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Ipr1/PPE68穿梭质粒构建及诱导BALB/c小鼠免疫应答的探讨
1
作者
张壮苗
杨春
+5 位作者
靳志栋
何永林
徐蕾
王静娴
董志玲
李岱容
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期429-432,共4页
目的构建Ipr1/PPE68共表达穿梭质粒pBIPO(pBud-Ipr1-PPE68-OriM),探讨其诱导BALB/C小鼠的免疫应答特征。方法将Ipr1基因和PPE68编码序列以及结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的复制子OriM分别插入质粒pBudCE4.1的多克隆位...
目的构建Ipr1/PPE68共表达穿梭质粒pBIPO(pBud-Ipr1-PPE68-OriM),探讨其诱导BALB/C小鼠的免疫应答特征。方法将Ipr1基因和PPE68编码序列以及结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的复制子OriM分别插入质粒pBudCE4.1的多克隆位点,构建共表达穿梭质粒pBIPO,经酶切测序及Western blotting鉴定后,用其免疫BALB/c小鼠,于末次免疫后2w处死小鼠,ELISA法分别检测小鼠血清中lgG2a、IL-12及IFN-γ的水平,流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞数量,MTT法检测特异性脾淋巴细胞增殖,同时观察肺脾组织病理学变化。结果酶切测序鉴定PPE68和Ipr1基因序列与理论值相符,Western-blotting鉴定PPE68和Ipr1蛋白表达成功。质粒pBIPO免疫后小鼠血清中的lgG2a、IFN-γ及IL-12水平与CD4+和CD8+T细胞表达均呈现出有意义的提高,脾淋巴细胞增殖与BCG组相比差异无统计学意义,肺脾组织未见病理学改变。结论成功构建DNA疫苗(pBIPO),该疫苗能够有效诱导BALB/c小鼠的细胞免疫应答,为进一步研究其抗MTB的免疫保护作用奠定基础。
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关键词
MTB
Ipr1
PPE68
DNA疫苗
免疫应答
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职称材料
题名
Ipr1/PPE68穿梭质粒构建及诱导BALB/c小鼠免疫应答的探讨
1
作者
张壮苗
杨春
靳志栋
何永林
徐蕾
王静娴
董志玲
李岱容
机构
重庆医科大学
病原
生物学
教研室
重庆医科大学神经生物学重点实验室
重庆医科大学
附属第一医院呼吸科
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期429-432,共4页
基金
国家自然科学基金(No.30901280
81101216)资助
文摘
目的构建Ipr1/PPE68共表达穿梭质粒pBIPO(pBud-Ipr1-PPE68-OriM),探讨其诱导BALB/C小鼠的免疫应答特征。方法将Ipr1基因和PPE68编码序列以及结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的复制子OriM分别插入质粒pBudCE4.1的多克隆位点,构建共表达穿梭质粒pBIPO,经酶切测序及Western blotting鉴定后,用其免疫BALB/c小鼠,于末次免疫后2w处死小鼠,ELISA法分别检测小鼠血清中lgG2a、IL-12及IFN-γ的水平,流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞数量,MTT法检测特异性脾淋巴细胞增殖,同时观察肺脾组织病理学变化。结果酶切测序鉴定PPE68和Ipr1基因序列与理论值相符,Western-blotting鉴定PPE68和Ipr1蛋白表达成功。质粒pBIPO免疫后小鼠血清中的lgG2a、IFN-γ及IL-12水平与CD4+和CD8+T细胞表达均呈现出有意义的提高,脾淋巴细胞增殖与BCG组相比差异无统计学意义,肺脾组织未见病理学改变。结论成功构建DNA疫苗(pBIPO),该疫苗能够有效诱导BALB/c小鼠的细胞免疫应答,为进一步研究其抗MTB的免疫保护作用奠定基础。
关键词
MTB
Ipr1
PPE68
DNA疫苗
免疫应答
Keywords
Mycobacterium tuberculosis （MTB）
Iprl
PPE68
DNA vaccine
immune response
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ipr1/PPE68穿梭质粒构建及诱导BALB/c小鼠免疫应答的探讨
张壮苗
杨春
靳志栋
何永林
徐蕾
王静娴
董志玲
李岱容
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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