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抗血吸虫药物吡喹酮的新合成路线 被引量:7
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作者 程训官 郑小红 +3 位作者 夏铸 张昕宇 王宇 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1208-1210,共3页
目的:构建一条绿色、环保且能适合工业化生产抗血吸虫药物吡喹酮的新合成路线。方法:以苯乙胺为原料,用氯乙酰氯酰化,再用邻苯二甲酰亚胺钾氨基化反应,在P2O5作用下经Bischler-Napieralski环合反应制得N-[(1-亚甲基)-3,4-二氢异喹啉]邻... 目的:构建一条绿色、环保且能适合工业化生产抗血吸虫药物吡喹酮的新合成路线。方法:以苯乙胺为原料,用氯乙酰氯酰化,再用邻苯二甲酰亚胺钾氨基化反应,在P2O5作用下经Bischler-Napieralski环合反应制得N-[(1-亚甲基)-3,4-二氢异喹啉]邻苯二甲酰亚胺,经肼解和还原得到1-氨甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐,经环己烷甲酰化、氯乙酰氯酰化和环合得目标化合物。结果:该合成路线的总收率可达32.8%,为原总收率的2.13倍。结论:该合成工艺路线操作简便,原料廉价易得,条件温和,绿色环保,收率较高,具有一定的工业化生产前景。 展开更多
关键词 吡喹酮 合成 环合 四氢异喹啉 血吸虫病
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蒙脱石作为药用辅料及药物载体的研究进展 被引量:3
2
作者 邓春兰 于明安 +1 位作者 王馨 廖一兰 《硅酸盐通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期414-418,共5页
本文介绍了蒙脱石作为药用辅料在助悬剂、崩解剂、粘合剂、稳定剂、吸附剂、抗菌剂等方面的研究现状,综述了蒙脱石作为药物载体应用于医药领域的国内外最新研究进展。
关键词 蒙脱石 药用辅料 药物载体
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单胺氧化酶抑制药物体外筛选模型的建立 被引量:1
3
作者 张万萍 郭红梅 +4 位作者 李文军 朱必敏 鲁振浩 祁俊生 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期570-574,共5页
目的:构建一种能用于治疗神经退行性变疾病单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)抑制药物的体外筛选模型。方法:采用紫外分光光度方法,以苄胺或5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)分别作为MAO-B或MAO-A的反应底物,测定其活性,并对MAO浓... 目的:构建一种能用于治疗神经退行性变疾病单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)抑制药物的体外筛选模型。方法:采用紫外分光光度方法,以苄胺或5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)分别作为MAO-B或MAO-A的反应底物,测定其活性,并对MAO浓度、底物浓度、缓冲液浓度、pH值、反应时间和温度等进行优化。结果:研究确定的模型反应体系条件为:在温度37℃、酶预孵育时间20 min和反应时间60 min下,测定MAO-B活性最佳条件为100 mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 7.6),MAO和底物苄胺的终浓度分别为0.15 mg/ml和2.00 mmol/L;测定MAO-A活性最佳条件为100 mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 7.4),MAO和底物5-HT的终浓度分别为0.40 mg/ml和5.00 mmol/L。结论:建立了一种MAO抑制药物体外筛选的模型,该模型具有成本低、操作简便等特点,适合于大规模筛选MAO-B和MAO-A的抑制药物。 展开更多
关键词 单胺氧化酶 单胺氧化酶抑制药物 体外筛选模型 神经退行性变 抑制作用
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基于脂代谢靶点蛋白hPPARγ-LBD的抗肿瘤药物筛选模型的研究
4
作者 段雯 李伟 +5 位作者 靳红卫 夏铸 程训官 张昕宇 郑小红 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期805-809,共5页
目的:建立一种以脂代谢靶点蛋白hPPARγ-LBD重组蛋白进行抗肿瘤药物筛选的方法。方法:采用pReceiver-B01-PPARγ-LBD表达质粒转至E.coliBL_(21)(DE_3)细胞,进行表达与纯化得到可溶性靶点蛋白hPPARγ-LBD重组蛋白,以罗格列酮为hPPARγ-LB... 目的:建立一种以脂代谢靶点蛋白hPPARγ-LBD重组蛋白进行抗肿瘤药物筛选的方法。方法:采用pReceiver-B01-PPARγ-LBD表达质粒转至E.coliBL_(21)(DE_3)细胞,进行表达与纯化得到可溶性靶点蛋白hPPARγ-LBD重组蛋白,以罗格列酮为hPPARγ-LBD的阳性配体,以GW9662作拮抗剂,采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)测定hPPARγ-LBD重组蛋白与配体药物的结合活性。结果:在优化条件(16℃、0.6mmol/LIPTG、诱导20h)下,能可溶性表达hPPARγ-LBD重组蛋白;经镍亲和色谱纯化后,以每升LB培养基计可获得41mg、纯度为95%的hPPARγ-LBD重组蛋白;该重组蛋白与罗格列酮特异性结合率约65%,K_d值为625nmol/L;与德氮吡格(Tetrazanbigen,TNBG)特异性结合率约60%,K_d值为1000nmol/L。结论:本文基于脂代谢靶点蛋白hPPARγ-LBD建立了抗肿瘤药物体外筛选模型的方法,该方法快速、稳定、安全及简便,能应用于抗肿瘤药物的筛选。 展开更多
关键词 脂代谢 靶点蛋白 hPPARγ-LBD 抗肿瘤药物 药物筛选模型 罗格列酮 德氮吡格
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IL-2靶向脂质体的处方筛选及药物含量的测定
5
作者 吴镁春 朱莉 王驰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期591-593,共3页
目的:筛选IL-2靶向脂质体的最佳处方,并对5-氟尿苷(5-fluorouridine,5-FUR)前药进行含量测定。方法:应用正交实验设计选择最佳处方配比;采用紫外分光光度法测定5-FUR前药的含量,检测波长为267nm。结果:筛选最佳处方:药脂比为1:1... 目的:筛选IL-2靶向脂质体的最佳处方,并对5-氟尿苷(5-fluorouridine,5-FUR)前药进行含量测定。方法:应用正交实验设计选择最佳处方配比;采用紫外分光光度法测定5-FUR前药的含量,检测波长为267nm。结果:筛选最佳处方:药脂比为1:10、磷脂与胆固醇的比例为3:1。5-FUP前药对照品浓度在0.002-0.02mg/ml的范围内与吸收度线性关系良好,回归方程为y=16.357x+0.007,r=0.9997(n=3),平均加样回收率为97.09%,RSD=2.05%(n=3)。样品中5-FUR前药含量为18.84-18.91μg/ml。结论:该处方设计合理,紫外分光光度法操作简便、稳定性好、结果可靠,可作为IL-2靶向脂质体中5-FUR前药含量测定方法。 展开更多
关键词 5-FUR前药 正交设计 紫外分光光度法 含量测定
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单胺氧化酶与抑制药物
6
作者 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期561-569,共9页
本文就单胺、单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)与抑制药物的分类和作用进行阐述,并着重就MAO与疾病的关系,MAO-A和MAO-B抑制药物进行总结与讨论。
关键词 单胺氧化酶 单胺氧化酶抑制药物 抑郁症 帕金森病 单胺
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抗肝纤维化姜黄素脂质体的制备及初步稳定性考察 被引量:6
7
作者 赵怡 孟路华 +1 位作者 潘黎军 王驰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期582-585,共4页
目的:制备姜黄素(Curcumin,Cur)脂质体并考察其包封率及稳定性。方法:采用逆相蒸发法制备Cur脂质体,葡聚糖凝胶柱层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;正交设计优选制备处方;离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性。结... 目的:制备姜黄素(Curcumin,Cur)脂质体并考察其包封率及稳定性。方法:采用逆相蒸发法制备Cur脂质体,葡聚糖凝胶柱层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;正交设计优选制备处方;离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性。结果:所得优化处方为磷脂与药物的重量比60:1,磷脂与胆固醇的重量比4:1,pH6.5的磷酸盐缓冲液水合递质,超声时间为5min。以优化处方制得的脂质体平均包封率达95.06%。结论:选用逆相蒸发法优化Cur脂质体处方合理,工艺简便可行,包封率高,稳定性好。 展开更多
关键词 姜黄素脂质体 逆相蒸发法 正交设计 包封率 稳定性
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雷沙吉兰对小鼠肝和脑组织中单胺氧化酶活性的影响 被引量:4
8
作者 彭杨 张万萍 +4 位作者 程鹏 曾庆东 李文军 鲁振浩 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期577-579,共3页
目的:考察腹腔注射雷沙吉兰对小鼠中肝和脑单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性的抑制作用。方法:采用紫外分光光度法,分别测定低温差速离心法提取小鼠肝和脑组织中的MAO-A和MAO-B活性。结果:雷沙吉兰对MAO-B活性的抑制作用明显强于M... 目的:考察腹腔注射雷沙吉兰对小鼠中肝和脑单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性的抑制作用。方法:采用紫外分光光度法,分别测定低温差速离心法提取小鼠肝和脑组织中的MAO-A和MAO-B活性。结果:雷沙吉兰对MAO-B活性的抑制作用明显强于MAO-A活性;在脑中抑制作用显著比在肝脏中强。结论:雷沙吉兰对小鼠脑内MAO-B活性具有较高的选择性抑制作用。 展开更多
关键词 雷沙吉兰 单胺氧化酶 小鼠 酶活性 抑制作用
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吸烟对男性精液质量、血睾酮水平及精浆左卡尼汀水平影响的研究 被引量:6
9
作者 刘嫱 房磊臣 +1 位作者 苟欣 黄元华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第6期640-642,共3页
目的:研究吸烟对男性精液质量、睾酮水平及精浆左卡尼汀水平的影响。方法:对有致孕史的男性,根据吸烟量和烟龄分为A、B、C 3组,检测精液参数(精液量、精子密度、精子前向运动百分率)、睾酮水平及精浆左卡尼汀水平。结果:精子密度、精子... 目的:研究吸烟对男性精液质量、睾酮水平及精浆左卡尼汀水平的影响。方法:对有致孕史的男性,根据吸烟量和烟龄分为A、B、C 3组,检测精液参数(精液量、精子密度、精子前向运动百分率)、睾酮水平及精浆左卡尼汀水平。结果:精子密度、精子前向运动百分率A、C两组间有显著性差异;精子前向运动率B、C两组间有显著性差异;睾酮水平A、B组无明显差异,A、C组有显著性差异;左卡尼汀水平A、B两组间有显著性差异,A、C两组间差异非常显著(P<0.01)。结论:长期大量吸烟可抑制睾丸的睾酮合成、降低精浆左卡尼汀水平,对精液参数、睾酮合成及精浆生化条件有不良影响,吸烟量越大、时间越长,影响越明显。 展开更多
关键词 吸烟 精液质量 睾酮 左卡尼汀
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利用紫外分光光度法测定罗格列酮游离碱的pKa值 被引量:5
10
作者 吴禄春 甘勇军 +2 位作者 方大树 王施韦 胡湘南 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1546-1548,共3页
目的:建立测定胰岛素增敏剂罗格列酮游离碱电离平衡常数值的方法并测定罗格列酮游离碱的电离平衡常数。方法:将pH1.64、5.76、6.41、6.91、7.14、7.46、10.64的罗格列酮游离碱甲醇溶液分别在200~400 nm处扫描,并在选定波长312、317、32... 目的:建立测定胰岛素增敏剂罗格列酮游离碱电离平衡常数值的方法并测定罗格列酮游离碱的电离平衡常数。方法:将pH1.64、5.76、6.41、6.91、7.14、7.46、10.64的罗格列酮游离碱甲醇溶液分别在200~400 nm处扫描,并在选定波长312、317、326、330 nm处测定其吸收度,得到罗格列酮游离碱电离平衡常数值。结果:罗格列酮游离碱的pKa值为7.09。结论:该方法简便易行,适用于测定酸碱pKa值在2~9之间的药物。 展开更多
关键词 胰岛素增敏剂 罗格列酮 电离平衡常数
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粉防己碱-阿霉素复合脂质体的制备及质量控制评价 被引量:4
11
作者 潘峰 胡春梅 +1 位作者 潘黎军 王驰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期459-462,共4页
目的:制备粉防己碱-阿霉素复合脂质体并对其工艺及质量进行研究与评价,为临床上逆转肿瘤的多药耐药提供新的思路。方法:采用3种不同脂质体制备方法,并以包封率为指标进行处方筛选和工艺优化。结果:确定了硫酸铵梯度法结合pH梯度法制备... 目的:制备粉防己碱-阿霉素复合脂质体并对其工艺及质量进行研究与评价,为临床上逆转肿瘤的多药耐药提供新的思路。方法:采用3种不同脂质体制备方法,并以包封率为指标进行处方筛选和工艺优化。结果:确定了硫酸铵梯度法结合pH梯度法制备复合脂质体的最佳处方最佳处方为:药脂比1∶20,磷脂-胆固醇比例3∶1,外水相pH值为7.6,硫酸铵浓度为250mmol/L。以该处方制备的脂质体DOX的平均包封率为90.77%,TET的平均包封率为80.12%。结论:该处方制备的粉防己碱-阿霉素复合脂质体包封率及外观良好,在低温充氮条件下较稳定,为进一步实验奠定了基础。 展开更多
关键词 粉防己碱 天然活性成分 复合脂质体 硫酸铵pH梯度法
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Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响 被引量:2
12
作者 王洪鹏 王驰 +2 位作者 谭毅 叶琳 陈鸿雁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期157-160,共4页
目的探讨肿瘤转移抑制基因Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响。方法以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,以转染空病毒载... 目的探讨肿瘤转移抑制基因Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响。方法以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,以转染空病毒载体及未转染Kai1的喉癌细胞株为对照,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定Kai1对细胞增殖能力的影响,用RT-PCR技术对转染后的细胞进行检测。结果rAd-Kai1经扩增、纯化后,滴度可达6×1010PFU/ml,当病毒量为30 MOI时,Hep-2细胞的转染率可达90%以上。MTT实验显示转染空腺病毒组与未转染组比较,Hep-2细胞株体外增殖能力无统计学差异,转染Kai1组Hep-2细胞株体外增殖能力明显弱于未转染组(P<0.05),抑制率可达29%。结论肿瘤转移抑制基因Kai1/CD82对喉癌细胞株体外增殖能力具有抑制作用。 展开更多
关键词 KAI1/CD82 HEP-2 喉肿瘤 腺病毒载体 转染 细胞增殖
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复方辣椒碱纳米乳中辣椒碱包封率的测定方法研究 被引量:5
13
作者 姜展 刘新 +1 位作者 张桂平 郭虎 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期195-197,共3页
目的:建立复方辣椒碱(Capsaicin)纳米乳中主药辣椒碱包封率的测定方法。方法:应用葡聚糖凝胶G50微型柱分离获取纳米乳,再采用HPLC测定纳米乳中的辣椒碱含量,换算包封率。结果:葡聚糖凝胶微柱获取纳米乳的平均回收率为97.98%(n=9),纳米... 目的:建立复方辣椒碱(Capsaicin)纳米乳中主药辣椒碱包封率的测定方法。方法:应用葡聚糖凝胶G50微型柱分离获取纳米乳,再采用HPLC测定纳米乳中的辣椒碱含量,换算包封率。结果:葡聚糖凝胶微柱获取纳米乳的平均回收率为97.98%(n=9),纳米乳中辣椒碱含量测定方法显示,在浓度5~80μg/ml浓度范围内,辣椒碱与其峰面积的线性关系良好(r=0.999 4),平均回收率为98.17%(n=9),RSD=1.69%。3批样品中辣椒碱的包封率分别为83.17%、87.74%和85.26%。结论:所建方法能有效地消除其他成分对测定的干扰,可用于复方纳米乳制剂中辣椒碱包封率的测定。 展开更多
关键词 辣椒碱 纳米乳 包封率
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四氢异喹啉类单胺氧化酶抑制剂的合成及其活性研究 被引量:2
14
作者 曾庆东 张万萍 +5 位作者 程鹏 李文军 鲁振浩 彭杨 朱必敏 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期574-576,共3页
目的:设计合成含1,2,3,4-四氢异喹啉结构的单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)抑制剂,并考察其活性。方法:以苯乙胺为原料,经酰化、氨基化、环合和肼解还原反应制得中间体1-氨甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉,再衍生化制得目标化合物,并进行MA... 目的:设计合成含1,2,3,4-四氢异喹啉结构的单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)抑制剂,并考察其活性。方法:以苯乙胺为原料,经酰化、氨基化、环合和肼解还原反应制得中间体1-氨甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉,再衍生化制得目标化合物,并进行MAO的抑制作用研究。结果:合成了新型四氢异喹啉类MAO抑制剂5个,其中新化合物(5,6,7,9)的结构经质谱、红外光谱及氢谱核磁共振分析确证。经体外MAO抑制实验结果显示,5个目标化合物都具有一定的MAO抑制作用,其中化合物5、6、7对MAO-A有较好的选择性抑制作用。结论:设计合成的目标化合物5、6、7具有进一步深入研究的实用价值。 展开更多
关键词 四氢异喹啉 环合 肼解 还原 单胺氧化酶 抑制剂
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促黄体激素释放激素修饰的甲氨蝶呤体内释放研究 被引量:2
15
作者 张雅溶 曾理 +1 位作者 吴学萍 王驰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第22期2386-2389,共4页
目的研究促黄体激素释放激素修饰的甲氨蝶呤(LHRH-MTX)在模型动物体内释放MTX情况。方法建立HPLC的分析方法,经尾静脉注射给药,测定荷瘤裸鼠血液和组织中的药物浓度;与MTX制剂比较,评价LHRH-MTX在体内释放MTX情况。结果建立的HPLC分析... 目的研究促黄体激素释放激素修饰的甲氨蝶呤(LHRH-MTX)在模型动物体内释放MTX情况。方法建立HPLC的分析方法,经尾静脉注射给药,测定荷瘤裸鼠血液和组织中的药物浓度;与MTX制剂比较,评价LHRH-MTX在体内释放MTX情况。结果建立的HPLC分析方法回收率高于85%,日间和日内精密度(RSD)均小于10%,符合生物样品分析要求;静脉注射给药后,经统计学分析,与MTX制剂相比,LHRH-MTX释放的MTX在血浆、肝脏、肾脏的浓度有明显下降(P<0.05),而在肿瘤组织有明显提高(P<0.05)。结论所建立的HPLC用于LHRH-MTX体内释放研究结果良好,LHRH-MTX释药后MTX在体内的组织分布有明显的改变,在肿瘤部位有明显的浓集。 展开更多
关键词 甲氨蝶呤 促黄体激素释放激素 高效液相色谱法 体内释放
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人肝癌细胞株QGY-7701蛋白质组学研究技术及二维电泳图谱的建立 被引量:2
16
作者 袁拥华 李伟 +4 位作者 杨晓兰 李龙江 汤为学 黄开顺 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第12期1233-1236,共4页
目的:建立人肝癌细胞株QGY-7701蛋白质组学研究技术。方法:利用两种不同的裂解液提取细胞蛋白,进行双向电泳,经PDQuest软件分析与比较后,挑选匹配良好的10个蛋白点,进行基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的鉴定。结果:... 目的:建立人肝癌细胞株QGY-7701蛋白质组学研究技术。方法:利用两种不同的裂解液提取细胞蛋白,进行双向电泳,经PDQuest软件分析与比较后,挑选匹配良好的10个蛋白点,进行基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)的鉴定。结果:建立了稳定的人肝癌细胞株QGY-7701的双向电泳图谱,裂解液Ⅱ比裂解液Ⅰ提取的蛋白质量多25%,2-DE胶上蛋白点数多32%,从10个候选蛋向中鉴定出9个有意义的蛋白(P<0.05)。结论:初步建立了人肝癌细胞株QGY-7701的蛋白质组学研究技术,为进一步开展药物蛋白质组学研究奠定基础。 展开更多
关键词 人肝癌细胞株QGY-7701 蛋白质组学 双向电泳
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静脉注射德氮吡格在小鼠的组织分布及排泄研究 被引量:1
17
作者 刘嫱 邝少轶 +3 位作者 陈志琼 李伟 郑晓红 余瑜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期142-143,共2页
德氮吡格(Tetrazanbigen,TNBG)是重庆医科大学药学院余瑜教授首创合成的氮杂甾烷类化合物[1]。前期研究表明,TNBG主要干扰肿瘤细胞的脂代谢过程、干扰肝癌细胞株QGY-7701蛋白表达,从而发挥抗肿瘤的作用[2-3]本课题组已经申请了TNB... 德氮吡格(Tetrazanbigen,TNBG)是重庆医科大学药学院余瑜教授首创合成的氮杂甾烷类化合物[1]。前期研究表明,TNBG主要干扰肿瘤细胞的脂代谢过程、干扰肝癌细胞株QGY-7701蛋白表达,从而发挥抗肿瘤的作用[2-3]本课题组已经申请了TNBG专利保护,并已经成功建立了德氮吡格在血浆及肝脏组织中的含量测定方法[4],目前缺少该物质的组织分布研究资料。 展开更多
关键词 德氮吡格 抗肿瘤 药物动力学 组织分布 排泄 高效液相色谱法
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Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖及生长周期的影响 被引量:1
18
作者 王洪鹏 叶琳 +3 位作者 黄闯 王驰 谭毅 陈鸿雁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期519-521,共3页
目的:探讨肿瘤转移抑制基因Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力及生长周期的影响。方法:本研究以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,利... 目的:探讨肿瘤转移抑制基因Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力及生长周期的影响。方法:本研究以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,利用RT-PCR技术对转染效果进行检测,以未转染Kai1的喉癌细胞株为对照组,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术测定转染组细胞株的增殖抑制率和细胞周期。结果:rAd-Kai1经扩增、纯化后,滴度可达1010PFU/ml,当病毒量为30MOI时,对Hep-2细胞的转染率达93%以上。MTT实验显示转染Kai1的Hep-2细胞株体外增殖能力明显弱于对照组(P<0.01),抑制率可达29%。流式细胞术显示与对照组比较,转染组G0/G1期细胞数量增加,S期细胞数量减少,差异有显著性(P<0.05)。结论:通过重组腺病毒介导,成功地将Kai1基因转入喉癌Hep-2细胞株,Kai1对喉癌细胞体外增殖能力具有抑制作用,其机制可能是将Hep-2细胞生长周期阻滞于G0/G1期,提示:Kai1抑癌基因可能通过阻滞肿瘤细胞生长周期实现抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 KAI1/CD82 HEP-2 喉癌 腺病毒 转染 增殖 生长周期
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固相萃取RP-HPLC测定小鼠肝脏组织中的德氮吡格 被引量:1
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作者 刘嫱 陈志琼 +6 位作者 靳红卫 李伟 夏铸 程训官 张昕宇 郑小红 余瑜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1037-1039,共3页
目的:建立小鼠肝脏组织中德氮吡格(Tetrazanbigen)的反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定方法。方法:精密称取小鼠肝脏组织,匀浆后固相萃取(Solid phase extraction,SPE)。液相色谱采用Lichrospher C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-... 目的:建立小鼠肝脏组织中德氮吡格(Tetrazanbigen)的反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定方法。方法:精密称取小鼠肝脏组织,匀浆后固相萃取(Solid phase extraction,SPE)。液相色谱采用Lichrospher C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-0.1%三乙胺水溶液(pH6.5)(体积比90∶10)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长260nm,进样量20μl。结果:实验表明,肝脏组织匀浆液中德氮吡格在2~20μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9993),平均回收率为106.47%。最低定量限为1.0μg/ml。结论:本文建立的固相萃取RP-HPLC方法简便、准确、选择性和重现性好,适合于德氮吡格的肝脏组织浓度检测。 展开更多
关键词 德氮吡格 固相萃取 反相高效液相色谱法 肝脏
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RP-HPLC法测定雷公藤甲素外用凝胶中雷公藤甲素的含量 被引量:6
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作者 李燕 刘新 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第7期862-863,867,共3页
目的:建立RP-HPLC法测定雷公藤外用凝胶中雷公藤甲素的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mmi.d,5μm),检测波长为220nm,流动相为甲醇∶水(46∶54),流速1ml/min,柱温为室温。结果:在10.24~51.20μg/ml间,雷公藤甲素的... 目的:建立RP-HPLC法测定雷公藤外用凝胶中雷公藤甲素的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mmi.d,5μm),检测波长为220nm,流动相为甲醇∶水(46∶54),流速1ml/min,柱温为室温。结果:在10.24~51.20μg/ml间,雷公藤甲素的浓度与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9997),方法回收率为98.3%,RSD为0.23%(n=5)。结论:此方法准确、简便,可用于雷公藤甲素外用凝胶中雷公藤甲素的含量测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 雷公藤甲素 凝胶
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