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反向线性探针杂交在检测实验动物沙门菌中的研究被引量：2: 1; 作者魏立雯韦莉 +4 位作者张文露潘永全谭毅赖国旗徐永柱《四川动物》 CSCD 北大核心 2013年第2期195-198,共4页; 目的建立简便、快速、准确、灵敏、特异的沙门菌检测方法。方法根据沙门菌argT基因序列设计通用引物和3'、5'均加有polyC的特异性探针。上游引物5'标记生物素,将探针线性固定在硝酸纤维素膜上,使沙门菌PCR扩增产物与探针进... 展开更多; 关键词沙门菌实验动物聚合酶链反应反向线性探针杂交; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子小鼠体内的表达分析: 2; 作者王增产张小花 +3 位作者万涛王李英刘湘汤华《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期332-334,共3页; 目的:分析鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor,AZI)在小鼠体内的表达情况。方法:RT-PCR,Northern blot,免疫组化染色。结果:RT-PCR,Northern blot揭示AZT基因(Oazin)的表达是全身性的,即各器官都表达... 展开更多; 关键词鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

靶向shRNA表达载体构建方式的比较研究: 3; 作者王祎琴张文露 +1 位作者张秉强洪苏玲《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第1期105-107,共3页; 目的:探讨两种构建shRNA表达载体方法的不同,寻找更加稳定方便的靶向shRNA表达载体的构建方式。方法:比较构建shRNA表达载体传统方法双链退火法和新方法双链PCR法的设计原则、构建方法和鉴定结果的不同。结果:两种方法均能得到重组质粒... 展开更多; 关键词 RNA干扰克隆载体方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

稀有密码子对人源Id2基因表达的影响被引量：4: 4; 作者杨伟周华 +5 位作者赵沙沙金丽郭珍张绍城陈检汪德强《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期365-369,共5页; 目的:通过对人Id2基因的稀有密码子进行突变并构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)中表达Id2蛋白,分析稀有密码子对Id2基因表达的影响。方法:PCR扩增突变Id2基因序列,然后转入E.coli BL21中进行表达,利用镍离子... 展开更多; 关键词 ID2 突变表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

miR-499a在肝癌细胞中的表达及其靶基因的研究被引量：1: 5; 作者张靖南曹漪伊 +4 位作者王丹吴婷熊冬梅黄爱龙汤华《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2455-2458,共4页; 目的探讨HBV、miR-499a及CFLAR在肝癌细胞中的关系。方法通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-499a在有HBV复制的肝癌细胞中的表达;通过Real-time PCR、双荧光素酶报告系统、Westernblot证明CFLAR是否为miR-499a的靶基因。... 展开更多; 关键词 HBV miR-499a CFLAR HCC; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名反向线性探针杂交在检测实验动物沙门菌中的研究被引量：2: 1; 作者魏立雯韦莉张文露潘永全谭毅赖国旗徐永柱; 机构重庆医科大学实验动物中心重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室重庆市卫生服务中心; 出处《四川动物》 CSCD 北大核心 2013年第2期195-198,共4页; 基金重庆市科委科技创新能力建设项目<重庆市啮齿类实验动物工程技术研究中心>CSTC 2010CB5013 科技部项目<重庆创新药物孵化基地实验动物服务平台>2010ZX09401-306-1-6; 文摘目的建立简便、快速、准确、灵敏、特异的沙门菌检测方法。方法根据沙门菌argT基因序列设计通用引物和3'、5'均加有polyC的特异性探针。上游引物5'标记生物素,将探针线性固定在硝酸纤维素膜上,使沙门菌PCR扩增产物与探针进行杂交,通过优化杂交条件,建立反向线性探针杂交检测方法。利用该方法对重庆地区74只实验动物进行检测,同时与传统分离培养方法比较。结果反向线性探针杂交方法灵敏度高,对沙门菌PCR扩增产物在3ng/μL以上可有效检测。从细菌分离培养及DNA提取到PCR扩增及反向杂交结束仅需27h。该检测方法特异性高,对6种非沙门菌的检测中,其特异性为100%。应用传统分离培养方法和反向线性探针杂交方法分别检测42只KM小鼠和32只SD大鼠,两种方法检测结果一致性为100%。结论反向线性探针杂交检测方法,具有快速、可靠、敏感和特异的特点,可用于沙门菌感染时的检测,适合应用于实验动物沙门菌的监测。; 关键词沙门菌实验动物聚合酶链反应反向线性探针杂交; Keywords salmonella laboratory animals polymerase chain reaction RLPH; 分类号 Q95-331 [生物学—动物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子小鼠体内的表达分析: 2; 作者王增产张小花万涛王李英刘湘汤华; 机构重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期332-334,共3页; 基金国家自然科学基金(编号:30671080) 重庆市科委项目(编号:CSTC 2008BB5237); 文摘目的:分析鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子(Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor,AZI)在小鼠体内的表达情况。方法:RT-PCR,Northern blot,免疫组化染色。结果:RT-PCR,Northern blot揭示AZT基因(Oazin)的表达是全身性的,即各器官都表达。特别是脑,心,肾脏,肌肉,胸腺,睾丸。免疫组化染色显示AZT蛋白在心瓣膜细胞,肾小管周围的间质细胞以及肝细胞的间质细胞中高表达。结论:用RT-PCR,Northern blot以及免疫组化染色法揭示了AZT在RNA和蛋白水平小鼠体内中的表达情况。; 关键词鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子表达; Keywords Ornithine decarboxylase antizyme inhibitor（AZI） Expression; 分类号 R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名靶向shRNA表达载体构建方式的比较研究: 3; 作者王祎琴张文露张秉强洪苏玲; 机构重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第1期105-107,共3页; 文摘目的:探讨两种构建shRNA表达载体方法的不同,寻找更加稳定方便的靶向shRNA表达载体的构建方式。方法:比较构建shRNA表达载体传统方法双链退火法和新方法双链PCR法的设计原则、构建方法和鉴定结果的不同。结果:两种方法均能得到重组质粒,但是双链PCR法构建效率高且不易引起碱基的缺失和突变。结论:双链PCR法构建shRNA表达载体比传统双链退火法更加稳定,构建成功率较双链退火法高。; 关键词 RNA干扰克隆载体方法; Keywords RNA interference Cloning vectors Methods; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名稀有密码子对人源Id2基因表达的影响被引量：4: 4; 作者杨伟周华赵沙沙金丽郭珍张绍城陈检汪德强; 机构重庆医科大学感染性疾病分子生物学重点实验室重庆医科大学附属第二医院检验科重庆医科大学附属第一医院心内科; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期365-369,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:30970563); 文摘目的:通过对人Id2基因的稀有密码子进行突变并构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)中表达Id2蛋白,分析稀有密码子对Id2基因表达的影响。方法:PCR扩增突变Id2基因序列,然后转入E.coli BL21中进行表达,利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化。结果:正确构建了Id2基因的基因突变表达质粒,基因突变表达的Id2蛋白在E.coli BL21中为可溶性上清表达,成功纯化了目的蛋白,且分子筛结果显示其在溶液中呈现二聚体状态。结论:稀有密码子对Id2蛋白在E.coli BL21中大量可溶性上清表达有重要影响。; 关键词 ID2 突变表达纯化; Keywords Id2 mutation expression purification; 分类号 Q71 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名miR-499a在肝癌细胞中的表达及其靶基因的研究被引量：1: 5; 作者张靖南曹漪伊王丹吴婷熊冬梅黄爱龙汤华; 机构重庆医科大学感染性疾病与分子生物学重点实验室; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2455-2458,共4页; 基金重庆市自然科学基金(2010BB5359)~~; 文摘目的探讨HBV、miR-499a及CFLAR在肝癌细胞中的关系。方法通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-499a在有HBV复制的肝癌细胞中的表达;通过Real-time PCR、双荧光素酶报告系统、Westernblot证明CFLAR是否为miR-499a的靶基因。结果 miR-499a在Hep G2.2.15细胞中的表达高于Hep G2细胞,在Ad-HBVHep G2细胞中的表达高于Ad-GFP-Hep G2细胞;过表达miR-499a之后在mRNA和蛋白水平发现CFLAR表达降低,抑制miR-499a表达之后在mRNA和蛋白水平发现CFLAR表达升高;miR-499a通过与CFLAR的3’UTR作用来抑制其表达;HBV在mRNA水平降低CFLAR的表达。结论在肝癌细胞中HBV上调miR-499a的表达,CFLAR是miR-499a的靶基因。; 关键词 HBV miR-499a CFLAR HCC; Keywords hepatitis B virus； miR-499a； CASP8 and FADD-like apoptosis regulator； hepatoma cells; 分类号 R394-33 [医药卫生—医学遗传学] R394.3 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	反向线性探针杂交在检测实验动物沙门菌中的研究	魏立雯韦莉张文露潘永全谭毅赖国旗徐永柱	《四川动物》 CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制子小鼠体内的表达分析	王增产张小花万涛王李英刘湘汤华	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	靶向shRNA表达载体构建方式的比较研究	王祎琴张文露张秉强洪苏玲	《生物技术通报》 CAS CSCD	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	稀有密码子对人源Id2基因表达的影响	杨伟周华赵沙沙金丽郭珍张绍城陈检汪德强	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	miR-499a在肝癌细胞中的表达及其靶基因的研究	张靖南曹漪伊王丹吴婷熊冬梅黄爱龙汤华	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料