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JAG1影响单核-巨噬细胞重塑三阴性乳腺癌转移前微环境:基于外泌体中的LncRNA MALAT1
被引量：
2
1
作者
徐梦歧
石宇彤
+4 位作者
刘俊平
吴敏敏
张凤梅
何志强
唐敏
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第9期1525-1535,共11页
目的探讨JAG1对单核-巨噬细胞在三阴性乳腺癌(TNBC)中肿瘤转移前微环境(PMN)中作用的影响及其可能的调控机制,以期为TNBC诊疗提供新的思路和靶点。方法人TNBC细胞MDA-MB-231,MDA-MB-231B体外培养,qRT-PCR检测JAG1的表达。动物实验将雌...
目的探讨JAG1对单核-巨噬细胞在三阴性乳腺癌(TNBC)中肿瘤转移前微环境(PMN)中作用的影响及其可能的调控机制,以期为TNBC诊疗提供新的思路和靶点。方法人TNBC细胞MDA-MB-231,MDA-MB-231B体外培养,qRT-PCR检测JAG1的表达。动物实验将雌性裸鼠分为MDA-MB-231组和MDA-MB-231B组,5只/组,分别往乳腺脂肪垫注射细胞5×10^(6),6周取肿瘤组织进行免疫组化分析。人源单核细胞THP-1为研究对象,分别经人源JAG1重组蛋白(rhJAG1)直接处理或经TNBC条件培养基(CM)处理,通过单核-内皮粘附、Transwell、qRT-PCR和Western blot实验检测JAG1对单核细胞的直接作用和在PMN中的影响。实验分为5组:Control组:THP-1正常培养;231-CM组:THP-1+231-CM;231-JAG1-CM组:THP-1+rhJAG1处理后231-CM;231B-CM组:THP-1+231B-CM;231-DAPT-CM组:THP-1+DAPT处理后231-CM。透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)检测JAG1对TNBC外泌体分泌影响。生物信息学筛选与LncRNA MALAT1相互作用的miRNA并行qRT-PCR验证。结果与MDA-MB-231相比,侵袭株MDA-MB-231B的JAG1表达更高(P<0.01),肝转移面积更大;rhJAG1直接处理和TNBC条件培养基处理均能促进单核细胞的黏附、迁移,并影响其分化(均P<0.05);透射电镜和NTA检测显示JAG1能促进MDA-MB-231外泌体分泌数量增多(P<0.01),外泌体中LncRNAMALAT1含量升高(P<0.0001)。生物信息学分析得到与LncRNA MALAT1和JAG1相关的5个候选miRNA,实验证实miR-26a-5p在TMN中的单核-巨噬细胞中受到MALAT1的靶向调控(P<0.0001)。结论JAG1能促进TNBC的外泌体分泌并影响其中Lnc MALAT1的表达,从而靶向PMN中单核-巨噬细胞miR-26a-5p的表达,从而使单核-巨噬细胞中JAG1表达升高,进而影响单核-巨噬细胞在PMN中的黏附、迁移和破骨分化作用。
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关键词
JAG1
三阴性乳腺癌
单核-巨噬细胞
外泌体
肿瘤转移前微环境
LncRNA
MALAT1
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职称材料
CCN3对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响
2
作者
陈世钰
苏欣
+5 位作者
刘俊平
石宇彤
吴敏敏
徐梦歧
张凤梅
唐敏
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期79-86,共8页
目的探究肾母细胞瘤过表达因子(NOV/CCN3)对间充质干细胞增殖的影响及调控机制,为CCN3能否作为促增殖因子在骨组织工程的应用提供理论依据。方法以小鼠成纤维细胞(MEFs)为间充质干细胞模型,利用重组腺病毒Ad-CCN3和AdsiCCN3分别上调、下...
目的探究肾母细胞瘤过表达因子(NOV/CCN3)对间充质干细胞增殖的影响及调控机制,为CCN3能否作为促增殖因子在骨组织工程的应用提供理论依据。方法以小鼠成纤维细胞(MEFs)为间充质干细胞模型,利用重组腺病毒Ad-CCN3和AdsiCCN3分别上调、下调MEFs中CCN3表达;流式细胞术检测不同处理组细胞周期、凋亡变化情况;Western blot检测增殖指标PCNA、周期蛋白cyclin E、cyclin B1以及凋亡指标Bax、Bcl-2蛋白表达量,明确CCN3对MEFs增殖和凋亡的影响;ELISA检测CCN3蛋白分泌水平;RT-qPCR和Western blot检测Notch信号通路经典受体Notch1、配体DLL1、下游关键蛋白和/或基因Hey1、p300、H3K9,以及MAPK通路相关蛋白ERK1+2和p-ERK1+2表达变化情况。结果流式细胞术结果显示:与对照组相比,Ad-CCN3组细胞增殖指数增加(P<0.01),细胞凋亡百分比减少(P<0.05);且相关增殖凋亡指标PCNA、cyclin E、Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05);RT-qPCR和Western blot结果显示过表达CCN3明显促进Notch信号通路中Notch1表达(P<0.01),但抑制DLL1和Hey1、p300、H3K9等表达(P<0.05);而MAPK通路中ERK1+2和p-ERK1+2蛋白表达增加(P<0.01)。结论CCN3可能通过与Notch1结合,抑制经典Notch信号通路,激活MAPK通路,促进MEFs增殖、抑制细胞凋亡,从而增加MEFs细胞数量,提示CCN3具有作为间充质干细胞的促增殖因子在骨组织工程发挥作用的潜在价值。
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关键词
CCN3
NOTCH
间充质干细胞
细胞增殖
细胞凋亡
胚胎成纤维细胞
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职称材料
题名
JAG1影响单核-巨噬细胞重塑三阴性乳腺癌转移前微环境:基于外泌体中的LncRNA MALAT1
被引量：
2
1
作者
徐梦歧
石宇彤
刘俊平
吴敏敏
张凤梅
何志强
唐敏
机构
重庆医科大学检验医学院//临床检验诊断学教育部重点实验室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第9期1525-1535,共11页
基金
重庆市自然科学基金(cstc2019jcyj-msxmX0542)。
文摘
目的探讨JAG1对单核-巨噬细胞在三阴性乳腺癌(TNBC)中肿瘤转移前微环境(PMN)中作用的影响及其可能的调控机制,以期为TNBC诊疗提供新的思路和靶点。方法人TNBC细胞MDA-MB-231,MDA-MB-231B体外培养,qRT-PCR检测JAG1的表达。动物实验将雌性裸鼠分为MDA-MB-231组和MDA-MB-231B组,5只/组,分别往乳腺脂肪垫注射细胞5×10^(6),6周取肿瘤组织进行免疫组化分析。人源单核细胞THP-1为研究对象,分别经人源JAG1重组蛋白(rhJAG1)直接处理或经TNBC条件培养基(CM)处理,通过单核-内皮粘附、Transwell、qRT-PCR和Western blot实验检测JAG1对单核细胞的直接作用和在PMN中的影响。实验分为5组:Control组:THP-1正常培养;231-CM组:THP-1+231-CM;231-JAG1-CM组:THP-1+rhJAG1处理后231-CM;231B-CM组:THP-1+231B-CM;231-DAPT-CM组:THP-1+DAPT处理后231-CM。透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)检测JAG1对TNBC外泌体分泌影响。生物信息学筛选与LncRNA MALAT1相互作用的miRNA并行qRT-PCR验证。结果与MDA-MB-231相比,侵袭株MDA-MB-231B的JAG1表达更高(P<0.01),肝转移面积更大;rhJAG1直接处理和TNBC条件培养基处理均能促进单核细胞的黏附、迁移,并影响其分化(均P<0.05);透射电镜和NTA检测显示JAG1能促进MDA-MB-231外泌体分泌数量增多(P<0.01),外泌体中LncRNAMALAT1含量升高(P<0.0001)。生物信息学分析得到与LncRNA MALAT1和JAG1相关的5个候选miRNA,实验证实miR-26a-5p在TMN中的单核-巨噬细胞中受到MALAT1的靶向调控(P<0.0001)。结论JAG1能促进TNBC的外泌体分泌并影响其中Lnc MALAT1的表达,从而靶向PMN中单核-巨噬细胞miR-26a-5p的表达,从而使单核-巨噬细胞中JAG1表达升高,进而影响单核-巨噬细胞在PMN中的黏附、迁移和破骨分化作用。
关键词
JAG1
三阴性乳腺癌
单核-巨噬细胞
外泌体
肿瘤转移前微环境
LncRNA
MALAT1
Keywords
JAG1
triple-negative breast cancer
monocytes-macrophages
exosomes
pre-metastatic niche
long non-coding RNAMALAT1
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
CCN3对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响
2
作者
陈世钰
苏欣
刘俊平
石宇彤
吴敏敏
徐梦歧
张凤梅
唐敏
机构
重庆医科大学检验医学院//临床检验诊断学教育部重点实验室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期79-86,共8页
基金
重庆市科委自然科学基金(cstc2017jcyjAX0428)
重庆市渝中区基金和科技前沿项目(20170108)资助的课题。
文摘
目的探究肾母细胞瘤过表达因子(NOV/CCN3)对间充质干细胞增殖的影响及调控机制,为CCN3能否作为促增殖因子在骨组织工程的应用提供理论依据。方法以小鼠成纤维细胞(MEFs)为间充质干细胞模型,利用重组腺病毒Ad-CCN3和AdsiCCN3分别上调、下调MEFs中CCN3表达;流式细胞术检测不同处理组细胞周期、凋亡变化情况;Western blot检测增殖指标PCNA、周期蛋白cyclin E、cyclin B1以及凋亡指标Bax、Bcl-2蛋白表达量,明确CCN3对MEFs增殖和凋亡的影响;ELISA检测CCN3蛋白分泌水平;RT-qPCR和Western blot检测Notch信号通路经典受体Notch1、配体DLL1、下游关键蛋白和/或基因Hey1、p300、H3K9,以及MAPK通路相关蛋白ERK1+2和p-ERK1+2表达变化情况。结果流式细胞术结果显示:与对照组相比,Ad-CCN3组细胞增殖指数增加(P<0.01),细胞凋亡百分比减少(P<0.05);且相关增殖凋亡指标PCNA、cyclin E、Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05);RT-qPCR和Western blot结果显示过表达CCN3明显促进Notch信号通路中Notch1表达(P<0.01),但抑制DLL1和Hey1、p300、H3K9等表达(P<0.05);而MAPK通路中ERK1+2和p-ERK1+2蛋白表达增加(P<0.01)。结论CCN3可能通过与Notch1结合,抑制经典Notch信号通路,激活MAPK通路,促进MEFs增殖、抑制细胞凋亡,从而增加MEFs细胞数量,提示CCN3具有作为间充质干细胞的促增殖因子在骨组织工程发挥作用的潜在价值。
关键词
CCN3
NOTCH
间充质干细胞
细胞增殖
细胞凋亡
胚胎成纤维细胞
Keywords
CCN3
Notch
mesenchymal stem cells
cell proliferation
cell apoptosis
embryonic fibroblasts
分类号
R683 [医药卫生—骨科学]
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职称材料
题名
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出处
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被引量
操作
1
JAG1影响单核-巨噬细胞重塑三阴性乳腺癌转移前微环境:基于外泌体中的LncRNA MALAT1
徐梦歧
石宇彤
刘俊平
吴敏敏
张凤梅
何志强
唐敏
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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职称材料
2
CCN3对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响
陈世钰
苏欣
刘俊平
石宇彤
吴敏敏
徐梦歧
张凤梅
唐敏
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
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