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荧光定量PCR检测弓形虫基因方法的建立
被引量：
10
1
作者
王频佳
张德纯
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期123-125,共3页
目的 建立荧光定量PCR检测弓形虫基因的方法,并进行实验室方法学评价。方法 PCR扩增弓形虫 529bp重复序列,经TA克隆后转化入大肠杆菌DH5α中;提取重组质粒鉴定后,作为模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验和临床标本检测。结...
目的 建立荧光定量PCR检测弓形虫基因的方法,并进行实验室方法学评价。方法 PCR扩增弓形虫 529bp重复序列,经TA克隆后转化入大肠杆菌DH5α中;提取重组质粒鉴定后,作为模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验和临床标本检测。结果 用重组质粒制作的标准曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系,相关系数 0. 995,平均试验间变异系数 3. 28%,无非特异性扩增。临床标本检测阳性率为 43. 3%。结论 建立了检测弓形虫基因的荧光定量PCR方法,快速、灵敏、特异的特点适合临床实验室的应用。
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关键词
弓形虫
荧光定量PCR检测
临床标本
重组质粒
基因方法
DH5Α
非特异性
模板浓度
重复序列
克隆
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职称材料
题名
荧光定量PCR检测弓形虫基因方法的建立
被引量：
10
1
作者
王频佳
张德纯
机构
重庆医科大学检验系临床微生物学教研室
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期123-125,共3页
基金
南宁市科技局科技攻关项目(批准文号:南科[2003]27号)
文摘
目的 建立荧光定量PCR检测弓形虫基因的方法,并进行实验室方法学评价。方法 PCR扩增弓形虫 529bp重复序列,经TA克隆后转化入大肠杆菌DH5α中;提取重组质粒鉴定后,作为模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验和临床标本检测。结果 用重组质粒制作的标准曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系,相关系数 0. 995,平均试验间变异系数 3. 28%,无非特异性扩增。临床标本检测阳性率为 43. 3%。结论 建立了检测弓形虫基因的荧光定量PCR方法,快速、灵敏、特异的特点适合临床实验室的应用。
关键词
弓形虫
荧光定量PCR检测
临床标本
重组质粒
基因方法
DH5Α
非特异性
模板浓度
重复序列
克隆
Keywords
toxoplasma gondii
fluorescent quantitative PCR
detection
分类号
R446 [医药卫生—诊断学]
R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
荧光定量PCR检测弓形虫基因方法的建立
王频佳
张德纯
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
10
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