期刊文献+
共找到67篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
微课程应用于高校分子生物学教学的思考 被引量:4
1
作者 张春冬 《安徽农业科学》 CAS 2016年第9期313-314,共2页
微课是随着信息技术的发展兴起的一种新的教育模式,它具有短小精悍的特征。分子生物学作为生物学的前沿学科之一,在生命科学等领域具有举足轻重的地位。因其内容广泛,概念抽象复杂,为高校师生的教与学带来了一定压力。笔者结合分子生物... 微课是随着信息技术的发展兴起的一种新的教育模式,它具有短小精悍的特征。分子生物学作为生物学的前沿学科之一,在生命科学等领域具有举足轻重的地位。因其内容广泛,概念抽象复杂,为高校师生的教与学带来了一定压力。笔者结合分子生物学课程自身特点以及对微课的认识,探究将微课引入分子生物学课堂教学的可行性和必要性。在提升教师的教学质量的同时,提高学生学习该课程的兴趣以及对知识的理解力和掌握度。 展开更多
关键词 微课 分子生物学 传统教学 教学改革
在线阅读 下载PDF
MOOC背景下生物化学教学的对策与改革 被引量:12
2
作者 张春冬 张莹 +3 位作者 李轶 朱慧芳 雷云龙 卜友泉 《安徽农业科学》 CAS 2015年第14期380-381,383,共3页
将MOOC的教学理念引入生物化学教学中,与课堂教学相结合,对提升教师教学的质量和效率,调动学生的学习积极主动性,以及建立有效的学习效果评价体系等方面进行探讨及改革,以期适应电子信息化时代对提高人才培养质量的需求。
关键词 MOOC 生物化学 传统教学 教学改革
在线阅读 下载PDF
单羧酸转运蛋白基因过表达对MDA-MB-231乳腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:1
3
作者 马冬梅 麦力 +6 位作者 吴晓彬 汪长东 余畅 李海玉 李韵 高月 宋方洲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期37-41,共5页
目的研究单羧酸转运蛋白(MCT)基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期、侵袭和转移能力的影响。方法将真核表达质粒pcDNA3.1/MCT及空质粒pcDNA3.1分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞。采用实时定量PCR(qRTPCR)和Western blot法分别... 目的研究单羧酸转运蛋白(MCT)基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期、侵袭和转移能力的影响。方法将真核表达质粒pcDNA3.1/MCT及空质粒pcDNA3.1分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞。采用实时定量PCR(qRTPCR)和Western blot法分别检测转染后细胞内MCT基因的表达。Annexin V-FITC/PI染色和PI单染色结合流式细胞术检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡、细胞周期的影响,Transwell实验检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响,划痕实验检测MCT基因过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力的影响。结果实验组MCT的mRNA和蛋白水平明显高于转染空质粒的阴性对照组和未处理组;MCT过表达能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡,G2期细胞减少、S期细胞增多,同时能抑制癌细胞的侵袭和迁移能力。结论 MCT基因过表达能促进MDA-MB-231细胞的凋亡、调节细胞G2/M期检控点,抑制细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 MCT MDA-MB-231 凋亡 周期 侵袭 迁移
在线阅读 下载PDF
PBL在生物化学教学中的应用 被引量:2
4
作者 张春冬 张莹 +3 位作者 李轶 朱慧芳 雷云龙 卜友泉 《蚕学通讯》 2015年第1期55-57,共3页
在高等院校的生物类专业中生物化学是一门非常重要的基础课程。为提高教学质量,将PBL教学法应用于生物化学教学实践中,发现通过PBL运用可使学生更好地掌握生物化学相关的基础知识,提高学生分析问题和解决问题的能力,更好的达到教学目标... 在高等院校的生物类专业中生物化学是一门非常重要的基础课程。为提高教学质量,将PBL教学法应用于生物化学教学实践中,发现通过PBL运用可使学生更好地掌握生物化学相关的基础知识,提高学生分析问题和解决问题的能力,更好的达到教学目标与要求。我们的教学实践证明PBL教学是适合我国高等院校创新人才培养的良好教学模式之一,值得推广应用。 展开更多
关键词 生物化学 教学方法 PBL教学法
在线阅读 下载PDF
生物医药基础学科探究性实验教学体系的构建 被引量:4
5
作者 廖飞 卜友泉 +1 位作者 曾昭淳 邓小燕 《实验室研究与探索》 CAS 2006年第7期827-828,863,共3页
探究性实验教学有利于培养学生创造力和创造意识。探究性实验教学内容覆盖基本实验技术、主要研究对象和常用研究方案。探究性实验教学中,由学生围绕研究对象参照常用研究方案自行拟定实验内容,从而构成探究性教学实验用于实践。通过介... 探究性实验教学有利于培养学生创造力和创造意识。探究性实验教学内容覆盖基本实验技术、主要研究对象和常用研究方案。探究性实验教学中,由学生围绕研究对象参照常用研究方案自行拟定实验内容,从而构成探究性教学实验用于实践。通过介绍本学科理论与技术在解决医药难题中的应用增强学生学习的积极性和创造意识。 展开更多
关键词 实验教学 创造力 创新意识 探究性教学实验
在线阅读 下载PDF
生物医药基础学科实验教学体系的实施 被引量:2
6
作者 廖飞 卜友泉 +1 位作者 曾昭淳 邓小燕 《实验室研究与探索》 CAS 2006年第8期975-978,共4页
医药生物化学探究性教学实验内容应覆盖了主要研究对象和常用技术,体现了常用研究思路。以血清芳香酯酶为研究对象可覆盖小分子、酶和蛋白大分子、核酸和基因等对象和相应研究技术。在实施过程中细化实验准备工作提供保障,按培养目标调... 医药生物化学探究性教学实验内容应覆盖了主要研究对象和常用技术,体现了常用研究思路。以血清芳香酯酶为研究对象可覆盖小分子、酶和蛋白大分子、核酸和基因等对象和相应研究技术。在实施过程中细化实验准备工作提供保障,按培养目标调整教学课时分配和选择具体教学实验内容,可采用文件化方式实施教学质量监控。 展开更多
关键词 实验教学 生物化学 探究性实验 芳香酯酶
在线阅读 下载PDF
高糖抑制蛋白KIAA0753和CCSAP表达并通过钙信号阻断小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1的成骨分化
7
作者 王吉春 钱正霞 +1 位作者 李梦雪 汪长东 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期456-465,共10页
目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及钙信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blo... 目的探究高糖对蛋白KIAA0753和CCSAP的影响,以及高糖条件下KIAA0753和CCSAP与成骨分化以及钙信号通路三者之间的联系。方法利用5.5和25 mmol·L^(-1)葡萄糖浓度的成骨培养基诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),通过Western blot检测KIAA0753和CCSAP蛋白表达情况;转染过表达质粒进入人胚肾细胞(HEK-293T),免疫共沉淀检测蛋白KIAA0753和CCSAP相互作用;利用成骨培养基分别在不同葡萄糖浓度和不同诱导时间处理MC3T3-E1细胞,试剂盒检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,Western blot检测KIAA0753、CCSAP、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)等蛋白的表达情况,然后再设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-CCSAP组MC3T3-E1细胞,依次检测KIAA0753、OCN、OPN蛋白的表达情况以及ALP活性;利用高通量基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中糖尿病鼠模型数据集筛选差异基因进行生物信息学分析;对MC3T3-E1细胞分别设置5.5、25 mmol·L^(-1)和25 mmol·L^(-1)+OE-KIAA0753组,Western blot检测钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡbeta,CAMK2B)、受磷蛋白(phospholamban,PLN)蛋白的表达。结果与5.5 mmol·L^(-1)组相比,25 mmol·L^(-1)抑制成骨细胞中KIAA0753和CCSAP蛋白表达,且蛋白KIAA0753和CCSAP存在相互作用。同时25 mmol·L^(-1)也抑制成骨细胞ALP、OPN、OCN蛋白表达,在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达CCSAP上调KIAA0753、OCN、OPN、ALP的表达。糖尿病鼠模型的差异基因主要富集在“信号受体、信号调控”等方面。25 mmol·L^(-1)葡萄糖抑制成骨细胞中CAMK2B、PLN蛋白的表达,且在25 mmol·L^(-1)的条件下过表达KIAA0753上调CAMK2B、PLN蛋白的表达。结论高糖抑制KIAA0753和CCSAP蛋白表达,抑制小鼠胚胎成骨细胞前体细胞成骨分化和钙信号传导,过表达CCSAP挽救高糖对成骨分化的抑制作用以及过表达KIAA0753逆转高糖对钙信号通路的抑制作用。 展开更多
关键词 糖尿病 KIAA0753 CCSAP 蛋白相互作用 成骨分化 钙信号
在线阅读 下载PDF
PRR11调节肺癌细胞系A549侵袭迁移的分子机制研究 被引量:2
8
作者 张莲 张春冬 +1 位作者 卜友泉 宋方洲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期662-666,共5页
目的:PRR11(proline rich protein 11)是近年来发现的一个肿瘤相关基因,前期研究结果显示其高表达对于肺癌等恶性肿瘤细胞的侵袭迁移具有重要作用,本研究为了更进一步研究其促进肺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法:综合利用si RNA敲减、... 目的:PRR11(proline rich protein 11)是近年来发现的一个肿瘤相关基因,前期研究结果显示其高表达对于肺癌等恶性肿瘤细胞的侵袭迁移具有重要作用,本研究为了更进一步研究其促进肺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法:综合利用si RNA敲减、划痕及迁移实验、Western blot及免疫荧光等方法分析人肺癌细胞系A549沉默PRR11表达后细胞侵袭迁移能力下降的分子机制。结果:PRR11沉默后,划痕及Transwell实验结果表明,PRR11沉默明显减弱了A549细胞运动、侵袭及迁移能力。进一步定量qRT-PCR及Western blot检测发现,PRR11稳定沉默导致上皮细胞标志分子E-cadherin明显上调、而EMT上游关键转录因子Twist1及间质细胞标志分子N-cadherin表达下调,另外免疫荧光染色结果同样显示Twist1及N-cadherin下调明显。结论:肺癌细胞系A549中PRR11可能通过调节Twist1等EMT关键分子的表达在细胞侵袭转移过程中起关键作用,为进一步探索PRR11在肺癌中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 肺癌 侵袭 迁移 PRR11 TWIST1
在线阅读 下载PDF
KIAA0753减缓糖尿病抑制的成骨细胞糖代谢和能量代谢
9
作者 李梦雪 王吉春 +1 位作者 李乐泰 汪长东 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第20期2291-2300,共10页
目的探讨KIAA0753对成骨细胞MC3T3-E1糖代谢及能量代谢的影响。方法由基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)获取Joubert综合征患者基因表达数据集GSE182286并对其进行分析。构建KIAA0753过表达载体,实验分为对照组、高糖组... 目的探讨KIAA0753对成骨细胞MC3T3-E1糖代谢及能量代谢的影响。方法由基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)获取Joubert综合征患者基因表达数据集GSE182286并对其进行分析。构建KIAA0753过表达载体,实验分为对照组、高糖组和高糖+过表达KIAA0753组,采用Western blot检测在高糖条件下KIAA0753对MC3T3-E1细胞糖代谢相关蛋白糖原合酶1(glycogen synthase 1,GYS1)、糖原磷酸化酶L(glycogen phosphorylase L,PYGL)、葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter type 4,GluT4)、磷酸果糖激酶(phosphofructokinase muscle,PFKM)、丙酮酸脱氢酶磷酸酶1(pyruvate dehydrogenase phosphatase 1,PDP1)、乙酰辅酶A羧化酶α(acetyl-CoA carboxylaseα,ACACA),以及线粒体相关蛋白过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator-1α,PGC-1α)、核呼吸因子1(nuclear respiratory factor 1,NRF1)、线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)的影响;通过检测细胞培养基中葡萄糖含量、细胞内的糖原含量和乳酸含量评估KIAA0753对糖代谢中间产物的影响;采用细胞免疫荧光和ATP含量检测KIAA0753对线粒体活性及功能的影响;采用EdU染色检测KIAA0753对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。结果KIAA0753在Joubert综合症患者和高糖条件下表达下调(P<0.05)。高糖抑制蛋白GYS1、ACACA、PFKM、GluT4、PGC-1α、TFAM和NRF1的表达,促进蛋白PDP1和PYGL的表达,减少糖原生成和细胞外葡萄糖的消耗,促进乳酸生成,而过表达KIAA0753后减缓了高糖的作用,促进蛋白GYS1、ACACA、PFKM、GluT4、PGC-1α、TFAM和NRF1的表达,抑制蛋白PDP1和PYGL的表达,增加糖原生成和细胞外葡萄糖的消耗,抑制乳酸生成(P<0.05)。与高糖组相比,过表达KIAA0753在高糖条件下显著提升MC3T3-E1细胞线粒体的活性和膜电位,促进ATP的合成(P<0.05),促进MC3T3-E1细胞的增殖(P<0.05)。结论KIAA0753能够促进成骨细胞的糖代谢并提升线粒体活性和功能,从而为机体提供更多能量。 展开更多
关键词 JOUBERT综合征 成骨细胞 KIAA0753 糖代谢 线粒体 ATP
在线阅读 下载PDF
人PRR11启动子的结构与功能初步分析 被引量:9
10
作者 艾青 卜友泉 +6 位作者 刘竹 兰欢 吉颖 杜刚 杨正梅 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期356-363,共8页
PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启... PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启动子进行了克隆鉴定和初步分析.首先,应用5'RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了PRR11基因的转录起始位点,发现了其具有多个转录起始位点.通过PCR定向克隆和DNA blunting技术,构建了6个相互重叠并覆盖PRR11基因转录起始位点附近约2.0 kb区域的PRR 11基因启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,PRR 11基因启动子主要定位于转录起始位点附近-563 bp~+341 bp的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,PRR 11基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒、CCAAT盒以及潜在的经典转录因子E2F1和MYB的结合位点,提示Sp1、NF-Y、E2F1和MYB等经典转录因子可能参与PRR 11基因的转录调控. 展开更多
关键词 PRR11(proline-rich PROTEIN 11) 启动子 转录调控 肿瘤相关基因
在线阅读 下载PDF
人NFBD1启动子的鉴定与初步分析 被引量:9
11
作者 卜友泉 宋方洲 +1 位作者 易发平 马永平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期631-637,共7页
NFBD1,也称MDC1,是一个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为了进一步深入研究其转录调控机制,本研究克隆鉴定了NFBD1的启动子.首先应用5′RACE技术鉴定了NFBD1的转录起始位点,首次发现NFBD1至少存在3种丰度和转录起始位点不... NFBD1,也称MDC1,是一个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为了进一步深入研究其转录调控机制,本研究克隆鉴定了NFBD1的启动子.首先应用5′RACE技术鉴定了NFBD1的转录起始位点,首次发现NFBD1至少存在3种丰度和转录起始位点不同的转录变异体.然后,通过PCR定向克隆和酶切亚克隆策略,构建了覆盖NFBD1基因5′侧翼区起始密码子ATG上游5kb区域的一系列NFBD1启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,NFBD1启动子区域定位于主要转录起始位点区域附近1.5kb的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,NFBD1启动子缺乏TATA盒,但含有典型的CCAAT盒和GC盒以及其它潜在的转录因子结合位点,提示Sp1和NF-Y等转录因子可能参与NFBD1的转录调控. 展开更多
关键词 NFBDl RACE 启动子 转录调控
在线阅读 下载PDF
siRNA介导的NFBD1表达沉默对HeLa细胞增殖与凋亡的影响 被引量:7
12
作者 卜友泉 杨正梅 +3 位作者 兰欢 镇磊 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期943-949,共7页
NFBD1,也称MDC1,是1个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为探讨NFBD1在细胞增殖和凋亡中的作用及其作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值,本研究采用siRNA技术抑制NFBD1的表达,并观察了其对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和细胞凋... NFBD1,也称MDC1,是1个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为探讨NFBD1在细胞增殖和凋亡中的作用及其作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值,本研究采用siRNA技术抑制NFBD1的表达,并观察了其对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和细胞凋亡的影响.半定量RT-PCR和蛋白质印迹分析结果表明,筛选到的短链NFBD1 siRNA能有效抑制内源NFBD1的表达,抑制程度约100%.细胞生长曲线分析结果表明,siRNA介导的NFBD1表达沉默导致HeLa细胞生长增殖的显著抑制.FACS分析结果表明,NFBD1表达抑制导致sub-G1峰的出现,同时蛋白质印迹分析观察到了caspase 3和PARP(poly-ADP-ribose polymerase)的剪接激活,表明NFBD1表达抑制诱发了细胞凋亡.在该凋亡过程中,P53及其下游靶分子Bax和Puma的表达水平均没有发生明显变化,但Noxa的表达在mRNA和蛋白质水平上均显著上调,强烈提示该凋亡过程很可能是1个不依赖P53的凋亡途径,且Noxa的转录激活在该凋亡过程中可能起着重要作用.这些结果表明,NFBD1参与细胞生长增殖和凋亡的调节,是一个潜在的肿瘤治疗新靶点. 展开更多
关键词 NFBD1 SIRNA 细胞增殖 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
沉默DEPDC1抑制鼻咽癌细胞HNE-1和CNE-1侵袭迁移 被引量:6
13
作者 李红霞 封雪飞 +2 位作者 卜友泉 张春冬 朱江 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期665-671,共7页
DEPDC1(DEP domain containing 1)是一个新的肿瘤相关基因,在多种恶性肿瘤的发生发展进程中起着重要作用。我们前期工作中在鼻咽癌细胞内沉默了DEPDC1的表达,发现抑制细胞增殖并诱发细胞凋亡。本研究旨在探讨沉默DEPDC1表达后,对鼻咽癌... DEPDC1(DEP domain containing 1)是一个新的肿瘤相关基因,在多种恶性肿瘤的发生发展进程中起着重要作用。我们前期工作中在鼻咽癌细胞内沉默了DEPDC1的表达,发现抑制细胞增殖并诱发细胞凋亡。本研究旨在探讨沉默DEPDC1表达后,对鼻咽癌细胞HNE-1和CNE-1侵袭迁移能力的影响及其分子机制。结果显示,siRNA介导DEPDC1表达沉默后,细胞侧向运动能力、侵袭及迁移能力显著降低。qRT-PCR及Western印迹检测发现DEPDC1沉默导致EMT上游关键转录因子Twist1及间质细胞标志分子Vimentin表达显著下调。这些研究表明,鼻咽癌细胞中DEPDC1通过调节Twist1等EMT关键分子的表达在细胞侵袭转移过程中起关键作用。推测DEPDC1在鼻咽癌中高表达可能对于促进其侵袭转移具有重要作用,进而促进肿瘤发生发展,但具体分子机制仍有待更深入研究。 展开更多
关键词 鼻咽癌 DEPDC1 TWIST1 侵袭 迁移
在线阅读 下载PDF
重叠PCR法合成轮状病毒抗原基因VP4 被引量:8
14
作者 冉丹霞 王荣荣 +2 位作者 郝亚宁 宋方洲 马永平 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期118-119,124,共3页
用重叠延伸PCR(overlap extension PCR)法获得轮状病毒VP4基因。根据Genbank中鼠VP4基因的序列设计34对引物,用overlap PCR法合成VP4全基因的两个片段A、B,将A、B分别连入pMD19-T simple载体,测序结果显示,成功合成了VP4全基因。证明了... 用重叠延伸PCR(overlap extension PCR)法获得轮状病毒VP4基因。根据Genbank中鼠VP4基因的序列设计34对引物,用overlap PCR法合成VP4全基因的两个片段A、B,将A、B分别连入pMD19-T simple载体,测序结果显示,成功合成了VP4全基因。证明了重叠延伸PCR法是获得目的基因的有效方法。 展开更多
关键词 轮状病毒 VP4基因 合成 重叠延伸PCR
在线阅读 下载PDF
沉默Bmi-1表达可促进MCF-7乳腺癌细胞凋亡并抑制其侵袭 被引量:8
15
作者 邓小园 武向梅 +1 位作者 翁华莉 宋方洲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1036-1040,共5页
目的探讨B细胞特异的Moloney鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)基因沉默对细胞增殖与侵袭的影响及可能的分子机制。方法收集经病理确诊的乳腺癌及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检测Bmi-1的表达差异;采用LipofectamineRNAi MAX转染试剂将靶... 目的探讨B细胞特异的Moloney鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)基因沉默对细胞增殖与侵袭的影响及可能的分子机制。方法收集经病理确诊的乳腺癌及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检测Bmi-1的表达差异;采用LipofectamineRNAi MAX转染试剂将靶向Bmi-1基因的小干扰RNA(siRNA)转染MCF-7细胞,流式细胞术检测Bmi-1沉默后细胞周期和凋亡的改变,Western blot法检测凋亡相关基因P21、Bax、Bcl-2的表达变化。TranswellTM侵袭实验检测MCF-7细胞侵袭力变化,Western blot法检测上皮钙黏素(E-cadherin),神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达水平。结果乳腺癌组织Bmi-1 mRNA表达量高于癌旁组织,沉默Bmi-1基因可使MCF-7细胞周期阻滞于G1期,凋亡细胞增多;与空白对照组、阴性对照siRNA转染组相比,Bmi-1-siRNA组中P21与Bax的表达水平明显上调,Bcl-2明显下调。沉默Bmi-1基因表达可抑制MCF-7细胞的侵袭力,与对照组相比,下调Bmi-1可增强E-cadherin的表达,减少N-cadherin、vimentin的表达。结论下调Bmi-1的表达可引起MCF-7细胞G1期阻滞,促进细胞凋亡,与P21表达上调,Bax/Bcl-2比率升高有关;下调Bmi-1水平可抑制MCF-7细胞侵袭性,与抑制肿瘤细胞上皮间质转化有关。 展开更多
关键词 BMI-1 乳腺癌 细胞凋亡 细胞侵袭
在线阅读 下载PDF
血清蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立 被引量:8
16
作者 母昭德 彭咏波 +1 位作者 易发平 邱宗荫 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期821-823,840,共4页
目的:建立血清蛋白质组双向凝胶电泳(2-DE)技术。方法:对血清蛋白质2-DE的各种条件进行调整、优化。结果:建立了稳定的2-DE技术。结论:已建立的血清蛋白质2-DE技术,将为进一步开展疾病的血清蛋白质组学研究奠定基础。
关键词 血清蛋白质组学 蛋白质组 双向凝胶电泳
在线阅读 下载PDF
Angptl3基因在大鼠高脂模型中组织表达及其与血脂的关系 被引量:3
17
作者 王欣 王继红 +3 位作者 黄家利 李倩 曾建涛 商文静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1167-1169,共3页
目的探讨Angptl3基因在大鼠高脂模型中各组织表达及其与血脂的关系。方法将60只清洁型SD大鼠随机分为4组:正常对照组、高脂血症组、糖尿病并发高脂血症组、IgA肾病并发高脂血症组。采用定量PCR(SYBR G reenⅠ)方法,检测以上4组大鼠脑、... 目的探讨Angptl3基因在大鼠高脂模型中各组织表达及其与血脂的关系。方法将60只清洁型SD大鼠随机分为4组:正常对照组、高脂血症组、糖尿病并发高脂血症组、IgA肾病并发高脂血症组。采用定量PCR(SYBR G reenⅠ)方法,检测以上4组大鼠脑、肺、心、胃、肝、肾、脂肪等7种组织中Angptl3 mRNA的表达。结果Angptl3在4组大鼠的肝、肾组织中均有表达,其余5种组织中均未检测出有表达。其中肝表达量占总量的90%左右;并且随着表达总量的增加,肝表达量增加幅度较大。结论Angptl3在成年雄性SD大鼠肝、肾组织中特异表达,且此特异性不随血脂水平的改变而改变。 展开更多
关键词 Angptl3 高脂血症 定量PCR 组织分布 动物模型
在线阅读 下载PDF
羟基红花黄色素A对脂多糖作用后血管内皮细胞诱导型一氧化氮合酶表达的影响 被引量:5
18
作者 王银光 张琴 +3 位作者 涂利宽 万敬员 李炯 罗文军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期137-140,共4页
旨在探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用后人脐静脉内皮细胞株HUVECs细胞株诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。培养HUVECs细胞株,用1 mg/L LP... 旨在探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用后人脐静脉内皮细胞株HUVECs细胞株诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。培养HUVECs细胞株,用1 mg/L LPS及不同浓度的HYSA处理细胞24 h,MTT法检测细胞增殖情况,硝基还原酶法检测培养液中一氧化氮(NO)含量,RT-PCR及Western blotting检测iNOS表达。结果表明0.01、0.1 mmol/L HYSA对LPS引起的iNOS升高无明显作用,但1mmol/L HYSA能明显抑制LPS作用后高度表达的iNOS量。因此,HYSA能下调LPS所致iNOS的异常表达,这可能有助于临床治疗血管炎症疾病。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 脂多糖 诱导型一氧化氮合酶 HUVECs细胞株
在线阅读 下载PDF
SCF在糖尿病胃轻瘫大鼠胃壁中表达的研究 被引量:8
19
作者 商文静 王继红 +1 位作者 陈辉 程大林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期824-826,891,共4页
目的:制备糖尿病胃轻瘫大鼠模型,通过检测其胃壁组织SCF的表达水平,探讨SCF与糖尿病胃轻瘫的关系。方法:用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)建立糖尿病胃轻瘫大鼠模型,应用RT-PCR和Wester blotting方法分别检测各实验组胃壁SCF基因(cDNA)... 目的:制备糖尿病胃轻瘫大鼠模型,通过检测其胃壁组织SCF的表达水平,探讨SCF与糖尿病胃轻瘫的关系。方法:用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)建立糖尿病胃轻瘫大鼠模型,应用RT-PCR和Wester blotting方法分别检测各实验组胃壁SCF基因(cDNA)及蛋白质的表达水平,分析SCF表达水平与糖尿病胃轻瘫的关系。结果:糖尿病胃轻瘫大鼠胃排空明显延迟;SCF基因和蛋白的表达水平明显降低;用西沙必利处理后表达升高,且与病情轻重有相关性。结论:SCF与糖尿病胃轻瘫发病有关,SCF在糖尿病胃轻瘫中的表达水平可以反映其病情发展过程。 展开更多
关键词 胃轻瘫 SCF CAJAL间质细胞
在线阅读 下载PDF
MCHR2在CHO细胞中的稳定表达及其信号通路分析 被引量:3
20
作者 杨俊霞 袁成福 +5 位作者 石华 魏丽丽 陈济 易发平 马永平 宋方洲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期294-299,共6页
目的构建人MCHR2基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并分析MCHR2介导的信号转导通路。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,定向插入到真核表达载体pcDNA3·1(+),经酶切和测序鉴定... 目的构建人MCHR2基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并分析MCHR2介导的信号转导通路。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,定向插入到真核表达载体pcDNA3·1(+),经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,经RT-PCR和Western blot鉴定后,通过测定细胞内cAMP、Ca2+浓度的改变分析MCHR2的信号转导通路。结果成功构建了pcDNA3·1-MCHR2真核表达载体并稳定转入CHO细胞,建立了稳定转染细胞系,成功地表达目的基因,MCH作用于MCHR2后不影响细胞内cAMP生成,可促使细胞内钙库释放Ca2+,进而使胞内Ca2+浓度出现明显而短暂的升高,提示MCHR2的信号转导通路主要是与Gq蛋白偶联。结论人MCHR2的稳定表达和信号转导通路分析为进一步体外研究MCHR2的功能提供了良好的实验基础。 展开更多
关键词 MCHR2 真核表达载体 稳定转染 基因表达 信号转导
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部