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慢性乙型肝炎患者PBMCFas表达和凋亡的检测及意义 被引量:17
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作者 李玲 顾长海 +2 位作者 李欣 颜杰 刘俊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期713-715,共3页
目的 探讨活化诱导细胞死亡 (Activation inducedcelldealth ,AICD)在乙型肝炎发病机制中的意义。方法 分离 30例乙型肝炎患者和 1 2例健康献血员外周血单个核细胞 (PBMC) ,利用间接免疫荧光染色法 ,通过流式细胞仪检测PBMCFas的表达 ... 目的 探讨活化诱导细胞死亡 (Activation inducedcelldealth ,AICD)在乙型肝炎发病机制中的意义。方法 分离 30例乙型肝炎患者和 1 2例健康献血员外周血单个核细胞 (PBMC) ,利用间接免疫荧光染色法 ,通过流式细胞仪检测PBMCFas的表达 ;分离2 0例乙型肝炎病人和 1 0例健康献血员PBMC ,在PHA P的刺激下短期培养 ,采用PI染色法 ,经流式细胞仪检测PBMC的凋亡。结果慢性乙型肝炎组PBMCFas表达率 [( 53.31± 1 4 .53) % ]高于正常对照组PBMCFas表达率 [( 39.32± 1 1 .2 8) % ,P <0 .0 5]和慢性重型乙型肝炎组PBMCFas表达率 [( 37.93± 1 5.89) % ,P <0 .0 1 ]。慢性乙型肝炎组PBMC凋亡率 [( 30 .57± 1 3.4 3) % ]高于正常对照组PBMC凋亡率 [( 1 1 .4 5± 5.2 7) % ,P <0 .0 1 ]和慢性重型乙型肝炎组PBMC凋亡率 [( 1 3.59± 6 .4 4) % ,P <0 .0 1 ];HBeAg( + )组PBMC凋亡率高于正常对照组PBMC凋亡率 [( 2 9.50± 1 2 .2 5) %vs( 1 1 .4 5± 5.2 7) % ,P <0 .0 1 ]。结论 HBV感染能诱导慢性乙型肝炎外周血淋巴细胞Fas表达增加 ,通过Fas/FasL途径使Fas+淋巴细胞发生AICD ,这可能是形成HBV慢性感染免疫耐受的一个重要机制。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 活化诱导 细胞凋亡 FAS 免疫耐受
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卵清蛋白激发对肠道菌群失调小鼠T细胞功能亚群的影响 被引量:16
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作者 孙大庆 杨锡强 +3 位作者 王莉佳 李欣 刘恩梅 赵晓东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期473-476,共4页
目的:探讨卵清蛋白(OVA)雾化吸入激发对抗生素致肠道菌群失调小鼠肺组织及脾脏中T淋巴细胞功能亚群的影响。方法:32只BALB/c小鼠随机分为4组:菌群失调组、菌群失调加激发组、激发组、对照组。于实验第14天采用流式细胞术(FCM)检测肺组... 目的:探讨卵清蛋白(OVA)雾化吸入激发对抗生素致肠道菌群失调小鼠肺组织及脾脏中T淋巴细胞功能亚群的影响。方法:32只BALB/c小鼠随机分为4组:菌群失调组、菌群失调加激发组、激发组、对照组。于实验第14天采用流式细胞术(FCM)检测肺组织及脾脏中Th1、Th2、Th17以及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Tregs)水平。结果:菌群失调加激发组小鼠肺组织中Th2、Th17细胞水平增高,脾脏中Th1、Th2、Th17均与对照组无差异;菌群失调组及菌群失调加激发组小鼠肺组织及脾脏中Tregs水平均降低。结论:抗生素致肠道菌群失调小鼠经卵清蛋白雾化吸入激发后,可产生Th2、Th17细胞优势的变应性气道反应,与Tregs调节功能不足可能有关。 展开更多
关键词 卵清蛋白 肠道菌群 气道变应性 T淋巴细胞
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卵清蛋白雾化吸入诱导肠道菌群失调小鼠肺部过敏反应的发生 被引量:17
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作者 孙大庆 杨锡强 +1 位作者 刘玮 李欣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期281-284,共4页
目的:在抗生素所致肠道菌群失调小鼠模型上采用卵清蛋白(OVA)雾化吸入激发,探讨气道变应性反应与肠道菌群失调的关系。方法:112只BALB/c小鼠分为6组:菌群失调Ⅰ组、对照Ⅰ组、菌群失调Ⅱ组、菌群失调加激发组、激发组、对照Ⅱ组。前2组... 目的:在抗生素所致肠道菌群失调小鼠模型上采用卵清蛋白(OVA)雾化吸入激发,探讨气道变应性反应与肠道菌群失调的关系。方法:112只BALB/c小鼠分为6组:菌群失调Ⅰ组、对照Ⅰ组、菌群失调Ⅱ组、菌群失调加激发组、激发组、对照Ⅱ组。前2组和后4组分别于第6天和第14天时取盲肠内容物做细菌培养计数,后4组同时行支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类计数、BALF和血清中OVA特异性IgE(OVA-sIgE)检测以及肺部病理观察;采用流式细胞术检测肺组织中Th1以及Th2细胞水平。结果:应用抗生素的小鼠出现肠道菌群失调,菌群失调加激发组小鼠肺部出现以嗜酸粒细胞和淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,肺部黏液分泌明显增高,BALF中细胞总数、淋巴细胞、嗜酸粒细胞和中性粒细胞增加,OVA-sIgE水平显著增高,肺部Th2细胞水平增高,Th1细胞与对照组无差异。结论:抗生素致肠道菌群失调小鼠经过OVA雾化吸入后,可产生Th2细胞优势的变应性气道反应,提示抗生素所致肠道菌群失调是诱发哮喘等变应性疾病的危险因素之一。 展开更多
关键词 卵清蛋白 肠道菌群 气道变应性
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成人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的体外研究 被引量:11
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作者 李云玲 陈笛 +4 位作者 王璐 江和碧 卓本慧 梁熙 李廷玉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期941-944,共4页
目的 探索成人骨髓间充质干细胞在体外定向分化为神经元样细胞的条件。方法 采用Ficoll paque( 1 0 77g/ml)分离液密度梯度离心从人的骨髓分离出骨髓间充质干细胞 ,体外扩增到第 10代 ,选择 4组不同组合的神经分化诱导条件 ,分别诱导... 目的 探索成人骨髓间充质干细胞在体外定向分化为神经元样细胞的条件。方法 采用Ficoll paque( 1 0 77g/ml)分离液密度梯度离心从人的骨髓分离出骨髓间充质干细胞 ,体外扩增到第 10代 ,选择 4组不同组合的神经分化诱导条件 ,分别诱导骨髓间充质干细胞向神经元细胞分化 ,通过免疫细胞化学鉴定诱导后细胞神经元烯醇化酶、神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白的表达情况。结果 各组诱导剂诱导后 ,骨髓间充质干细胞分化为具有典型的神经元形态的细胞 ,免疫细胞化学显示、NF M呈强阳性反应 ,NSE表达强度提高 ,在最佳的分化条件下 ,即加入bFGF、ATRA、BME、BHA、DMSO诱导条件下 ,大约 80 %细胞表达NF M ,86%的细胞为NSE强阳性。结论 成人MSCs在体外可定向诱导分化为神经元样细胞 。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 神经分化
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HBV阳性血清诱导人外周血单个核细胞凋亡的检测及意义 被引量:5
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作者 李玲 顾长海 +1 位作者 李欣 刘俊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期267-268,共2页
目的研究乙型肝炎病毒(HBV)对外周血单个核淋巴细胞(PBMC)凋亡的作用。方法利用10名健康献血员外周血分离PBMC,分为加HBV阳性血清组和加健康人血清对照组,经培养72h后,采用PI染色法在流式细胞仪上检测细胞的凋亡情况。结果加HBV阳性血... 目的研究乙型肝炎病毒(HBV)对外周血单个核淋巴细胞(PBMC)凋亡的作用。方法利用10名健康献血员外周血分离PBMC,分为加HBV阳性血清组和加健康人血清对照组,经培养72h后,采用PI染色法在流式细胞仪上检测细胞的凋亡情况。结果加HBV阳性血清组培养细胞的凋亡率为(39.56±7.03)%,明显高于加健康人血清组培养细胞的凋亡率(27.57±7.78)%,两组间具有非常显著的差异(P∨0.02)。结论HBV可能具有诱导PBMC凋亡的能力,这可能是形成HBV慢性感染免疫耐受的一个重要机制。 展开更多
关键词 外周血单个核细胞 乙型肝炎病毒 细胞凋亡
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骨髓间充质干细胞在C6脑胶质瘤细胞微环境中瘤性转化的生物学分析 被引量:3
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作者 张春敏 朱静 +1 位作者 燕莎 崔建邦 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期591-596,共6页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在C6脑胶质瘤细胞微环境中是否发生了生物学特性的改变。方法:全骨髓贴壁筛选法分离培养SD大鼠BMSCs,免疫荧光(immunofluorescence,IF)法检测BMSCs表面标... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在C6脑胶质瘤细胞微环境中是否发生了生物学特性的改变。方法:全骨髓贴壁筛选法分离培养SD大鼠BMSCs,免疫荧光(immunofluorescence,IF)法检测BMSCs表面标志分子CD90+、CD105+、CD45-;活细胞荧光染料CM-Dil标记BMSCs(CM-Dil+BMSCs),流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测标记效率,台盼蓝染色法连续监测BMSCs死亡率;CM-Dil+BMSCs与C6脑胶质瘤细胞直接接触共培养为直接共培养组,BMSCs与C6脑胶质瘤细胞非接触共培养为间接共培养组,阳性对照组为C6脑胶质瘤细胞单独培养,阴性对照组为BMSCs单独培养,培养7 d后,IF法检测各组酸性胶质纤维蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、CD90、CD105表达情况;FCM分选实验组CM-dil+BMSCs和C6脑胶质瘤细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各组GFAP、PTEN、Bcl-xl、CyclinD1、CD90、CD105基因的表达。结果:①培养至第3代的BMSCs 90%以上表达CD90、CD105且不表达CD45;②IF结果显示直接共培养组、间接共培养组BMSCs细胞表达GFAP水平较阴性对照组BMSCs均增高。③RT-qPCR结果显示直接共培养组、间接共培养组BMSCs细胞GFAP、PTEN、Bcl-xl、CyclinD1基因表达水平较阴性对照组BMSCs明显增高(P<0.05),且直接共培养组与间接共培养组比较无明显差异(P>0.05);同时,直接共培养组、间接共培养组BMSCs的CD90、CD105基因表达水平较阴性对照组BMSCs显著降低(P<0.05)。结论:BMSCs在C6脑胶质瘤细胞微环境中存在潜在瘤性转化的倾向。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 酸性胶质纤维蛋白 C6脑胶质瘤细胞
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