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特异性ILK-siRNA对膀胱癌EJ细胞侵袭和迁移的影响
被引量：
6
1
作者
朱军
高娟
+2 位作者
李红彦
潘湘阳
陈俊霞
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期360-364,共5页
目的设计合成有效的ILK-siRNA,并检测其对EJ细胞侵袭和迁移的影响。方法构建针对ILK基因mRNA的2个特异性siRNA表达载体pGenSil-1 siRNA1、pGensil-1 siRNA2和1个阴性对照载体pGenSil-1 siRNA3。稳定转染膀胱癌EJ细胞后,通过RT-PCR检测E...
目的设计合成有效的ILK-siRNA,并检测其对EJ细胞侵袭和迁移的影响。方法构建针对ILK基因mRNA的2个特异性siRNA表达载体pGenSil-1 siRNA1、pGensil-1 siRNA2和1个阴性对照载体pGenSil-1 siRNA3。稳定转染膀胱癌EJ细胞后,通过RT-PCR检测EJ细胞中ILK mRNA水平的表达,并通过Western blot和细胞免疫荧光检测ILK蛋白水平的表达;观察EJ细胞形态变化;检测EJ细胞迁移、黏附和侵袭能力及基质金属蛋白酶的变化。结果重组质粒构建成功。干扰组细胞ILK mRNA及蛋白的表达分别较3个对照组(未转染组、转空质粒组和转阴性对照质粒组)比较,呈显著性下降(P<0.05);HE染色结果显示,细胞铺展良好,核质比减小;转染干扰质粒的2个实验组细胞的黏附能力相对于对照组分别增加87%和76%,黏附能力显著升高,迁移及侵袭能力明显降低(P<0.05);与3个对照组比较,转染pGenSil-1 siRNA1与pGensil-1 siRNA2质粒到EJ细胞后,MMP-2及MMP-9的表达水平明显降低(P<0.05)。结论成功构建的干扰质粒能抑制ILK基因及蛋白水平的表达,显著抑制细胞的生长、侵袭及迁移能力。
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关键词
RNA
小分子干扰
膀胱肿瘤
细胞系
肿瘤
侵袭
迁移
整合素连接激酶
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职称材料
题名
特异性ILK-siRNA对膀胱癌EJ细胞侵袭和迁移的影响
被引量：
6
1
作者
朱军
高娟
李红彦
潘湘阳
陈俊霞
机构
重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期360-364,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(81071719)
重庆市自然科学基金(CSTC2009BB5273)~~
文摘
目的设计合成有效的ILK-siRNA,并检测其对EJ细胞侵袭和迁移的影响。方法构建针对ILK基因mRNA的2个特异性siRNA表达载体pGenSil-1 siRNA1、pGensil-1 siRNA2和1个阴性对照载体pGenSil-1 siRNA3。稳定转染膀胱癌EJ细胞后,通过RT-PCR检测EJ细胞中ILK mRNA水平的表达,并通过Western blot和细胞免疫荧光检测ILK蛋白水平的表达;观察EJ细胞形态变化;检测EJ细胞迁移、黏附和侵袭能力及基质金属蛋白酶的变化。结果重组质粒构建成功。干扰组细胞ILK mRNA及蛋白的表达分别较3个对照组(未转染组、转空质粒组和转阴性对照质粒组)比较,呈显著性下降(P<0.05);HE染色结果显示,细胞铺展良好,核质比减小;转染干扰质粒的2个实验组细胞的黏附能力相对于对照组分别增加87%和76%,黏附能力显著升高,迁移及侵袭能力明显降低(P<0.05);与3个对照组比较,转染pGenSil-1 siRNA1与pGensil-1 siRNA2质粒到EJ细胞后,MMP-2及MMP-9的表达水平明显降低(P<0.05)。结论成功构建的干扰质粒能抑制ILK基因及蛋白水平的表达,显著抑制细胞的生长、侵袭及迁移能力。
关键词
RNA
小分子干扰
膀胱肿瘤
细胞系
肿瘤
侵袭
迁移
整合素连接激酶
Keywords
RNA
small interfering
urinary bladder neoplasms
cell line
tumor
metastasis
invasion
integirn-linked kinase
分类号
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
R73-362 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
特异性ILK-siRNA对膀胱癌EJ细胞侵袭和迁移的影响
朱军
高娟
李红彦
潘湘阳
陈俊霞
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
6
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