药物体外转运模型及普萘洛尔异构体转运动力学研究 被引量：6

1

作者 龙潇鸿 邱峰 +1 位作者 徐霞 李惠芝 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第9期1038-1041,共4页

目的:用近年来最具代表性的研究口服药物吸收机制的Caco-2细胞单层模型,研究盐酸普萘洛尔异构体的吸收及其吸收机制。方法:建立Caco-2细胞单层模型,研究不同浓度不同时间点该药物异构体的转运情况,通过柱前衍生化的RP—HPLC法检测盐酸... 目的:用近年来最具代表性的研究口服药物吸收机制的Caco-2细胞单层模型,研究盐酸普萘洛尔异构体的吸收及其吸收机制。方法:建立Caco-2细胞单层模型,研究不同浓度不同时间点该药物异构体的转运情况,通过柱前衍生化的RP—HPLC法检测盐酸普萘洛尔的异构体。结果:盐酸普萘洛尔吸收完全,主要为被动吸收,其异构体在Caco-2细胞模型上吸收无手性选择性。结论:本文建立了Caco-2细胞模型,并进行了完整性评价,表明Caco-2细胞模型完整性良好,将其用于手性药物盐酸普萘洛尔的吸收转运实验。同时还建立了柱前衍生化的RP-HPLC法,可以在20min内分离测定盐酸普萘洛尔异构体,方法操作简便、精密度好、结果准确可靠。 展开更多

关键词 手性衍生化 HPLC 盐酸普萘洛尔 CACO-2细胞 GITC 表观通透系数 对映选择性

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酮洛芬对映体的分离、分析方法的研究及其应用 被引量：5

2

作者 李小梅 周凤 +1 位作者 赵华 靳红卫 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期586-590,共5页

目的：考察酮洛芬（Ketoprofen,KT）对映体在多糖衍生物手性固定相的色谱行为,建立酮洛芬对映体的分离分析方法,并用于血浆样品中酮洛芬对映异构体的测定。方法：色谱柱Chiralpak AD（250mm×4.6mm,10μm,Daicel Chemicals）,流动... 目的：考察酮洛芬（Ketoprofen,KT）对映体在多糖衍生物手性固定相的色谱行为,建立酮洛芬对映体的分离分析方法,并用于血浆样品中酮洛芬对映异构体的测定。方法：色谱柱Chiralpak AD（250mm×4.6mm,10μm,Daicel Chemicals）,流动相组成为正己烷：异丙醇：TFA（80：20：0.02）,检测波长254nm,流速1.0ml/min,柱温为25℃。结果：酮洛芬对映体在10min内实现分离,分离度大于2.0,对映体R和S分别在血药浓度0.1-10μg/ml范围内线性关系良好R-（-）（r=0.9998）,S-（＋）（r=0.9996）,单一对映体的最低检测限为2ng（S/N=3）。结论：建立了用ChiralpakAD柱分离分析酮洛芬对映异构体的方法,可用于单一对映异构体的光学纯度检测及药理学研究。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 酮洛芬 对映体 手性分离

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牛蒡子苷自微乳在体肠吸收分析方法学研究 被引量：1

3

作者 赵德华 卢来春 +2 位作者 管海燕 张卿 尚京川 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期2681-2685,共5页

目的建立HPLC法测定牛蒡子苷自微乳中牛蒡子苷含量并考察牛蒡子苷自微乳在大鼠小肠吸收情况。方法采用自微乳化释药系统（SMEDDS）技术制备牛蒡子苷自微乳，并运用大鼠在体灌流的方法建立牛蒡子苷大鼠肠吸收模型，以流动相乙腈-水（35... 目的建立HPLC法测定牛蒡子苷自微乳中牛蒡子苷含量并考察牛蒡子苷自微乳在大鼠小肠吸收情况。方法采用自微乳化释药系统（SMEDDS）技术制备牛蒡子苷自微乳，并运用大鼠在体灌流的方法建立牛蒡子苷大鼠肠吸收模型，以流动相乙腈-水（35：65），流速1mL／min，检测波长280nm为色谱条件，测定自微乳中牛蒡子苷含量及肠循环液中牛蒡子苷、苷元含量，并考察药物的吸收。结果牛蒡子苷含量测定方法在2—200μg／mL浓度范围内，苷元含量测定方法在1～100ng／mL浓度范围内，均具有良好线性，回收率均在95％～105％范围内，日内及日间RSD均小于5％。测得牛蒡子苷自微乳载药量为（40．090±0．001）mg／g；在体肠吸收结果表明在10～50μg／mL范围内，药物单位时间吸收百分率小于25％；牛蒡子苷自微乳在小肠有一定的吸收，但在30min后开始水解为牛蒡子苷元。结论所建HPLC法专属性强，准确度及精密度能够满足牛蒡子苷自微乳以及在体肠吸收液中牛蒡子苷、苷元含量的测定。 展开更多

关键词 HPLC 牛蒡子苷自微乳 在体肠吸收 含量测定

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反相高效液相色谱法分析肝癌血清蛋白质组

4

作者 罗婵 黄丽华 母昭德 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期894-896,共3页

目的:建立肝癌血清蛋白质组RP-HPLC技术筛选肝癌血清差异蛋白质。方法:8例肝癌和20例正常组血清样品采用Agilent高丰度蛋白质分离系统洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后,样品采用色谱柱ZORBAX 300SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)分离,以A=0.1%... 目的:建立肝癌血清蛋白质组RP-HPLC技术筛选肝癌血清差异蛋白质。方法:8例肝癌和20例正常组血清样品采用Agilent高丰度蛋白质分离系统洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后,样品采用色谱柱ZORBAX 300SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)分离,以A=0.1%三氟乙酸溶液,B=0.09%三氟乙酸乙腈为流动相梯度洗脱,在波长280nm处检测。结果:在肝癌血清和健康志愿者血清的RP-HPLC图谱中存在一组疏水性较强的差异蛋白质。结论:建立的血清蛋白质RP-HPLC技术可以发现肝癌发生发展过程中血清蛋白表达谱质的变化,从而为肝癌的早期诊断及治疗打下基础。 展开更多

关键词 血清蛋白质组学 蛋白质组 RP-HPLC

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齐墩果酸对肝癌细胞Hep3B增殖和凋亡的作用研究 被引量：14

5

作者 黄开顺 朱链链 +4 位作者 刘丹 邹黎 雷琪 葛蹼 陈志琼 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期531-534,共4页

目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞株Hep3B增殖和凋亡的影响及其与细胞内钙离子浓度{[Ca2+]i}关系。方法将浓度分别为40、80、100μg/ml齐墩果酸作用于肝癌Hep3B细胞24 h以后,DAPI染色,荧光显微镜观察对照组和处理组细胞形态变化;以11组不... 目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞株Hep3B增殖和凋亡的影响及其与细胞内钙离子浓度{[Ca2+]i}关系。方法将浓度分别为40、80、100μg/ml齐墩果酸作用于肝癌Hep3B细胞24 h以后,DAPI染色,荧光显微镜观察对照组和处理组细胞形态变化;以11组不同浓度齐墩果酸(5～400μg/ml)作用Hep3B细胞24 h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Hep3B细胞增殖情况;分别以不同浓度齐墩果酸(80、100、150μg/ml)作用Hep3B细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞周期变化、细胞凋亡率、细胞内钙离子浓度;对钙离子荧光强度与细胞凋亡率进行相关性分析。结果各处理组Hep3B细胞出现凋亡;不同浓度齐墩果酸能够抑制肝癌细胞Hep3B增殖,且在5～100μg/ml范围内呈剂量依赖性,药物作用细胞24、48 h的IC50分别为86.04、93.29μg/ml;各处理组细胞周期在G2/M期产生阻滞、[Ca2+]i较对照组显著增加(P<0.05),细胞凋亡率和[Ca2+]i增加与药物浓度呈依赖关系;钙离子荧光强度与细胞凋亡率之间存在线形相关性(P<0.05)。结论齐墩果酸能够抑制肝癌Hep3B细胞株增殖,可能通过上调[Ca2+]i诱导其凋亡。 展开更多

关键词 齐墩果酸 肝癌细胞Hep3B 细胞周期 细胞凋亡 细胞内钙离子浓度

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RP-HPLC法同时测定清胰汤颗粒中栀子苷、芍药苷的含量 被引量：9

6

作者 周卿 兑丹华 +1 位作者 代广会 尚京川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第3期268-270,共3页

目的:建立清胰汤颗粒中栀子苷和芍药苷含量的RP-HPLC测定方法。方法:Angilent Eclipse XDB-C18柱(4.5×150mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%磷酸(12∶88,V/V),流速:1ml/min,检测波长:230nm,柱温:30℃。结果:栀子苷和芍药苷得到完全分离,... 目的:建立清胰汤颗粒中栀子苷和芍药苷含量的RP-HPLC测定方法。方法:Angilent Eclipse XDB-C18柱(4.5×150mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%磷酸(12∶88,V/V),流速:1ml/min,检测波长:230nm,柱温:30℃。结果:栀子苷和芍药苷得到完全分离,两种成分线性关系良好。栀子苷高、中、低3个浓度平均加样回收率(n=3)分别为106.2%,97.5%,98.1%,RSD分别为0.96%,1.23%,1.62%;芍药苷高、中、低3个浓度平均加样回收率(n=3)分别为101.3%,99.5%,98.2%,RSD分别为1.19%,1.33%,1.58%。结论:本法操作简便,重复性好,结果准确可靠。 展开更多

关键词 RP-HPLC 清胰汤颗粒 栀子苷 芍药苷 含量测定

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高效液相色谱法测定面粉中偶氮甲酰胺的含量 被引量：8

7

作者 向露 易廷辉 +4 位作者 王雅 王俊苏 彭涛 王国民 母昭德 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期533-536,共4页

目的：建立面粉中偶氮甲酰胺（azodicarbonamide，ADc）的高效液相色谱检测方法。方法：样品经丙酮提取，正己烷脱脂，进入高效液相色谱后采用Eclipse XDB—CN柱（250mm×4．6mm，5μm）进行分离，以乙腈-20mm01／L乙酸铵为流动相... 目的：建立面粉中偶氮甲酰胺（azodicarbonamide，ADc）的高效液相色谱检测方法。方法：样品经丙酮提取，正己烷脱脂，进入高效液相色谱后采用Eclipse XDB—CN柱（250mm×4．6mm，5μm）进行分离，以乙腈-20mm01／L乙酸铵为流动相进行梯度洗脱，二极管阵列检测器检测波长为245nm。结果：ADC在1．0—90．0mg/kg范围内线性关系良好，相关系数（r）大于0．99，定量限为5mg／kg（S／N≥10），在5．0、10．0、45．0mg／kg3个添加水平下回收率在68．6％～116．9％之间，相对标准偏差均小于7．0％。结论：建立的面粉中ADC液相色谱方法简单快捷，准确可靠，适用于面粉中ADC的测定。 展开更多

关键词 偶氮甲酰胺 面粉 高效液相色谱法 测定

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蛋白质组学技术筛选肝癌血浆/血清中的差异蛋白质 被引量：8

8

作者 尚京川 易发平 +1 位作者 吴民军 母昭德 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1212-1216,共5页

目的:建立分析肝癌患者血浆/血清中低丰度差异表达蛋白质的双向凝胶电泳(2-DE)方法。方法:以10例肝癌患者血浆、8例肝癌患者血清及8例正常志愿者血浆和血清为研究对象,选用安捷伦免疫亲和色谱Agilent MARS Spin Cartridge去除血浆中6种... 目的:建立分析肝癌患者血浆/血清中低丰度差异表达蛋白质的双向凝胶电泳(2-DE)方法。方法:以10例肝癌患者血浆、8例肝癌患者血清及8例正常志愿者血浆和血清为研究对象,选用安捷伦免疫亲和色谱Agilent MARS Spin Cartridge去除血浆中6种主要高丰度蛋白,2-DE分离血浆/血清低丰度蛋白质,差异蛋白质斑点经酶解后,MALDI-TOF/MS检测的肽指纹谱(Peptide mass fingerprinting,PMF)在NCBInr数据库中进行搜索。结果:10例肝癌患者血浆样品中共鉴定出有20种差异蛋白,其中18种表达上调,2种表达。8例肝癌患者血清样品中共鉴定出23种差异蛋白,其中17种蛋白表达上调,6种蛋白表达下调。在肝癌患者血清和血浆组中共同识别到2种差异蛋白质。结论:血浆组中识别到的指环蛋白34(RING fingerprotein 34),威尔姆肿瘤1-关联蛋白(Wilms' tumor1-associating),CD147抗原,卵泡前体FS(Follistatin precursor,FS)蛋白和血清组中识别到的蛋白激酶NYD-SP9(Protein kinase NYD-SP9),肿瘤坏死因子受体超家族成员19前体(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 19 precurso)r,组蛋白键合蛋白RBBP4(Histone-binding protein RBBP4),FADD蛋白,26S蛋白酶调控亚基P28(26S proteasome regulatory subunitp28),CD82抗原,自体吞噬蛋白5(Autophagyprotein5)等蛋白有望成为(Hepato celluar careinoma,HCC)的特异蛋白。 展开更多

关键词 肝细胞癌 血浆/血清 蛋白质组学 双向电泳 MALDI-TOF/MS

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HPLC法同时测定蓝芩口服液中盐酸小檗碱与黄芩苷的含量 被引量：9

9

作者 胡茂华 钟玲 +1 位作者 黄小玉 尚京川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期210-211,共2页

目的:建立同时测定蓝芩口服液中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Zorbax XDB-C18柱(4.6×150mm,5μm),流动相:甲醇-0.5%磷酸溶液梯度洗脱,比例为0～16.5min,甲醇38%～40%,流速1ml/min;16.8～18min,甲... 目的:建立同时测定蓝芩口服液中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Zorbax XDB-C18柱(4.6×150mm,5μm),流动相:甲醇-0.5%磷酸溶液梯度洗脱,比例为0～16.5min,甲醇38%～40%,流速1ml/min;16.8～18min,甲醇99%,流速1.6ml/min;18.1～22min,甲醇38%,流速1.6ml/min;22.1～23min,甲醇38%,流速1ml/min。检测波长为275nm,柱温30℃。结果:盐酸小檗碱在6.8～65.28μg/ml,黄芩苷在31.2～299.52μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。加样回收率在97.0%～101.3%,RSD小于2.0%。结论:本法操作简便、结果准确、分离效果好,可用于蓝芩口服液中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的测定。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 蓝芩口服液 盐酸小檗碱 黄芩苷

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汉防己碱对肝癌Hep3b细胞生长的双向作用 被引量：5

10

作者 蒋心惠 黄开顺 +2 位作者 滕永真 何百成 周岐新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1281-1284,共4页

目的考察汉防己碱(tetrandrine,Tet)对肝癌Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,结合流式细胞术、MTT和Western blot方法研究Tet(0.33～1.0μg/ml)对肝癌Hep3b及Hep3b/5-Fu细胞生长的作用特点。结果 Tet在0.33～1.0... 目的考察汉防己碱(tetrandrine,Tet)对肝癌Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,结合流式细胞术、MTT和Western blot方法研究Tet(0.33～1.0μg/ml)对肝癌Hep3b及Hep3b/5-Fu细胞生长的作用特点。结果 Tet在0.33～1.0μg/ml时呈浓度依赖性降低Hep3b细胞存活率;0.5和1.0μg/ml显著提高5-Fu对Hep3b细胞的IC50,但降低5-Fu对Hep3b/5-Fu细胞的IC50;0.33μg/ml的Tet明显增加cDDP对Hep3b/5-Fu细胞的IC50,而0.5和1.0μg/ml显著降低cDDP对Hep3b/5-Fu细胞的IC50(P<0.01)。1.0μg/ml的Tet作用48 h后使Hep3b细胞中的P-gp和MRP1表达明显上调(P<0.05)。Tet单用对Hep3b细胞生长有一定抑制作用,高浓度Tet逆转Hep3b/5-Fu细胞对5-Fu耐药和增强cDDP对Hep3b/5-Fu细胞生长的抑制作用,但低浓度分别促进Hep3b细胞和Hep3b/5-FU细胞对5-Fu和cDDP耐药。结论 Tet对Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长呈浓度相关的双向作用,其促进耐药细胞发展的机制至少与提升P-gp和MRP1表达有关。 展开更多

关键词 汉防己碱 肝癌Hep3b细胞 逆转耐药性 促进耐药

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血清蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立 被引量：8

11

作者 母昭德 彭咏波 +1 位作者 易发平 邱宗荫 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期821-823,840,共4页

目的:建立血清蛋白质组双向凝胶电泳(2-DE)技术。方法:对血清蛋白质2-DE的各种条件进行调整、优化。结果:建立了稳定的2-DE技术。结论:已建立的血清蛋白质2-DE技术,将为进一步开展疾病的血清蛋白质组学研究奠定基础。

关键词 血清蛋白质组学 蛋白质组 双向凝胶电泳

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现场快速检测青蒿药材质量的方法研究 被引量：5

12

作者 左巨波 代广会 +2 位作者 杨俊卿 母昭德 尚京川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期206-209,共4页

目的:建立一种简便、快速、准确、灵敏的现场测定青蒿药材中青蒿素含量的检测方法。方法:以索氏提取-高效液相色谱法为对照,采用超声波提取-紫外分光度法进行现场快速检测青蒿药材质量。结果:得出现场快速检测青蒿素的含量关系式为:MRD(... 目的:建立一种简便、快速、准确、灵敏的现场测定青蒿药材中青蒿素含量的检测方法。方法:以索氏提取-高效液相色谱法为对照,采用超声波提取-紫外分光度法进行现场快速检测青蒿药材质量。结果:得出现场快速检测青蒿素的含量关系式为:MRD(mg/g)=(A×V×2.2984)(/As×3)+1.2067。结论:超声波提取-紫外分光度法测定青蒿质量,简化了操作程序,缩短了提取时间,在1.5h内就可完成青蒿素的含量测定,是目前快检速测青蒿药材质量较理想的方法。 展开更多

关键词 青蒿 青蒿素 快速检测 紫外分光光度法 高效液相色谱法

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母乳中多不饱和脂肪酸的RP-HPLC测定方法研究 被引量：4

13

作者 方志娥 陆巍 +3 位作者 曲斐 颜波 易珍奎 尚京川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期699-702,共4页

目的:建立测定母乳中亚油酸(Linoleic acid,LA)、α-亚麻酸(α-Linolenic acid,ALA)、花生四烯酸(Arachidonicacid,AA)、二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)的高效液相色谱法。方法:经液-液萃取并衍生提取母乳中的不饱和脂肪酸后... 目的:建立测定母乳中亚油酸(Linoleic acid,LA)、α-亚麻酸(α-Linolenic acid,ALA)、花生四烯酸(Arachidonicacid,AA)、二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)的高效液相色谱法。方法:经液-液萃取并衍生提取母乳中的不饱和脂肪酸后,采用Agilent SB-C18(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈:水=83:17,流速1.0ml/min,柱温30℃,紫外检测波长254nm进行。结果:ALA在50～350μg/ml、LA在200～1500μg/ml、DHA在10～80μg/ml和AA在20～160μg/ml范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,r均大于0.999;前三者的最低检测限均为0.2μg/ml,后者为0.4μg/ml;高、中、低浓度的平均回收率在92.65%～100.70%以内,精密度RSD≤5.67%。结论:本方法快速、准确且灵敏,满足临床和不同生物样品中多不饱和脂肪酸的含量测定。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 多不饱和脂肪酸 母乳

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HPLC-DAD法同时测定延胡索中4种生物碱的含量 被引量：12

14

作者 周卿 尚京川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1017-1019,共3页

目的:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(high performance liquid chromatography-diode array detection,HPLC-DAD),建立同时测定延胡索药材中4种生物碱含量的方法,并比较不同产地中4种生物碱含量的差异。方法:采用Agilent Eclipse X... 目的:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(high performance liquid chromatography-diode array detection,HPLC-DAD),建立同时测定延胡索药材中4种生物碱含量的方法,并比较不同产地中4种生物碱含量的差异。方法:采用Agilent Eclipse XDBC18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸(pH 6.0)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长分别为巴马亭、紫堇碱270 nm,延胡索乙素和四氢小檗碱280 nm。结果:巴马亭在1~10μg/ml、紫堇碱在10~100μg/ml、延胡索乙素在5~30μg/ml,四氢小檗碱在1~10μg/ml浓度范围内线性关系良好,高、中、低3种浓度平均加样回收率在98.2%~101.3%之间。结论:本方法操作简单、稳定、重复性好,可用于同时测定延胡索中4种生物碱的含量。 展开更多

关键词 相色谱-二极管阵列检测器 延胡索 巴马亭 紫堇碱 延胡索乙素 四氢小檗碱

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应用RP-HPLC/TOF-MS技术识别肝癌血浆差异蛋白质 被引量：3

15

作者 母昭德 尚京川 +2 位作者 彭咏波 黄开顺 邱宗荫 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期828-830,共3页

目的应用RP-HPLC／TOF-MS技术筛选肝癌血浆差异蛋白质。方法9例肝癌和8例正常组血浆采用Agilent高丰度蛋白质分离系统（multiple affinity removal system，MARS）洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后，样品首先采用RP—HPLC法分离分析，然后采... 目的应用RP-HPLC／TOF-MS技术筛选肝癌血浆差异蛋白质。方法9例肝癌和8例正常组血浆采用Agilent高丰度蛋白质分离系统（multiple affinity removal system，MARS）洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后，样品首先采用RP—HPLC法分离分析，然后采用基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定差异蛋白质相对分子质量。结果肝癌血浆和健康志愿者血浆的RP-HPLC图谱中存在3组差异蛋白质，相对分子质量为（15～50）×10^3的蛋白质在健康志愿者中有较高表达，而相对分子质量为（50～90）×10^3的蛋白质在肝癌患者中有较高表达。结论RP—HPLC／TOF-MS技术可以发现肝癌发生发展过程中血浆蛋白表达谱质或量的变化。 展开更多

关键词 肝癌血浆 蛋白质 反相高效液相色谱 基质辅助激光解吸附飞行时间质谱

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兔血浆中顺式阿曲库铵的HPLC-荧光法测定 被引量：4

16

作者 周定利 钟玲 +2 位作者 邱妍川 雷光洪 尚京川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第6期724-725,757,共3页

目的:建立以反相高效液相色谱-荧光法测定兔血浆中顺式阿曲库铵(Cisatracurium)浓度的方法。方法:色谱柱为Agilent Hypersil ODS-C18柱(5μm,4.0mm×125mm),流动相为50mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH3.0)-乙腈(50∶50),荧光检测的激发波... 目的:建立以反相高效液相色谱-荧光法测定兔血浆中顺式阿曲库铵(Cisatracurium)浓度的方法。方法:色谱柱为Agilent Hypersil ODS-C18柱(5μm,4.0mm×125mm),流动相为50mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH3.0)-乙腈(50∶50),荧光检测的激发波长200nm、发射波长320nm。结果:顺式阿曲库铵检测浓度在25～2000ng/ml线性关系良好,r=0.9992。最低检测限为25ng/ml,日内精密度RSD≤2.56%,日间精密度RSD≤3.68%;提取回收率为85.2%～86.1%(n=5),加样回收率为93.4%～98.8%。结论:本方法简便,灵敏度高,重现性好,可满足药代动力学研究的需要。 展开更多

关键词 顺式阿曲库铵 血药浓度 药代动力学 高效液相色谱

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制备高效液相色谱法从茅莓全草中分离悬钩子皂苷R_1 被引量：3

17

作者 任凌燕 李惠芝 +3 位作者 王继生 邱宗荫 周成林 徐霞 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第5期489-492,共4页

目的:分离纯化茅莓全草中的一种皂苷类成分—悬钩子皂苷R1。方法:采用大孔吸附树脂与制备型反相高效液相色谱组合分离技术,将茅莓水提醇沉后的粗制品经大孔吸附树脂柱色谱预分离后,再用100～200目硅胶柱色谱分离,用氯仿-甲醇-水-冰醋酸(... 目的:分离纯化茅莓全草中的一种皂苷类成分—悬钩子皂苷R1。方法:采用大孔吸附树脂与制备型反相高效液相色谱组合分离技术,将茅莓水提醇沉后的粗制品经大孔吸附树脂柱色谱预分离后,再用100～200目硅胶柱色谱分离,用氯仿-甲醇-水-冰醋酸(40:10:1:0.4%)洗脱,收集样品进行制备型RP-HPLC纯化精制。结果:产品经熔点、MS、IR、NMR、UV和HPLC图谱鉴定,并与文献比较,证明为悬钩子皂苷R1,其纯度>98%。结论:该方法较为简单可行,重复性好,采用的溶剂系统价廉易得、沸点低、易于回收;悬钩子皂苷R1产品可用做分析方法的对照品。 展开更多

关键词 茅莓 悬钩子皂苷R1 制备高效液相色谱

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汉防己碱对白血病K562细胞生长的促进耐药作用 被引量：3

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作者 蒋心惠 滕永真 +1 位作者 何百成 周岐新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期1711-1714,共4页

目的考察汉防己碱(Tet)对白血病K562细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,即在37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,培养液为含10%热灭活NBS的完全RPMI1640细胞培养基。待K562细胞与药物作用48 h后,收集并处理细胞,结合MTT和Western ... 目的考察汉防己碱(Tet)对白血病K562细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,即在37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,培养液为含10%热灭活NBS的完全RPMI1640细胞培养基。待K562细胞与药物作用48 h后,收集并处理细胞,结合MTT和Western blot法研究Tet对K562细胞生长的作用特点。结果 Tet在0.33～1.00μg/ml仅使K562及K562/ADM细胞的存活率降低至75%～80%,低浓度Tet(0.33μg/ml)使阿霉素(ADM)和顺铂(cDDP)对K562细胞生长的IC50增加(P<0.01),1.0μg/ml Tet则降低IC50,使ADM对K562/ADM细胞的IC50增加,cDDP的IC50无明显变化。0.33μg/ml Tet有提升2种细胞的P-gp和MRP1表达的作用(P<0.05)。Tet各浓度对LRP表达无明显影响。结论 Tet对K562及K562/ADM细胞生长抑制作用具浓度依耐性,低浓度具加速耐药的作用,其促进耐药细胞发展的机制至少与提升P-gp和MRP1表达有关。 展开更多

关键词 汉防己碱 白血病K562细胞 逆转耐药性

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人血浆中屈昔多巴的测定及药代动力学研究 被引量：3

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作者 钟玲 邱妍川 尚京川 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1112-1114,共3页

目的建立测定人血浆中屈昔多巴的方法,并应用于药代动力学研究。方法12例健康受试者单剂量口服屈昔多巴胶囊200 mg后,血样经高氯酸沉淀蛋白,通过HPLC-荧光检测法测定屈昔多巴的浓度,并运用3P87分析软件计算其药代动力学参数。结果屈昔... 目的建立测定人血浆中屈昔多巴的方法,并应用于药代动力学研究。方法12例健康受试者单剂量口服屈昔多巴胶囊200 mg后,血样经高氯酸沉淀蛋白,通过HPLC-荧光检测法测定屈昔多巴的浓度,并运用3P87分析软件计算其药代动力学参数。结果屈昔多巴测定的线性范围为0.025～2μg/ml,其主要的药动学参数T1/2(108.50±30.78)min,曲线下峰面积(AUC)(185.74±26.41)μg.ml-1.min-1,消除率(CL)(1.08±0.08)ml/min,Tmax(99.90±10.05)min,Cmax(0.74±0.08)μg/ml,服药10 h后屈昔多巴几乎从血液中完全消除。结论本方法灵敏度高,重现性好,操作简便,可用于血浆样品中屈昔多巴的定性定量检测;屈昔多巴在体内的药代动力学过程符合二室模型。 展开更多

关键词 屈昔多巴 血药浓度 药代动力学 高效液相色谱法

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急性心肌梗死大鼠血管紧张素Ⅱ对PAI-1和tPA表达的作用及其机制 被引量：1

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作者 黄妍 李法琦 +4 位作者 李万玉 周平 周希 赵玉伟 邱炯 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期41-46,I0001,共7页

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)经AngⅡ1型受体(AT1R)激活细胞外信号调节激酶(ERK)对纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和组织型纤溶酶原激活物(tPA)活性的调节作用。方法:24只健康SD大鼠,按随机数字表法随机分为假手... 目的:探讨急性心肌梗死(AMI)大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)经AngⅡ1型受体(AT1R)激活细胞外信号调节激酶(ERK)对纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和组织型纤溶酶原激活物(tPA)活性的调节作用。方法:24只健康SD大鼠,按随机数字表法随机分为假手术组(n=8)、AMI组(n=8)和特异性ERK上游激酶抑制剂(PD98059)组(n=8),用结扎左冠状动脉前降支方法制作大鼠AMI模型,建模后14d,制备心肌组织切片观察心肌组织病理学改变;放射免疫法检测大鼠血浆和主动脉组织匀浆AngⅡ含量;发色底物法检测血浆和主动脉孵育液PAI-1和tPA活性;Western blotting分析法检测主动脉组织匀浆磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和ATlR蛋白表达水平。结果:①假手术组心肌纤维排列整齐,核规则;AMI组心肌纤维消失中断,部分心肌细胞空泡变,部分心肌纤维及核溶解消失,肌纤维呈空管状,梗死区为大量纤维结缔组织取代并有炎症细胞浸润;PD98059组AMI的病理改变明显减轻。②与假手术组比较,AMI组血浆和主动脉组织匀浆AngⅡ含量及血浆和主动脉孵育液PAI-1活性均显著增高(P<0.05),但血浆和主动脉孵育液tPA活性及其tPA/PAI-1比值均明显降低(P<0.05)。③与假手术组比较,AMI组主动脉组织匀浆p-ERK1/2和ATlR蛋白表达水平均显著增高(P<0.05或P<0.01)。④各组大鼠血浆和主动脉组织匀浆AngⅡ含量、血浆和主动脉孵育液PAI-1活性及主动脉组织匀浆p-ERK1/2和ATlR蛋白表达水平之间呈正相关关系(r=0.85～0.94,P<0.01)。⑤与AMI组比较,PD98059组血浆和主动脉组织匀浆AngⅡ含量、血浆和主动脉孵育液PAI-1活性、主动脉组织匀浆p-ERK1/2和ATlR蛋白表达均显著降低(P<0.05),但血浆和主动脉孵育液tPA活性及其tPA/PAI-1比值均明显增高(P<0.05)。结论:AMI时AngⅡ具有诱导PAI-1但抑制tPA合成与分泌的作用,其机制可能与AngⅡ经AT1R激活ERK有关。 展开更多

关键词 心肌梗死 细胞外信号调节激酶 血管紧张素Ⅱ 纤溶酶原激活物抑制剂-1 组织型纤溶酶原激活物 大鼠 Sprague-Dawley

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