价HucMSCs来源外泌体对骨质疏松大鼠颅骨缺损的修复潜能。结果:透射电镜及纳米颗粒追踪分析结果显示,提取的HucMSCs来源外泌体形态及大小符合要求,表面蛋白标志物CD63及CD81表达均呈阳性。大鼠BMSCs表面标志物CD29高表达(99.86%)、CD90高表达(99.50%),CD45低表达(4.12%),符合间充质干细胞特征。将60μg/mL的外泌体与BMSCs共培养5 d后细胞活力为对照组的(127.782±7.184)%(P=0.001),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达为对照组的(2.715±0.095)倍(P=0.003),Runx家族转录因子2(Runx family transcription factor 2,Runx2)的表达为对照组的(2.175±0.731)倍(P=0.140)。在OVX诱导的骨质疏松SD大鼠颅骨缺损模型的修复中,micro-CT显示外泌体组相对于对照组出现了明显的骨愈合增加,骨量分析结果显示外泌体组骨组织比例为(11.000±1.708)%(P=0.008),骨小梁数目为(0.742±0.112)mm-1(P=0.014),骨小梁厚度为(0.175±0.008)mm(P=0.005),骨小梁间隙为(1.402±0.507)mm(P=0.022)。组织学结果显示新生骨的结构完整、层次清晰,为致密的板层样骨,有均匀的骨基质和骨陷窝。结论:HucMSCs来源的外泌体能够促进BMSCs的增殖活性及成骨向分化,具有修复骨质疏松骨缺损的能力。
关键词
脐带间充质干细胞
外泌体
骨质疏松
颅骨缺损
骨再生
Keywords
umbilical cord mesenchymal stem cell
exosome
osteoporosis
skull defect
bone regeneration
分类号
R78 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
脐带间充质干细胞外泌体修复骨质疏松大鼠颅骨缺损的研究
刘耘佟
李汶洋
向学熔
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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