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阿托伐他汀不依赖降血脂的肾脏保护作用 被引量:7
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作者 徐珍娥 闫凤 +2 位作者 阮雄中 陈压西 李秋 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期734-738,共5页
目的探讨阿托伐他汀不依赖降血脂的肾脏保护作用的可能机制。方法雄性C57BL小鼠给予普通饮食作为对照组,CD36/SR-A/ApoE三敲小鼠随机分为高脂组和治疗组(高脂+阿托伐他汀)。实验满14周后处死取标本。采用酶法检测血清脂质水平;油红"... 目的探讨阿托伐他汀不依赖降血脂的肾脏保护作用的可能机制。方法雄性C57BL小鼠给予普通饮食作为对照组,CD36/SR-A/ApoE三敲小鼠随机分为高脂组和治疗组(高脂+阿托伐他汀)。实验满14周后处死取标本。采用酶法检测血清脂质水平;油红"O"染色检测肾组织内脂质沉积情况,H-E、PAS、Masson染色观察肾脏形态学改变;定量PCR技术与免疫组化检测肾组织转化生长因子(TGF-β)、纤维连接蛋白(fibronectin)、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、α肌动蛋白(α-SMA)表达。结果阿托伐他汀能够减少三敲小鼠肾脏组织脂质沉积,但血清中的脂质水平无明显降低。阿托伐他汀可以减少高脂饮食诱导的肾脏组织系膜细胞的增生、系膜基质的沉积,肾小管间质炎症细胞的浸润、肾小管的变性扩张,细胞外基质的沉积。阿托伐他汀不但可以明显降低肾脏组织TGF-β的基因与蛋白表达,还降低纤维化相关因子的基因与蛋白表达。结论阿托伐他汀可不依赖降血脂,独立于SR-A、CD36受体途径而发挥肾脏保护作用;这种作用可能是通过降低TGF-β的表达而实现的。 展开更多
关键词 阿托伐他汀 高脂血症 肾小球硬化症 转化生长因子Β A类清道夫受体 CD36抗原
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高脂饮食诱导ApoE/CD36/SR-A三敲除小鼠肾脏损害及其机制 被引量:1
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作者 徐珍娥 闫凤 +2 位作者 阮雄中 陈压西 李秋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第17期1828-1833,共6页
目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白(low density lipoprotein receptor-related protein,LRP1)、清道夫受体CD36、SR-A在脂质诱导肾脏损伤中的作用。方法雄性ApoE/CD36/SR-A三敲除小鼠12只,按随机数字表法分为普通组和高脂组。检测血清... 目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白(low density lipoprotein receptor-related protein,LRP1)、清道夫受体CD36、SR-A在脂质诱导肾脏损伤中的作用。方法雄性ApoE/CD36/SR-A三敲除小鼠12只,按随机数字表法分为普通组和高脂组。检测血清淀粉样蛋白(serum amyloid A protein,SAA),IL-6、脂质水平及尿蛋白。油红"O"染色及酶法检测肾组织内脂质沉积情况。HE、过碘酸-希夫(periodic acid Schiff reaction,PAS)、马松(Masson)方法观察肾脏形态学改变,定量PCR技术,Western blot与免疫组化技术检测肾组织相关因子水平。结果高脂组脂质水平[TC(51.96±5.60)、LDL(16.79±4.80)mmol/L]显著高于普通组[TC(18.11±3.07)、LDL(3.27±1.79)mmol/L](P<0.05)。肾脏脂质的沉积明显升高,高脂组尿蛋白[(2.90±0.50)mg/ml]显著高于普通组[(1.85±0.18)mg/ml](P<0.05),肾脏病理改变显著,进一步检测发现高脂组上调了LRP1(增高2.23倍)、肾脏Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子(TGF-β)、纤维连接蛋白(Fibronectin)mRNA与蛋白的表达。结论 LRP1可能参与肾脏泡沫细胞的形成及肾脏的损伤,SR-A,CD36不能解释泡沫细胞形成的全部机制。 展开更多
关键词 脂质 肾小球硬化 ApoE/CD36/SR-A敲小鼠 低密度脂蛋白受体相关蛋白
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Api6在高脂高胆固醇饮食引起肺部炎症中所发挥作用的研究
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作者 张恋 方严 +2 位作者 陈婷 陈可 练雪梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期853-858,共6页
的:研究凋亡抑制园子6(Api6)在高脂高胆固醇饮食所致C57BL/6J小鼠肺部炎症反应中的作 用。方法:6-8周龄的C57BLl6J雄性小鼠喂养于SPF环境中,随机分成2组,分别给予普通饮食和高脂高胆固醇 饮食喂养。喂养16周后收集肺组织并采用免... 的:研究凋亡抑制园子6(Api6)在高脂高胆固醇饮食所致C57BL/6J小鼠肺部炎症反应中的作 用。方法:6-8周龄的C57BLl6J雄性小鼠喂养于SPF环境中,随机分成2组,分别给予普通饮食和高脂高胆固醇 饮食喂养。喂养16周后收集肺组织并采用免疫组织化学和ELISA法鉴定肺组织的炎症状态。实时定量PCR和Western blotting鉴定Api6 mRNA与蛋白的表达水平,流式细胞术检测小鼠支气管肺泡灌洗液细胞凋亡情况。体外培养H噬细胞RAW264.7,流式细胞术检测Api6对氧化型低密度脂蛋白( oxLDL)引起的细胞凋亡的影响。结果:高脂高胆固醇饮食喂养小鼠16周后,C57BL/6J小鼠肺组织出现以巨噬细胞蓄积以及肿瘤坏死因子α和单核细胞趋化蛋白1升高为主的炎症反应。与普通饮食组相比,高脂高胆固醇饮食喂养小鼠肺组织的Api6mRNA和蛋白表 达水平都显著上调(P〈0.01),同时支气管肺泡灌洗液中的巨噬细胞凋亡水平明显下降(P〈0.01)。体外实验证实500μg/L的重组Api6处理RAW264.7细胞可显著抑制oxLDL引起的细胞凋亡(P〈0.05)。结论:高脂高胆固醇饮食可致C57BL/6J小鼠肺组织巨噬细胞蓄积,其机制可能与Api6抑制巨噬细胞的凋亡有关。 展开更多
关键词 高脂高胆固醇饮食 凋亡抑制因子6 细胞凋亡 氧化型低密度脂蛋白 巨噬细胞
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人Api6融合蛋白原核表达系统的构建
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作者 方严 练雪梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1069-1072,共4页
目的:本研究拟采用蛋白原核表达的方法,诱导表达人Api6(Apoptosis inhibitor 6)融合蛋白,为进一步研究Api6在凋亡抑制、脂质代谢和肿瘤发生中的作用奠定基础。方法:利用PCR技术扩增人Api6基因,将其克隆至原核表达载体ppSUMO,构建重... 目的:本研究拟采用蛋白原核表达的方法,诱导表达人Api6(Apoptosis inhibitor 6)融合蛋白,为进一步研究Api6在凋亡抑制、脂质代谢和肿瘤发生中的作用奠定基础。方法:利用PCR技术扩增人Api6基因,将其克隆至原核表达载体ppSUMO,构建重组质粒ppSUMO-Api6;重组质粒转化原核表达宿主菌E.coli Rosetta感受态;采用蛋白原核表达的方法,不同诱导前菌液浓度,不同温度、不同异丙基硫化半乳糖苷(Isopropy1-β-D-thiogalaotopyrano-side,IPTG)浓度、不同诱导时间,筛选诱导表达Api6重组蛋白的最优条件;Western blot鉴定其表达情况。结果:成功构建重组质粒ppSUMO-Api6;成功诱导Api6重组蛋白的原核表达,表达的最优条件为:OD600=0.5~0.8的重组菌,16℃、0.5 mmol/L IPTG诱导16 h。结论:含有人Api6 cDNA全长序列的重组质粒ppSUMO-Api6,经转化原核表达宿主菌E.coli Rosetta感受态细胞,在诱导前菌液OD600=0.5~0.8、16℃、0.5 mmol/LIPTG、诱导16 h这一优化的诱导条件下,重组菌ppSUMO-Api6-Rosetta可诱导重组蛋白ppSUMO-Api6的原核表达。 展开更多
关键词 凋亡抑制因子6 原核表达 融合蛋白
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