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低强度聚焦超声通过瞬时受体电位M7促进骨髓间充质干细胞成骨分化
1
作者
姚欢
郑妍
+2 位作者
李娅莎
赵丽
杨珂
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第16期1469-1475,共7页
目的探讨瞬时受体电位M7(transient receptor potential melastatin 7,Trpm7)在低强度聚焦超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)促进骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化中的作用及其机制。方法分离培...
目的探讨瞬时受体电位M7(transient receptor potential melastatin 7,Trpm7)在低强度聚焦超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)促进骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化中的作用及其机制。方法分离培养小鼠BMSCs,流式细胞检测其特异性表面标志,茜素红和油红O染色检测其分化能力。碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性读数筛选LIPUS作用时间。ALP和茜素红染色观察LIPUS处理后促进成骨分化的能力,q PCR检测Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA水平表达的变化,并检测LIPUS处理后24、48、72 h Trpm7 mRNA水平表达的差异。进一步分为对照组(LIPUS未处理组)、LIPUS处理组、LIPUS+二甲基亚砜(DMSO)组和LIPUS+Trpm7抑制剂2-氨乙基硼酸二苯酯(2-APB)组,ALP活性读数、ALP染色和茜素红染色评价成骨分化能力,Western blot检测Trpm7和OPN、Runx2的蛋白表达。结果体外培养获得BMSCs,与未处理组比较,LIPUS作用2 min组细胞ALP活性读数升高最为明显,LIPUS处理后细胞的ALP染色和茜素红染色明显增强,成骨分化相关基因OPN、OCN、RUNX2 mRNA表达明显增加(P<0.05),LIPUS处理1、2、3 d后Trpm7 mRNA表达显著增加(P<0.05)。LIPUS+2-APB组的ALP活性较LIPUS组和LIPUS+DMSO组明显降低(P<0.05)。与对照组比较,LIPUS组和LIPUS+DMSO组的ALP染色和茜素红染色显示成骨分化明显增加,Trpm7、OPN和Runx2的蛋白表达也明显增强。与LIPUS+DMSO组比较,LIPUS+2-APB组的ALP染色和茜素红染色显示成骨分化明显下降,Trpm7、OPN和Runx2的蛋白表达也明显降低。结论 LIPUS促进BMSCs的成骨分化,并部分通过Trpm7发挥作用。
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关键词
低强度聚焦超声
骨髓间充质干细胞
瞬时受体电位M7
成骨分化
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题名
低强度聚焦超声通过瞬时受体电位M7促进骨髓间充质干细胞成骨分化
1
作者
姚欢
郑妍
李娅莎
赵丽
杨珂
机构
重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室、重庆市干细胞治疗工程技术研究中心
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第16期1469-1475,共7页
基金
重庆市自然科学基金一般项目(CSTC2017jcyjA X0171,CSTC2014jcyjA 10090)
文摘
目的探讨瞬时受体电位M7(transient receptor potential melastatin 7,Trpm7)在低强度聚焦超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)促进骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化中的作用及其机制。方法分离培养小鼠BMSCs,流式细胞检测其特异性表面标志,茜素红和油红O染色检测其分化能力。碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性读数筛选LIPUS作用时间。ALP和茜素红染色观察LIPUS处理后促进成骨分化的能力,q PCR检测Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA水平表达的变化,并检测LIPUS处理后24、48、72 h Trpm7 mRNA水平表达的差异。进一步分为对照组(LIPUS未处理组)、LIPUS处理组、LIPUS+二甲基亚砜(DMSO)组和LIPUS+Trpm7抑制剂2-氨乙基硼酸二苯酯(2-APB)组,ALP活性读数、ALP染色和茜素红染色评价成骨分化能力,Western blot检测Trpm7和OPN、Runx2的蛋白表达。结果体外培养获得BMSCs,与未处理组比较,LIPUS作用2 min组细胞ALP活性读数升高最为明显,LIPUS处理后细胞的ALP染色和茜素红染色明显增强,成骨分化相关基因OPN、OCN、RUNX2 mRNA表达明显增加(P<0.05),LIPUS处理1、2、3 d后Trpm7 mRNA表达显著增加(P<0.05)。LIPUS+2-APB组的ALP活性较LIPUS组和LIPUS+DMSO组明显降低(P<0.05)。与对照组比较,LIPUS组和LIPUS+DMSO组的ALP染色和茜素红染色显示成骨分化明显增加,Trpm7、OPN和Runx2的蛋白表达也明显增强。与LIPUS+DMSO组比较,LIPUS+2-APB组的ALP染色和茜素红染色显示成骨分化明显下降,Trpm7、OPN和Runx2的蛋白表达也明显降低。结论 LIPUS促进BMSCs的成骨分化,并部分通过Trpm7发挥作用。
关键词
低强度聚焦超声
骨髓间充质干细胞
瞬时受体电位M7
成骨分化
Keywords
low-intensity focused ultrasound
bone marrow mesenchymal stem cells
Trpm7
osteogenesis
分类号
R312 [医药卫生—基础医学]
R322.71 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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作者
出处
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1
低强度聚焦超声通过瞬时受体电位M7促进骨髓间充质干细胞成骨分化
姚欢
郑妍
李娅莎
赵丽
杨珂
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
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