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胚胎中脑神经干细胞的培养及分化条件探讨
1
作者
晋贞超
邓小兰
+5 位作者
刘品月
袁莉
姜蓉
王健
王亚平
郑敏
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期46-50,共5页
目的：探讨神经干细胞（neural stem cells,NSCs）的培养方法以及各种条件对NSCs生长状况的影响。方法：取SD大鼠胚胎中脑,在含细胞因子碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,b FGF）和内皮细胞生长因子（epidermal ...
目的：探讨神经干细胞（neural stem cells,NSCs）的培养方法以及各种条件对NSCs生长状况的影响。方法：取SD大鼠胚胎中脑,在含细胞因子碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,b FGF）和内皮细胞生长因子（epidermal growth factor,EGF）的无血清培养基中培养扩增,得到的神经球用神经巢蛋白nestin抗体鉴定和5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-bromo-2-deoxy uridine,Brdu）掺入检测增殖能力。血清诱导分化后用免疫荧光做星形胶质细胞酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）和神经元特异性Ⅲ型微管蛋白（neuron-specific classⅢβ-tubulin,β-Ⅲ-tublin）的双标检测。研究进一步观察了细胞因子b FGF和EGF单用及合用对克隆形成数量的影响及不同接种密度和白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor,LIF）对细胞生长的影响。结果：神经球nestin免疫荧光表达显示强阳性;Brdu掺入实验显示神经球细胞具有很好的增殖能力;分化后免疫双标结果得到了GFAP（68.32±5.70）%和β-Ⅲ-tublin（21.65±3.40）%的阳性表达;当2种因子同时存在时细胞克隆数量优于单因子作用组（P﹤0.05,与EGF组比较;P〈0.01,与b FGF组比较）;与对照组比较LIF作用组细胞数量明显增多（F=2 630.114,P=0.000）;细胞接种密度对神经球的数量有明显影响（F=155.100,P=0.001）,在（0.5~16.0）×105个/ml密度范围内,神经球数量随着接种密度增加而增加。结论：b FGF和EGF 2种细胞因子对NSCs的生长是必须的;长期传代过程中LIF能促进NSCs的生长;NSCs生长有密度依赖性,但接种密度应该控制在适宜范围内。
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关键词
神经干细胞
细胞培养
分化
白血病抑制因子
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职称材料
犬左心房与肺静脉自主神经的分布特征及其临床意义
被引量：
5
2
作者
高崇瀚
汪飞
+2 位作者
姜蓉
张进
殷跃辉
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2011年第2期197-201,共5页
目的定量研究犬左心房(LA)及肺静脉(PV)不同区域心脏自主神经的分布,并探讨其在心房颤动中的意义。方法 8只健康成年杂种犬于急性生理实验后立即处死,分别收集左心房后壁(PLA)、左心房顶(LAR)、左心房前壁(ALA)、房间隔(IAS)、左心耳(L...
目的定量研究犬左心房(LA)及肺静脉(PV)不同区域心脏自主神经的分布,并探讨其在心房颤动中的意义。方法 8只健康成年杂种犬于急性生理实验后立即处死,分别收集左心房后壁(PLA)、左心房顶(LAR)、左心房前壁(ALA)、房间隔(IAS)、左心耳(LAA)及肺静脉(PV),免疫组化染色分别标记交感、副交感神经,定量测定不同区域交感、副交感神经密度。结果交感、副交感神经在左心房和肺静脉不同区域间的分布相似。不同区域交感神经密度,除PV vs.PLA(P=0.211),IAS vs.LAR(P=0.140)及LAR vs.ALA(P=0.204)外,其余区域两两比较均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);不同区域副交感神经密度,除PV vs.PLA(P=0.256),IAS vs.LAR(P=0.130),LAR vs.ALA(P=0.238)及ALA vs.LAA(P=0.124)外,其余区域两两比较均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),不同区域交感、副交感神经密度由高至低依次均为:PLA>PV>IAS>LAR>ALA>LAA。交感、副交感神经密度从心房及肺静脉组织外层、心肌层至内层呈梯度下降,两两比较均有统计学意义(P<0.001)。肺静脉近端交感、副交感神经密度明显高于远端(P<0.001)。结论心脏自主神经在LA及PV呈区域异质性分布,这与房颤的发生及维持密切相关,在房颤的消融治疗中可能具有重要意义。
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关键词
心房颤动
心脏自主神经
左心房
肺静脉
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职称材料
题名
胚胎中脑神经干细胞的培养及分化条件探讨
1
作者
晋贞超
邓小兰
刘品月
袁莉
姜蓉
王健
王亚平
郑敏
机构
重庆医科大学干细胞与组织工程研究所
干细胞
研究
平台
重庆医科大学
附属第二医院神经内科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期46-50,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:31100985)
重庆市自然科学基金资助项目(编号:cstc2010BB5096)
文摘
目的：探讨神经干细胞（neural stem cells,NSCs）的培养方法以及各种条件对NSCs生长状况的影响。方法：取SD大鼠胚胎中脑,在含细胞因子碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,b FGF）和内皮细胞生长因子（epidermal growth factor,EGF）的无血清培养基中培养扩增,得到的神经球用神经巢蛋白nestin抗体鉴定和5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-bromo-2-deoxy uridine,Brdu）掺入检测增殖能力。血清诱导分化后用免疫荧光做星形胶质细胞酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）和神经元特异性Ⅲ型微管蛋白（neuron-specific classⅢβ-tubulin,β-Ⅲ-tublin）的双标检测。研究进一步观察了细胞因子b FGF和EGF单用及合用对克隆形成数量的影响及不同接种密度和白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor,LIF）对细胞生长的影响。结果：神经球nestin免疫荧光表达显示强阳性;Brdu掺入实验显示神经球细胞具有很好的增殖能力;分化后免疫双标结果得到了GFAP（68.32±5.70）%和β-Ⅲ-tublin（21.65±3.40）%的阳性表达;当2种因子同时存在时细胞克隆数量优于单因子作用组（P﹤0.05,与EGF组比较;P〈0.01,与b FGF组比较）;与对照组比较LIF作用组细胞数量明显增多（F=2 630.114,P=0.000）;细胞接种密度对神经球的数量有明显影响（F=155.100,P=0.001）,在（0.5~16.0）×105个/ml密度范围内,神经球数量随着接种密度增加而增加。结论：b FGF和EGF 2种细胞因子对NSCs的生长是必须的;长期传代过程中LIF能促进NSCs的生长;NSCs生长有密度依赖性,但接种密度应该控制在适宜范围内。
关键词
神经干细胞
细胞培养
分化
白血病抑制因子
Keywords
neural stem cells
cell culture
differentiation
leukemia inhibitory factor
分类号
Q254 [生物学—细胞生物学]
Q246 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
犬左心房与肺静脉自主神经的分布特征及其临床意义
被引量：
5
2
作者
高崇瀚
汪飞
姜蓉
张进
殷跃辉
机构
重庆医科大学
附属第二医院心内科
重庆医科大学
附属第一医院急诊科
重庆医科大学干细胞与组织工程研究所
出处
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2011年第2期197-201,共5页
文摘
目的定量研究犬左心房(LA)及肺静脉(PV)不同区域心脏自主神经的分布,并探讨其在心房颤动中的意义。方法 8只健康成年杂种犬于急性生理实验后立即处死,分别收集左心房后壁(PLA)、左心房顶(LAR)、左心房前壁(ALA)、房间隔(IAS)、左心耳(LAA)及肺静脉(PV),免疫组化染色分别标记交感、副交感神经,定量测定不同区域交感、副交感神经密度。结果交感、副交感神经在左心房和肺静脉不同区域间的分布相似。不同区域交感神经密度,除PV vs.PLA(P=0.211),IAS vs.LAR(P=0.140)及LAR vs.ALA(P=0.204)外,其余区域两两比较均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);不同区域副交感神经密度,除PV vs.PLA(P=0.256),IAS vs.LAR(P=0.130),LAR vs.ALA(P=0.238)及ALA vs.LAA(P=0.124)外,其余区域两两比较均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),不同区域交感、副交感神经密度由高至低依次均为:PLA>PV>IAS>LAR>ALA>LAA。交感、副交感神经密度从心房及肺静脉组织外层、心肌层至内层呈梯度下降,两两比较均有统计学意义(P<0.001)。肺静脉近端交感、副交感神经密度明显高于远端(P<0.001)。结论心脏自主神经在LA及PV呈区域异质性分布,这与房颤的发生及维持密切相关,在房颤的消融治疗中可能具有重要意义。
关键词
心房颤动
心脏自主神经
左心房
肺静脉
Keywords
Atrial fibrillation
Cardiac autonomic nerves
Left atria
Pulmonary vein
分类号
R541.75 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胚胎中脑神经干细胞的培养及分化条件探讨
晋贞超
邓小兰
刘品月
袁莉
姜蓉
王健
王亚平
郑敏
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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职称材料
2
犬左心房与肺静脉自主神经的分布特征及其临床意义
高崇瀚
汪飞
姜蓉
张进
殷跃辉
《中国临床解剖学杂志》
CSCD
北大核心
2011
5
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