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测定汽油中铅的KMnO_4-Luminol化学发光体系 被引量：13
1
作者 徐溢 唐守渊 +1 位作者 夏之宁 易钢 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期59-61,共3页
研究了KMnO4 氧化鲁米诺 (luminol)的化学发光反应过程 ,探讨了铅 (Ⅱ )后续催化该化学发光反应的反应历程 ,建立了在最佳反应条件下利用该后续发光反应定量测试微量铅的方法;采用流动注射化学发光方法测定了汽油中铅含量 ,方法检出限达... 研究了KMnO4 氧化鲁米诺 (luminol)的化学发光反应过程 ,探讨了铅 (Ⅱ )后续催化该化学发光反应的反应历程 ,建立了在最佳反应条件下利用该后续发光反应定量测试微量铅的方法;采用流动注射化学发光方法测定了汽油中铅含量 ,方法检出限达0.01mg/L ,检测线性范围在1.0×10-7～5.0×10-4 mol/L ,对大量阴阳离子进行了干扰试验 ,结果表明方法有良好的选择性。 展开更多
关键词 化学发光 流动注射分析 铅 汽油 高锰酸钾 鲁米诺 测定 分析
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中国重庆地区汉族群体白介素-1受体拮抗剂基因多态性分布的初步观察 被引量：12
2
作者 刘兴 冯凯 +2 位作者 蒋建新 何家庆 冯文莉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期200-201,共2页
目的　从基因水平上了解中国重庆地区汉族人群白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Ra)基因多态性分布。方法　采用PCR方法对 112例重庆地区汉族健康人IL 1Ra基因VNTR多态性进行了观察 ,并结合文献进行了不同种族间的分析比较。结果　中国重... 目的　从基因水平上了解中国重庆地区汉族人群白细胞介素 1受体拮抗剂 (IL 1Ra)基因多态性分布。方法　采用PCR方法对 112例重庆地区汉族健康人IL 1Ra基因VNTR多态性进行了观察 ,并结合文献进行了不同种族间的分析比较。结果　中国重庆地区正常人群以IL 1RaA1等位基因频率最高 ,IL 1RaA2等位基因次之 ,与德、美等西欧国家及非洲白人相比 ,重庆地区汉族人IL 1RaA1等位基因的频率明显要高 ,IL 1RaA2等位基因频率明显低 ,而与非洲黑人相近。重庆地区汉族人IL 1RaA1 A1、A1 A2、A2 A2基因型分别为 0 .83、0 .17、0。结论　IL 1Ra基因VNTR基因多态性在不同种族间的分布存在着明显的差异 ,为进一步研究IL 展开更多
关键词 白细胞介素-1受体拮抗剂 基因多态性 聚合酶联反应
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白血病细胞系来源的树突状细胞诱导及其抗肿瘤免疫功能研究 被引量：6
3
作者 罗云萍 李用国 +1 位作者 蔡大川 任红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期229-235,共7页
树突状细胞 (DC)在抗肿瘤免疫反应中起关键作用 ,但大多数白血病病人有DC功能缺陷。在体外扩增DC并增强其抗肿瘤免疫功能及以DC为基础的肿瘤疫苗是对白血病有效的免疫治疗方法。为了探讨由不同的髓性白血病细胞系诱生DC的条件及其抗白... 树突状细胞 (DC)在抗肿瘤免疫反应中起关键作用 ,但大多数白血病病人有DC功能缺陷。在体外扩增DC并增强其抗肿瘤免疫功能及以DC为基础的肿瘤疫苗是对白血病有效的免疫治疗方法。为了探讨由不同的髓性白血病细胞系诱生DC的条件及其抗白血病反应 ,选用HL 6 0 ,K5 6 2和THP 1细胞与不同的细胞因子组合诱生DC ,以光学和电子显微镜术观察形态特征 ,用流式细胞术和单克隆抗体检测细胞表型 ,以同种混合淋巴细胞反应观察刺激淋巴细胞增殖 ,用51Cr释放法检测诱生细胞的细胞毒作用 ,用ELISA法测定DC培养及DC +血单个核细胞联合培养的血清中IL 12及IFN γ的量。结果表明 ,由K5 6 2 ,HL 6 0和THP 1细胞诱生的DC具有树突状细胞的形态学特征 ,细胞表达DC的表面分化抗原 ,其中GM CSF +IL 4 +TNF γ刺激HL 6 0 DC和THP 1 DC和GM CSF +IL 4 +IL 12刺激的K5 6 2 DC中有抗原表达。 3种细胞诱生的DC对混合淋巴细胞反应及CTL反应有强刺激作用。诱生DC的培养上清和DC与血单个核细胞共培养上清中分别测出不同量的IL 12和IFN γ。结论提示 ,细胞因子能诱导髓性白血病细胞产生DC ,不同细胞需要不同的细胞因子和培养条件。这些DC表达抗原呈递细胞的表型具有刺激T淋巴细胞增殖和诱导CTL反应以及分泌IL 12和促进T细胞分泌IFN γ的? 展开更多
关键词 白血病 树突状细胞 抗肿瘤免疫 白血病细胞 细胞因子 免疫疗法
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膀胱癌T-24细胞系中细胞角蛋白20的分离纯化及鉴定 被引量：6
4
作者 刘彦慧 罗春丽 +1 位作者 吴小候 蔡晓钟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期302-305,共4页
目的　分离纯化细胞角蛋白 2 0 (Cytokeratin2 0 ,CK2 0 )并加以鉴定 ,为进一步研制抗CK2 0单克隆抗体奠定基础。方法　培养人膀胱肿瘤T 2 4细胞系并用免疫组化检测CK2 0表达 ,然后大量培养并收集细胞 ,超声波细胞粉碎后 ,先用萃取、高... 目的　分离纯化细胞角蛋白 2 0 (Cytokeratin2 0 ,CK2 0 )并加以鉴定 ,为进一步研制抗CK2 0单克隆抗体奠定基础。方法　培养人膀胱肿瘤T 2 4细胞系并用免疫组化检测CK2 0表达 ,然后大量培养并收集细胞 ,超声波细胞粉碎后 ,先用萃取、高速离心、透析等方式进行蛋白初分离 ,然后利用以DE5 2为介质的阴离子交换层析分离纯化CK2 0蛋白 ,以电泳示踪 ,最后采用SDS PAGE、HLPC和Western blotting加以鉴定。结果　在阴离子交换层析时出现 3组洗脱峰 ,CK2 0主要存在第二组峰中 ,该峰在SDS PAGE和Western blotting上均呈现单一条带 ,HLPC分析显示CK2 0蛋白主峰呈正态分布 ,仅见一个较低峰度的蛋白质杂峰。结论　该纯化方法简便、可行、效果好、获得的蛋白纯度高 ,提取的蛋白可确认为CK2 0并且具有较高的免疫生物活性。 展开更多
关键词 细胞角蛋白20 分离纯化 阴离子交换层析 人类膀胱癌T-24细胞
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血浆脂肪甘油三酯脂酶水平与肥胖、胰岛素抵抗相关因素的关系研究 被引量：8
5
作者 刘颖 李伶 +5 位作者 杨刚毅 王毅 陈文雯 董靖 李仁哲 杨艳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期871-874,共4页
目的探讨初诊2型糖尿病(T2DM)伴肥胖患者血浆脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)水平变化及其与体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、血脂、血糖、血浆胰岛素水平等的关系。方法纳入T2DM患者及健康体检者共161例,分为4组:初诊T2DM患者(T2DM)组、初诊T2DM... 目的探讨初诊2型糖尿病(T2DM)伴肥胖患者血浆脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)水平变化及其与体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、血脂、血糖、血浆胰岛素水平等的关系。方法纳入T2DM患者及健康体检者共161例,分为4组:初诊T2DM患者(T2DM)组、初诊T2DM伴肥胖患者(T2DM-ob)组、正常糖耐量伴肥胖者(NGT-ob)组和正常对照(NGT)组。再根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)中位数将上述161例患者分为胰岛素抵抗(IR)组及胰岛素敏感(IS)组。采用酶联免疫法(ELISA)测定上述受试者血浆ATGL水平,并分析其与BMI、WHR、血脂、血糖、血浆胰岛素、HOMA-IR等的关系。结果 4组间血浆ATGL水平差异均无统计学意义,但4组中T2DM-ob组、T2DM组ATGL浓度分别与NGT-ob组、NGT组比较有降低的趋势。IR组ATGL水平(61.7±21.6μg/L)明显低于IS组(75.3±22.9μg/L,P<0.01)。血浆ATGL水平与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈明显正相关(r=0.229,P<0.01),而与空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR呈明显负相关(r=-0.199,P<0.05;r=-0.234,P<0.01)。多元回归分析结果表明,HDL-C、BMI、体内脂肪百分比(FAT%)均为影响血浆ATGL水平的独立相关因素。结论血浆ATGL水平的改变与肥胖相关因素和IR等有关,并可能参与了肥胖、IR和T2DM的发生和发展。 展开更多
关键词 脂肪甘油三酯脂酶 糖尿病 2型 肥胖症 胰岛素抗药性
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STAT3与VEGF在非小细胞肺癌中的表达及关系 被引量：5
6
作者 胥文春 罗春丽 +2 位作者 冯文莉 林晓 唐敏 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第4期460-462,466,共4页
目的 :探讨非小细胞肺癌中STAT3蛋白与VEGF表达的关系 ,以进一步探讨肿瘤的发生及转移机制。方法 :利用SABC免疫组织化学技术检测 4 0例非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中STAT3蛋白和VEGF的表达。结果 :(1)STAT3在低分化肺癌组织中的表达明显... 目的 :探讨非小细胞肺癌中STAT3蛋白与VEGF表达的关系 ,以进一步探讨肿瘤的发生及转移机制。方法 :利用SABC免疫组织化学技术检测 4 0例非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中STAT3蛋白和VEGF的表达。结果 :(1)STAT3在低分化肺癌组织中的表达明显高于高分化肺癌组织 ,在有淋巴结转移肺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移肺癌组织 ,与肿瘤的大小及组织学类型无关。 (2 )VEGF在直径≥ 3cm肺癌组织中的表达明显高于直径 <3cm肺癌组织 ,在有淋巴结转移肺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移肺癌组织 ,与肿瘤的组织学类型及分化程度无关。 (3)STAT3与VEGF表达呈显著正相关。结论 :本组资料提示STAT3与VEGF可能在肺癌的发生及转移中发挥重要作用。二者之间的相关性证实VEGF基因直接由STAT3蛋白调节的论点。由此也为目前肿瘤抗血管生成治疗的研究提供了新的证据。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 STAT3 VEGF 免疫组化
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DNA修复基因XRCC1的194位点多态性与晚期非小细胞肺癌铂类化疗敏感性关系的Meta分析 被引量：11
7
作者 李文骏 向华 马庆波 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期2417-2420,共4页
目的探讨晚期非小细胞肺癌患者中XRCC1基因多态性与铂类化疗敏感性的关系。方法电子检索1990年1月—2010年1月VIP、CNKI、CBM、万方数据库、PubMed及EBSCO数据库,收集有关晚期非小细胞肺癌患者的XRCC1 Arg194Trp基因多态性与铂类化疗敏... 目的探讨晚期非小细胞肺癌患者中XRCC1基因多态性与铂类化疗敏感性的关系。方法电子检索1990年1月—2010年1月VIP、CNKI、CBM、万方数据库、PubMed及EBSCO数据库,收集有关晚期非小细胞肺癌患者的XRCC1 Arg194Trp基因多态性与铂类化疗敏感性的文献,以非条件Logistic回归校正年龄、性别、吸烟状况等混杂因素后的OR值为效应指标,对文献进行评价筛选、异质性检验。采用RevMan 4.3软件进行Meta分析,计算合并OR值及其95%可信区间(CI)。结果本次Meta共纳入7篇文献,累计病例915例。其中Arg/Trp和Trp/Trp等位基因同Arg/Arg比较,OR值分别为2.63[95%CI(1.96,3.53)]、2.27[95%CI(1.45,3.56)]。结论晚期非小细胞肺癌患者XRCC1基因第194位变异型(Arg/Trp或Trp/Trp)对铂类化疗敏感性优于野生型(Arg/Arg)。 展开更多
关键词 XRCC1 多态性 单核苷酸 癌 非小细胞肺 铂化合物 META分析
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基于普通USB采集卡的血管壁动态信息远程测控系统 被引量：4
8
作者 陈里里 甘平 +4 位作者 胡雪 邓文阳 邓利芳 贺向前 奉姣 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期49-50,共2页
系统选用非NI公司生产的通用USB数据采集卡,应用虚拟仪器开发平台LabVIEW构建了血管壁动态信息远程测控系统。在Win-dows操作系统的VC++开发平台下,根据USB系统规范,采用Windows操作系统I/0设备驱动原理与动态链接库技术相结合的方法,... 系统选用非NI公司生产的通用USB数据采集卡,应用虚拟仪器开发平台LabVIEW构建了血管壁动态信息远程测控系统。在Win-dows操作系统的VC++开发平台下,根据USB系统规范,采用Windows操作系统I/0设备驱动原理与动态链接库技术相结合的方法,将普通采集卡驱动程序的内核函数封装成动态链接库(DLL)。介绍了通过LabVIEW的网络通信功能把采集到主机的数据进行远程传输的方法。 展开更多
关键词 血管壁动态信息 虚拟仪器技术 动态链接库 网络通信 功率谱 幅度谱
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重庆地区儿童乙型肝炎病毒感染状况分析 被引量：3
9
作者 李小强 刘岚 +5 位作者 曾照芳 龚曼子 魏强 吴扬 郑玉强 陈元 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第12期1317-1319,共3页
目的:初步了解重庆地区儿童乙型肝炎病毒的感染状况。方法:对来重庆医科大学儿童医院就诊的8060例儿童用ELISA方法检测乙肝6项。结果:HBsAg阳性率为4.44%,抗-HBs阳性率为46.56%,两对半全阴性儿童3795人,占47.08%;大三阳259人,占3.21%;... 目的:初步了解重庆地区儿童乙型肝炎病毒的感染状况。方法:对来重庆医科大学儿童医院就诊的8060例儿童用ELISA方法检测乙肝6项。结果:HBsAg阳性率为4.44%,抗-HBs阳性率为46.56%,两对半全阴性儿童3795人,占47.08%;大三阳259人,占3.21%;小三阳80人,占0.99%。Pre-S1阳性率为3.51%。结论:来我院检查的8060例儿童,乙肝病毒感染率为4.44%,低于我国成人乙肝病毒携带率;Pre-S1与HBeAg有一定相关性,能在一定程度上反映乙肝病毒增殖情况和传染性。 展开更多
关键词 儿童 乙肝标志物 HBV
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应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)化学发光法 被引量：6
10
作者 孔海霞 刘萍 +3 位作者 田云霞 宋启超 王世鑫 翁亚光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期201-205,共5页
目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum ... 目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)。用FITC标记T3-类似物。采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,通过非均衡竞争法原理,固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP,通过标准曲线计算FT3浓度,建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(Bovine serum gamma globulin,BGG)包被(非FITC系统)的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测,定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elec-sys 2010)定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99,线性范围0.25～50 pg/ml,分析灵敏度为0.25 pg/ml,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性,相关系数r=0.962 2,两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强,以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,达到临床测定的需求,可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。 展开更多
关键词 异硫氰酸荧光素 非均衡竞争 游离三碘甲腺原氨酸 类似物 多克隆抗体 化学发光分析法
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MIF水平及MIF-173 G/C多态性与结核病关系研究 被引量：2
11
作者 邓少丽 李艳林 +4 位作者 陈鸣 陈伟 黄恒柳 夏季 张海峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期2616-2618,共3页
目的研究结核病患者巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达水平,分析MIF-173G/C多态性与结核杆菌易感性关系。方法选取第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸科2009年9月至2010年9月结核病患者68例及70例健康体... 目的研究结核病患者巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达水平,分析MIF-173G/C多态性与结核杆菌易感性关系。方法选取第三军医大学大坪医院野战外科研究所呼吸科2009年9月至2010年9月结核病患者68例及70例健康体检者,采用RFLP-PCR的方法分析2组MIF-173基因型,ELISA法检测血清中MIF水平。结果结核病组中MIF-173 CC纯合基因型及MIF-173*C等位基因频率较正常对照组明显升高(OR值分别为3.99和1.58,P=0.003和0.02),结核组MIF水平明显高于对照组[(705.21±67.98)pg/mlvs(355.31±57.29)pg/ml,P<0.01],表达水平平均升高1倍左右。结论 MIF-173*C基因型与结核杆菌易感有关,在结核病发病中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 巨噬细胞移动抑制因子 单核苷酸 结核 多态性
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药物干扰检验结果的信息平台构建方法 被引量：6
12
作者 万富明 向华 +1 位作者 贾如琴 汪先桃 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第8期997-999,1002,共4页
目的:研究药物干扰检验结果的信息服务平台构建方法。方法:通过各种网络电子资源平台,收集与药物干扰检验结果有关的文献资料和近年出版的临床检验专著,提取描述药物干扰检验结果信息的特征数据项,并进行规范、编码,构建信息平台,实现... 目的:研究药物干扰检验结果的信息服务平台构建方法。方法:通过各种网络电子资源平台,收集与药物干扰检验结果有关的文献资料和近年出版的临床检验专著,提取描述药物干扰检验结果信息的特征数据项,并进行规范、编码,构建信息平台,实现信息存储和有效利用。结果:基于对文献资源的分析整理,获得了一种面向主题的药物干扰检验结果信息平台构建方案。结论:通过文献资源的有效整合,信息服务主题性更强,可实现信息资源的充分利用,能为临床获取有用信息节约时间和精力。 展开更多
关键词 药物干扰 检验结果 资源整合 信息平台 构建方法
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重庆市公共场所吸烟现状分析及干预对策研究 被引量：9
13
作者 王箭 曾照芳 +1 位作者 吴成斌 顾亮 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期92-93,共2页
目的:了解重庆市公共场所吸烟状况和控烟工作开展情况,为政府制定干预措施提供依据。方法:在全市学校、医院、政府机关、公共交通工具及餐厅等公共场所使用分层随机抽样法进行调查,每类选择5至15个场所,每个场所选10至20个点进行现场观... 目的:了解重庆市公共场所吸烟状况和控烟工作开展情况,为政府制定干预措施提供依据。方法:在全市学校、医院、政府机关、公共交通工具及餐厅等公共场所使用分层随机抽样法进行调查,每类选择5至15个场所,每个场所选10至20个点进行现场观察、在场所内进行15人以上的拦截调查。结果:我市目前吸烟率很高,且男性高于女性:人群二手烟暴露严重;知晓吸烟会引起肺癌、心脏病发作、中风等疾病的比例较高,知晓二手烟会引起相关疾病的比例也较高;支持对公共场所室内全面禁烟的比例从高到低依次为:公共交通工具、学校、医院、办公室、餐厅、酒吧。即便是吸烟者,对全面禁烟的支持率也很高。结论:我市公众对吸烟危害的知晓率较高:但公共场所现行吸烟情况与全面禁止吸烟差距明显,控烟行为形成率差,造成被动吸烟现象普遍、暴露人群很高。需尽快针对目标人群展开控烟工作,扩大控烟覆盖范围,进行健康教育宣传,提高群众控烟意识。须尽快制定《重庆市公共场所控烟条例》加大政策干预强度。 展开更多
关键词 重庆市 吸烟现状 控烟 干预对策
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应用Apriori算法研究2型糖尿病与其并发症的关系 被引量：7
14
作者 程远 曾熙芳 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期82-83,共2页
应用Apriori算法,利用糖尿病筛查数据集中的1473条记录进行关联分析,探讨2型糖尿病与其三种主要并发症(高脂血症、高血压、冠心病)之间的关系。通过计算分析按照密切程度排序,得到2型糖尿病与其三种主要并发症的密切关系为:高血压>... 应用Apriori算法,利用糖尿病筛查数据集中的1473条记录进行关联分析,探讨2型糖尿病与其三种主要并发症(高脂血症、高血压、冠心病)之间的关系。通过计算分析按照密切程度排序,得到2型糖尿病与其三种主要并发症的密切关系为:高血压>冠心病>高脂血症。研究结果结合临床实际,证明利用该方法分析2型糖尿病与其相关并发症的关系是有效的,不仅可以发现隐藏在数据间的信息相关性,还可量化各种相关性的强弱,其结果可为2型糖尿病并发症的早期预防提供参考。 展开更多
关键词 APRIORI算法 关联规则 2型糖尿病 并发症
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RNAi重组体抑制白血病K562细胞系中NPM1基因的表达 被引量：3
15
作者 何鹏 骆展鹏 +3 位作者 张伶 杨松 钟晓明 高玉洁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期938-941,共4页
目的构建核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin1,NPM1)特异性的RNAi真核表达载体,观察对白血病K562细胞系NPM1表达的抑制作用。方法采用RT-PCR检测白血病细胞系(THP1和K562)和急性髓系白血病(AML)细胞NPM1mRNA水平。设计合成2条针对NPM1基因并... 目的构建核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin1,NPM1)特异性的RNAi真核表达载体,观察对白血病K562细胞系NPM1表达的抑制作用。方法采用RT-PCR检测白血病细胞系(THP1和K562)和急性髓系白血病(AML)细胞NPM1mRNA水平。设计合成2条针对NPM1基因并具有小发夹结构的DNA序列,经退火形成互补双链,再克隆至载体pGenSil-1中构建含NPM1的RNAi重组体,经酶切及测序鉴定后通过脂质体转染K562细胞,同时设立pGenSil-1转染组和pGenSil-1/neg转染组。采用RT-PCR检测各组转染细胞中NPM1的mRNA水平。结果白血病细胞系和AML细胞均高表达NPM1 mRNA。针对人NPM1基因的RNAi重组体构建成功,并能够稳定转染K562细胞,导致白血病细胞NPM1mR-NA相对表达量下降64%,而pGenSil-1转染组和pGenSil-1/neg转染组未能下调NPM1表达。结论白血病细胞高表达NPM1基因,其mRNA表达水平能够被靶向NPM1的RNAi重组体特异性地下调。 展开更多
关键词 核仁磷酸蛋白1 RNA干扰 白血病 K562细胞
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外源性重组S100A6蛋白对5株转化细胞系的增殖、迁移能力及β-catenin水平的影响 被引量：2
16
作者 马闻 李星星 +4 位作者 王胜 游莉 郭元元 徐兰兰 周兰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1321-1326,共6页
目的:探讨S100A6对5种转化细胞系株(HEK293、9HTE、CHO、MEF和C3H10T1/2)的增殖、迁移能力和β-catenin水平的影响。方法:通过转化质粒pMoluc-GST-hS100A6到大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达重组S100A6蛋白,为后续实验提供材料;MTT法检测细... 目的:探讨S100A6对5种转化细胞系株(HEK293、9HTE、CHO、MEF和C3H10T1/2)的增殖、迁移能力和β-catenin水平的影响。方法:通过转化质粒pMoluc-GST-hS100A6到大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达重组S100A6蛋白,为后续实验提供材料;MTT法检测细胞增殖,细胞划痕和Transwell法检测细胞迁移,免疫细胞化学法及Western-blotting检测β-catenin表达水平。结果:①通过IPTG诱导表达,从大肠杆菌中收获了高纯度重组S100A6(GST-S100A6);②外源性重组S100A6对作为阳性对照的肿瘤细胞系——人骨肉瘤细胞143B的增殖及迁移均有抑制作用(P<0.05),而对5株转化细胞系的增殖及迁移均无显著影响(P>0.05);③免疫细胞化学法和Western-blotting一致揭示重组S100A6可上调5株转化细胞系的β-catenin水平(P<0.05)。结论:S100A6对5株转化细胞系的增殖、迁移无明显影响,但可上调此5株转化细胞系Wnt/β-catenin水平。 展开更多
关键词 S100A6 转化细胞系 细胞增殖 细胞迁移 Β-CATENIN
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系统性红斑狼疮患者血液中PRDM1和CD138＋浆细胞表达的研究 被引量：2
17
作者 牛晓昶 邓少丽 +1 位作者 曾照芳 贾佳 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期64-66,共3页
目的;探讨系统性红斑狼疮(SlE)患者和正常人之间PRDM1和CD138+浆细胞的差异。方法:40例SLE患者血液标本,30例健康体检血液标本,抽取RNA、利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究PRDMl基因表达;收集外周血单个核细胞,利用流式细胞技术研... 目的;探讨系统性红斑狼疮(SlE)患者和正常人之间PRDM1和CD138+浆细胞的差异。方法:40例SLE患者血液标本,30例健康体检血液标本,抽取RNA、利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究PRDMl基因表达;收集外周血单个核细胞,利用流式细胞技术研究CDl38’浆细胞量的差异。结果:SLE患者组血液中的PRDM1表达量明显高于健康体检组(p<0.05),并且CD138+浆细胞的量也多于健康体检组。结论:SLE实验组中的PRDM1明显高于体检对照组,CD138+浆细胞的量也高于对照组,提示SLE患者中浆细胞数量的增多与PRDMl高表达相关,这为进一步了解SLE发病机制提供了一个新的方向和靶点。 展开更多
关键词 PRDM1 系统性红斑狼疮 逆转录聚合酶链反应 表达
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医用显微图像处理系统的研制和软件开发 被引量：1
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作者 鲍依稀 刘清林 +1 位作者 康格非 罗春丽 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第3期293-295,共3页
目的 建立医用显微图像处理系统。方法 用普通光学显微镜、工业用摄像机、视频卡和计算机等构成硬件系统，用ＶＣ＋＋５．０和微软基础类库（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｃｌａｓｓ，ＭＦＣ）开发了显微图像处理的专用类ＣＤ... 目的 建立医用显微图像处理系统。方法 用普通光学显微镜、工业用摄像机、视频卡和计算机等构成硬件系统，用ＶＣ＋＋５．０和微软基础类库（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｃｌａｓｓ，ＭＦＣ）开发了显微图像处理的专用类ＣＤＩＢ，并结合数据库系统，完成了外周血白细胞分类诊断系统。结果 应用该系统对１３０例病人进行白细胞分类与人工镜检对比，两者结果相符合。结论该系统具有很好的实用价值和推广价值，可广泛应用于骨髓细胞、尿液、胸腹腔及阴道脱落细胞等各种显微图像的处理。 展开更多
关键词 医用显微 图像处理 白细胞分类 图像处理系统
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hepaCAM和VEGF基因表达与肾透明细胞癌侵袭转移关系的探讨 被引量：2
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作者 杨淑哲 罗春丽 +3 位作者 吴小候 潘翠翠 荀春华 蒲军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期157-161,共5页
研究肾癌细胞株786-0,RC-2及肾透明细胞癌组织中肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaC-AM)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达及其与肾透明细胞癌侵袭转移的关系。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测786-0、RC-2、... 研究肾癌细胞株786-0,RC-2及肾透明细胞癌组织中肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaC-AM)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达及其与肾透明细胞癌侵袭转移的关系。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测786-0、RC-2、正常肾组织hepaCAM和VEGFmRNA表达,73例肾透明细胞癌组织及相应癌旁组织中hepaCAMmRNA表达,43例肾透明细胞癌组织及相应癌旁组织VEGFmRNA表达,并比较它们之间的差异性和相关性。与正常肾组织比较786-0,RC-2的hepaCAMmRNA显著降低(P<0.05);VEGFmRNA显著升高(P<0.05)。肾透明细胞癌组织hepaCAMmRNA显著低于癌旁组织(P<0.05);VEGFmRNA显著高于癌旁组织(P<0.05)。在肾透明细胞癌组织中临床Ⅰ+Ⅱ期和Ⅲ+Ⅳ期两组VEGFmRNA表达差异具有统计学意义(P<0.05),hepaCAM与VEGFmRNA呈负相关(r=-0.329,P<0.05)。提示hepaC-AM基因缺失可能参与肾透明细胞癌侵袭转移,其机制可能与调节VFGF表达改变有关,hepaCAM有望成为一种新的肾癌基因治疗的靶分子。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 hepaCAM VEGF 侵袭转移
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抑制和激活Wnt信号通路对甾醇类新药NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化的影响 被引量：1
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作者 王伟佳 张秀明 +1 位作者 张彦 王晋蜀 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期341-346,共6页
目的:探讨抑制和激活Wnt信号通路在甾醇类新药NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化中的作用和可能机制。方法:用5、10和20μmol/L的Wnt信号通路抑制剂XAV-939作用于HL-60细胞3 d,用10、20和30mmol/L的Wnt信号通路激活剂Li Cl作用于HL-60细... 目的:探讨抑制和激活Wnt信号通路在甾醇类新药NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化中的作用和可能机制。方法:用5、10和20μmol/L的Wnt信号通路抑制剂XAV-939作用于HL-60细胞3 d,用10、20和30mmol/L的Wnt信号通路激活剂Li Cl作用于HL-60细胞1 d,应用RT-RCR和Western blot检测Wnt信号通路的下游靶点基因和蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD14的表达和细胞早期凋亡,筛选最佳抑制浓度和激活浓度。然后用10μmol/L NSC67657分别对已经抑制及激活了的Wnt通路的HL-60细胞作用3 d。分析比较空白对照组、NSC67657单独处理组和激活/抑制剂作用后NSC67657处理组的细胞表面抗原CD14和Wnt下游靶点蛋白的表达水平。结果:20μmol/L XAV-939和20 mmol/L Li Cl能分别有效抑制和激活HL-60细胞Wnt信号通路,分别显著下调和上调cyclin D1,TCF1,c-Jun基因(P<0.05)和蛋白(P<0.05)的表达,且在该条件下CD14^+HL-60细胞不超过1%,没有早期凋亡发生;NSC67657单独作用HL-60细胞能下调Wnt通路下游靶点cyclin D1、TCF1和c-Jun的蛋白表达(P<0.05),CD14^+细胞占(62.13±9.44)%;NSC67657作用于经XAV-939预处理的细胞,可使CD14^+细胞达到(84.17±5.39)%,cyclin D1,TCF1和c-Jun蛋白表达比单独NSC67657处理组降低更显著(P<0.01);而NSC67657作用经Li Cl预处理的细胞,可使CD14^+细胞减少至(33.99±8.37)%,cyclin D1,TCF1和c-Jun蛋白表达较非处理组下降明显较低(P<0.05),但高于单独使用NSC67657处理组(P<0.05)。结论:20μmol/L XAV-939和20 mmol/L Li Cl作为HL-60细胞Wnt信号通路的有效抑制剂和激活剂能够分别显著下调和上调Wnt下游通路靶点基因和蛋白表达,其干预后对NSC67657诱导细胞分化的影响提示Wnt信号通路可能在NSC67657诱导HL-60细胞单核系分化中起到关键作用。 展开更多
关键词 信号通路激活 信号通路抑制 NSC67657 单核系分化
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