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结核分枝杆菌PPE68基因真核表达质粒的构建及鉴定
被引量：
3
1
作者
靳志栋
何永林
+4 位作者
徐蕾
佘茜
张丹
张壮苗
杨春
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期907-910,共4页
目的:构建结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,Mtb)PPE68基因的真核表达质粒,观察PPE68基因在小鼠巨噬细胞株RAW264.7中的表达。方法:将MtbPPE68基因克隆亚至真核表达质粒pBudCE4.1中,构建真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68。以真核表...
目的:构建结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,Mtb)PPE68基因的真核表达质粒,观察PPE68基因在小鼠巨噬细胞株RAW264.7中的表达。方法:将MtbPPE68基因克隆亚至真核表达质粒pBudCE4.1中,构建真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68。以真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68体外转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,通过RT-PCR及Western blot法分别在转录水平及翻译水平检测PPE68基因的表达。结果:重组表达质粒经双酶切所切下的片段大小与理论值相符,测序结果与Gen-bank注录的PPE68基因序列一致。重组质粒瞬时转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7,用RT-PCR及Western blot法分别在转录水平及翻译水平检测PPE68基因的表达。结论:成功构建了PPE68基因的重组真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68,并在小鼠巨噬细胞株RAW264.7中得到了成功表达。为对其免疫原性、免疫反应性及免疫保护作用的进一步研究奠定了基础。
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关键词
MTB
PPE68
巨噬细胞
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职称材料
题名
结核分枝杆菌PPE68基因真核表达质粒的构建及鉴定
被引量：
3
1
作者
靳志栋
何永林
徐蕾
佘茜
张丹
张壮苗
杨春
机构
重庆医科大学
病原生物学教研室
重庆医科大学神经科学研究中心重庆市重点实验室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期907-910,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30771922、30901280)
文摘
目的:构建结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,Mtb)PPE68基因的真核表达质粒,观察PPE68基因在小鼠巨噬细胞株RAW264.7中的表达。方法:将MtbPPE68基因克隆亚至真核表达质粒pBudCE4.1中,构建真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68。以真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68体外转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,通过RT-PCR及Western blot法分别在转录水平及翻译水平检测PPE68基因的表达。结果:重组表达质粒经双酶切所切下的片段大小与理论值相符,测序结果与Gen-bank注录的PPE68基因序列一致。重组质粒瞬时转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7,用RT-PCR及Western blot法分别在转录水平及翻译水平检测PPE68基因的表达。结论:成功构建了PPE68基因的重组真核表达质粒pBudCE4.1-PPE68,并在小鼠巨噬细胞株RAW264.7中得到了成功表达。为对其免疫原性、免疫反应性及免疫保护作用的进一步研究奠定了基础。
关键词
MTB
PPE68
巨噬细胞
Keywords
mycobacterium tuberculosis
PPE68
macrophage
分类号
R337 [医药卫生—人体生理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核分枝杆菌PPE68基因真核表达质粒的构建及鉴定
靳志栋
何永林
徐蕾
佘茜
张丹
张壮苗
杨春
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
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