抑郁症大鼠海马内少突胶质细胞的体视学研究 被引量：4

1

作者 唐静 梁芯 +11 位作者 张杨 陈林木 王飞飞 谭川雪 高原 黄春霞 罗艳敏 肖倩 晁凤蕾 綦英强 朱殷青 唐勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期797-802,共6页

目的：探讨慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）抑郁模型大鼠海马各亚区内CNPase＋少突胶质细胞的改变情况。方法：4~6周雄性Sprague Dawley（SD）大鼠40只随机分为对照组10只和用于CUS模型建立的大鼠30只,采用CUS... 目的：探讨慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）抑郁模型大鼠海马各亚区内CNPase＋少突胶质细胞的改变情况。方法：4~6周雄性Sprague Dawley（SD）大鼠40只随机分为对照组10只和用于CUS模型建立的大鼠30只,采用CUS结合孤养的模式建立抑郁症大鼠模型,为期4周。利用糖水偏好试验筛选出成模大鼠10只,同时运用强迫游泳、旷场实验评估对照组和CUS模型组的行为学水平。利用免疫组织化学方法结合现代体视学对大鼠海马各亚区CNPase＋少突胶质细胞的数量进行精确的三维定量研究。结果：实验发现,CUS模型组大鼠较对照组的体质量[（228.7±13.5）g,（276.2±18.6）g,P=0.000]、糖水偏好百分比[（75.9±9.7）%,（94.5±3.2）%,P=0.000]、旷场试验得分均显著降低[（150.4±29.9）分,（76.4±45.4）分,P=0.000],强迫游泳不动时间显著增加[（151.8±33.0）s,（108.7±32.9）s,P=0.009]。CUS模型组大鼠海马CA1区CNPase＋细胞数量较对照组无明显改变[（33 318.0±10 332.3）个,（42 037.3±8 879.2）个,P=0.149],而CA3区[（29 487.8±4 483.0）个,（37 942.3±5 909.9）个,P=0.019]和DG[（30 843.8±6 048.2）个,（48 463.7±9 901.2）个,P=0.004]的CNPase＋细胞数量则显著性低于对照组。结论：抑郁症模型大鼠海马CA3区和DG的CNPase＋少突胶质细胞总数量降低而CA1区无明显改变,为抑郁症的病理改变提供了重要的理论依据。 展开更多

关键词 慢性不可预知性应激 大鼠海马 少突胶质细胞 免疫组化 体视学

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人胚胎生殖细胞饲养层的制备

2

作者 姜蓉 黎晓莉 +1 位作者 吴宏 王璐 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1440-1444,共5页

目的:建立稳定高效的人包皮成纤维细胞(Human foreskin fibroblasts,HFF)饲养层培养体系,用于培养人胚胎生殖细胞(Embryonic germ cells,EGCs)。方法:取4～5岁小儿包皮,采用机械法和组织消化法分离、培养成纤维细胞,倒置相差显微镜观察... 目的:建立稳定高效的人包皮成纤维细胞(Human foreskin fibroblasts,HFF)饲养层培养体系,用于培养人胚胎生殖细胞(Embryonic germ cells,EGCs)。方法:取4～5岁小儿包皮,采用机械法和组织消化法分离、培养成纤维细胞,倒置相差显微镜观察细胞生长状况,免疫细胞化学法、MTT法、流式细胞术检测细胞纯度、生长曲线及细胞周期,筛选丝裂霉素C作用的最佳浓度和时间。分离5～11周人胚胎原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)并培养于经丝裂霉素C处理的HFF饲养层上,观察人EGCs生长情况。结果:机械法和组织消化法结合分离HFF方法可靠,纯度高,细胞生长活性好,能快速进入对数生长期,细胞周期与细胞生长曲线保持一致,细胞可以传60代以上,P3～P30代均适宜作饲养层;丝裂霉素C抑制细胞增殖的适宜浓度及时间为12.5 mg/L作用2.5 h;分离的人PGCs在该饲养层上培养可形成典型的EGCs集落,体外连续培养超过3代。结论:HFF饲养层能有效地支持人EGCs的生长。 展开更多

关键词 人胚胎生殖细胞 包皮成纤维细胞 饲养层

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氟西汀对抑郁模型大鼠海马CA_1区少突胶质细胞作用的研究 被引量：4

3

作者 王瑾 胡梦兰 +9 位作者 蒋艳红 高原 唐静 罗艳敏 晁凤蕾 梁芯 黄春霞 张扬 张毅 唐勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1125-1131,共7页

目的:探讨抗抑郁药物氟西汀对抑郁症慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型大鼠海马CA1区内CNPase+少突胶质细胞的作用。方法:选用青年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠(4~6周龄),随机分为对照组(12只)和模型组(38只),... 目的:探讨抗抑郁药物氟西汀对抑郁症慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型大鼠海马CA1区内CNPase+少突胶质细胞的作用。方法:选用青年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠(4~6周龄),随机分为对照组(12只)和模型组(38只),给予模型组大鼠连续4周的CUS干预。随后依据大鼠的糖水偏好百分比筛选出模大鼠,随机分为CUS组(12只)和CUS+fluoxetine组(FLX组)(12只),第5~7周CUS组和FLX组继续给予慢性应激,同时FLX组大鼠给予5 mg/(kg·d)氟西汀腹腔注射,对照组和CUS组给予等量生理盐水腹腔注射。干预结束后利用免疫组织化学方法结合现代体视学对大鼠海马CA1区CNPase+少突胶质细胞的数量进行精确的三维定量研究。结果:实验发现,CUS模型组大鼠的体质量(251.4±15.9)g较对照组(323.3±25.9)g明显下降(P=0.00),但与FLX组大鼠的体质量(257.9±22.7)g相比无差异(P=0.473)。CUS组大鼠的糖水偏好百分比(62.0±14.2)%明显低于对照组(89.2±4.8)%(P=0.000)及FLX组(78.2±12.8)%(P=0.020)。CUS组大鼠海马CA1区CNPase+细胞数量(18 650.7±1 812.0)明显低于对照组(33 606.9±4 471.4)(P=0.007)及FLX组(29 080.7±2 877.5)(P=0.042)。结论:大鼠海马CA1区内少突胶质细胞在抑郁症发病过程中可能起着重要作用,氟西汀治疗可防止抑郁症模型大鼠海马CA1区的CNPase+少突胶质细胞的丢失。本研究结果为探索新的抗抑郁策略提供了形态学基础。 展开更多

关键词 氟西汀 慢性不可预知性应激 大鼠海马 少突胶质细胞 体视学

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抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马DG区少突胶质细胞作用的研究 被引量：2

4

作者 杨春茂 唐静 +13 位作者 梁芯 綦英强 张钐钐 吴永鑫 范金花 罗艳敏 蒋林 周春妮 张毅 黄春霞 晁凤蕾 高原 张蕾 唐勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期508-514,共7页

目的:探讨抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)区少突胶质细胞的作用。方法:4～6周清洁级雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组(10只)和建模组(60只),建立慢性不可预知性应激(chronic unpredictable ... 目的:探讨抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)区少突胶质细胞的作用。方法:4～6周清洁级雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组(10只)和建模组(60只),建立慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)抑郁症模型,为期4周。利用糖水偏好实验筛选出成模大鼠(23只),随机分为CUS组(12只)及Anti-Lingo-1组(11只)。运用Morris水迷宫评估对照组,CUS组和Anti Lingo-1组的行为学水平,采用体视学方法计算各组大鼠海马DG区的少突胶质细胞数量。结果:应激4周和Anti Lingo-1抗体治疗3周后,Morris水迷宫实验中,与对照组(3.4±0.2)相比,CUS组(2.4±0.2)大鼠Morris水迷宫第6天穿越平台次数明显降低(F=20.049,P=0.004);与CUS组比较,抗Lingo-1组(4.3±0.3)大鼠穿台次数明显增加(F=20.049,P=0.000)。体视学研究结果表明,与对照组[(4.9±1.1)×10~4]比较,CUS组[(3.1±1.3)×10~4]大鼠海马DG区少突胶质细胞数量明显减少(F=8.747,P=0.026);与CUS组比较,Anti-Lingo-1组[(6.1±1.1)×10~4]大鼠海马DG区少突胶质细胞数量明显增加(F=8.747,P=0.001)。结论:抗Lingo-1抗体可以改善抑郁症大鼠的认知障碍,抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马DG区少突胶质细胞的作用可能是抗Lingo-1抗体改善抑郁症大鼠认知障碍的重要形态学基础之一。 展开更多

关键词 抑郁症 认知障碍 海马 少突胶质细胞 抗Lingo-1抗体 体视学

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对CUS抑郁症大鼠模型海马齿状回突触改变的体视学研究 被引量：10

5

作者 张杨 梁芯 +6 位作者 唐静 高原 黄春霞 蒋林 綦英强 朱殷青 唐勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第13期1506-1511,共6页

目的运用无偏体视学方法定量研究慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型大鼠海马DG体积、DG突触密度、突触总数的改变情况。方法筛选4~5周龄雄性SD大鼠分为对照组(n=15)和CUS组(n=23)。CUS组大鼠通过孤养并结合慢性... 目的运用无偏体视学方法定量研究慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型大鼠海马DG体积、DG突触密度、突触总数的改变情况。方法筛选4~5周龄雄性SD大鼠分为对照组(n=15)和CUS组(n=23)。CUS组大鼠通过孤养并结合慢性不可预知应激方式建立模型,对照组每5只为1笼,正常喂养。建模期间,每周进行糖水偏好试验。建模4周后,结合糖水偏好试验、旷场实验、高架十字迷宫实验对两组大鼠行为学表现进行评估。随后运用现代体视学与免疫组织化学相结合的方法测量两组大鼠海马DG体积、DG突触密度和突触总数。结果经过4周CUS干预后,CUS组大鼠与对照组相比,体质量显著降低(P<0.05),糖水偏好显著下降(P<0.05);旷场实验中央区域路程、中央路程比和中央时间比显著降低(P<0.05)。CUS组大鼠海马DG突触密度[(0.48±0.13)/μm^3]和突触总数(6.713 5×10~8)较对照组大鼠[突触密度(0.15±0.03)/μm^3,突触总数(2.103 3×10~9)]显著下降(P<0.05)。结论抑郁症模型大鼠海马DG的突触总数减少、突触密度减小,表明海马齿状回突触改变可能是抑郁症发病的重要神经结构基础之一。 展开更多

关键词 抑郁症大鼠 海马 齿状回 突触 体视学

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人参多糖对K562细胞凋亡与细胞周期的影响及其机制 被引量：6

6

作者 刘艺 陈地龙 +6 位作者 何轩 姜蓉 王建伟 左国伟 魏强 赵亮 李静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1181-1184,共4页

目的探讨人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)诱导白血病细胞K562凋亡和周期阻滞的机制。方法取对数生长期的K562细胞,调整密度为7×108/L,空白对照组予以常规培养;GPS组加入400 mg/L GPS。流式细胞仪测定细胞的凋亡率及细胞周期... 目的探讨人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)诱导白血病细胞K562凋亡和周期阻滞的机制。方法取对数生长期的K562细胞,调整密度为7×108/L,空白对照组予以常规培养;GPS组加入400 mg/L GPS。流式细胞仪测定细胞的凋亡率及细胞周期分布变化;RT-PCR检测细胞ERK表达的变化。免疫组化的方法检测细胞中p-ERK、NF-κB、Cyclin D1蛋白定位及表达量的变化。Western blot检测细胞中ERK、p-ERK、NF-κB、Cyclin D1蛋白的变化。结果与对照组比较,K562细胞在400 mg/L GPS的作用下,体外培养24、48、72 h后,GPS组细胞凋亡率显著增高(P<0.05),周期分布检测结果显示,与对照组相比,GPS组K562细胞G0/G1期细胞数量呈时间依赖性增多(P<0.05),G2+M、S期细胞数量则明显减少(P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,400 mg/L GPS处理48 h组ERK mRNA的表达水平明显低于对照组(0.20vs 0.50,P<0.05)。免疫组化显示p-ERK、NF-κB、Cyclin D1主要分布在细胞核和细胞质,与对照组相比,GPS组K562细胞内p-ERK、NF-κB、Cyclin D1的表达明显减弱。Western blot检测结果显示,ERK总蛋白无明显变化(P>0.05),而p-ERK、NF-κB、Cyclin D1随时间变化有减少趋势,且在48 h减少明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论人参多糖GPS可促使K562细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导K562细胞凋亡,且均呈时间依赖性。GPS促进K562细胞凋亡、导致其细胞周期阻滞的机制可能是通过抑制ERK/NF-κB信号通路的激活,进而下调Cyclin D1来实现的。 展开更多

关键词 人参多糖 K562细胞 周期阻滞 ERK NF-ΚB CYCLIND1

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人参总皂甙对白血病细胞KG1α增殖、凋亡的影响 被引量：5

7

作者 刘晓岩 李静 +2 位作者 王建伟 姜蓉 陈地龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期2599-2603,共5页

目的探讨人参总皂甙（total saponins of panax ginseng,TSPG）对人急性髓系白血病细胞株KG1α增殖的影响。方法取对数生长期的KG1α细胞,调整密度为5×108/L,空白对照组予以常规培养;人参总皂甙TSPG组分别加入0.1、0.2、0.4、0.6、... 目的探讨人参总皂甙（total saponins of panax ginseng,TSPG）对人急性髓系白血病细胞株KG1α增殖的影响。方法取对数生长期的KG1α细胞,调整密度为5×108/L,空白对照组予以常规培养;人参总皂甙TSPG组分别加入0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 g/L TSPG。采用MTT比色法测定细胞存活率,瑞氏染色法以及光电镜观察细胞形态学改变。流式细胞仪测定细胞周期分布的变化以及细胞的凋亡率。免疫细胞化学的方法检测细胞中β-catenin、NF-κB p65蛋白表达的变化。RT-PCR半定量检测细胞中β-catenin mRNA和NF-κB p65 mRNA水平的变化。结果人参总皂甙TSPG在体外对KG1α增殖具有明显抑制作用。在0.1~0.8 g/L TSPG浓度范围内,其抑制作用呈浓度依赖性,在浓度0.4 g/L处达到细胞的半数抑制率,且在48 h抑制率达到高峰。0.4 g/L TSPG作用48 h后,可见细胞分散生长,数量明显减少;细胞明显分化或凋亡,产生核分裂象,胞质中产生凋亡小体以及空泡;与对照组相比,加药组KG1α细胞周期分布无明显变化（P〉0.05）;与对照组相比,加药组细胞凋亡率显著增高,其改变具有统计学意义（P〈0.05）;与对照组相比,加药组细胞内β-catenin蛋白因子表达降低其表达区域由胞核向胞膜转移,NF-κB p65因子的表达也明显减弱其表达区域由胞核向胞膜转移;与对照组相比,加药组β-catenin和NF-κB p65 mRNA的水平降低,其改变具有统计学意义（P〈0.05）。结论 TSPG可抑制KG1α细胞增殖诱导细胞凋亡,且TSPG抑制KG1α细胞增殖的作用机制可能与其抑制β-catenin及NF-κB p65蛋白表达,降低β-catenin和NF-κB p65 mRNA的水平有关。 展开更多

关键词 人参总皂甙 KG1α细胞 增殖抑制 凋亡

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重庆地区6197例变应性鼻炎儿童吸入性变应原临床分析 被引量：3

8

作者 李科琼 王宏 +2 位作者 白燕 李静 袁轲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期765-769,共5页

目的：探讨重庆地区儿童变应性鼻炎患者吸入性变应原原谱特点及其影响因素。方法：选取2006年1月至2012年4月就诊于重庆医科大学附属儿童医院耳鼻喉科的重庆地区4月~12岁过变应性鼻炎患儿6 197例,对其进行皮肤点刺试验（skin prick test... 目的：探讨重庆地区儿童变应性鼻炎患者吸入性变应原原谱特点及其影响因素。方法：选取2006年1月至2012年4月就诊于重庆医科大学附属儿童医院耳鼻喉科的重庆地区4月~12岁过变应性鼻炎患儿6 197例,对其进行皮肤点刺试验（skin prick test,SPT）,分析变应原阳性率、阳性反应程度及阳性种类数与性别、年龄、居住环境的相关性。结果：1在6 197例变应性鼻炎患儿中,4 048例（65.32%）具有特应性,屋尘螨（65.06%）、粉尘螨（63.35%）和热带螨（40.07%）阳性率及其阳性程度居于前3位。22006年至2012年间变应原特应性阳性率（依次为50.64%、80.21%、81.20%、82.36%、77.34%、71.18%、56.01%）先急剧上升,然后趋于稳定再缓慢下降（r=-0.104,P=0.000）。3随着年龄的增长,变应原阳性率、阳性程度及阳性种类均增加（r分别为0.115、0.120、0.080;P分别为0.000、0.000、0.000）,性别特应性差异具有统计学差异（幼儿期：61.9%vs.63.8%,P=0.739;学龄前期：73.6%vs.69.7%,P=0.030;学龄期：78.4%vs.73.4%,P=0.002）。4在男童的幼儿期和学龄前期变应性鼻炎患儿中,主城区患儿变应原特应性阳性率明显高于郊县（幼儿期：43.8%vs.64.7%,P=0.023;学龄前期：68.4%vs.74.6%,P=0.027）。结论：重庆地区儿童变应性鼻炎患儿大都具有特应性,屋尘螨、粉尘螨和热带螨是主要的吸入性变应原,随着年龄增长,特应性程度增加,性别差异更明显。 展开更多

关键词 皮肤点刺试验 变应性鼻炎 吸入性变应原 儿童

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人PGI基因siRNA慢病毒质粒的构建及对白血病细胞增殖的影响 被引量：2

9

作者 赵亮 李静 +4 位作者 魏强 游智梅 夏菁 李丹阳 陈地龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期20-23,共4页

目的构建共表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响。方法 RT-PCR、Westernblot检测人单核细胞、K562... 目的构建共表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响。方法 RT-PCR、Westernblot检测人单核细胞、K562、KG1-α、HL-60细胞中PGI mRNA和蛋白表达水平,筛选高表达PGI的白血病细胞系;构建人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照,经293T细胞包装后,获得可表达人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照;分别使用重组病毒(干扰组)、原始病毒(阴性对照组)和等量PBS(空白对照组)转染白血病KG1-α细胞,筛选稳定转染细胞株。RT-PCR和Western blot检测干扰组、阴性对照组及空白对照组KG1-α细胞PGI基因表达水平;CCK-8检测各组细胞增殖情况并作生长曲线。结果 PGI基因在白血病KG1-a细胞中高表达;成功构建了稳定低表达PGI的白血病细胞株(KG1-α-siPGI);低表达PGI基因的KG1-α细胞增殖能力较空白对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了低表达PGI基因的白血病KG1-α细胞株,干扰PGI基因的表达能够抑制KG1-α细胞的生长。 展开更多

关键词 白血病 慢病毒载体 RNA干扰 细胞增殖

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人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1-α增殖的影响 被引量：1

10

作者 李丹阳 夏菁 +5 位作者 冯子强 石庆强 游智梅 刘泽洪 陈地龙 李静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第21期2167-2172,共6页

目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、... 目的探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5 U/L EPO,并设置EPO对照组。培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-time PCR技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达。用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性。结果人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100μmol/L为最适作用浓度,7 d为最适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其最适浓度则降低到75 mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P<0.05);Western blot检测经单独使用TSPG处理了7 d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-EPOR表达明显下调,Jak2、STAT5、p-STAT5、Bcl-2蛋白表达下调,而Bax、Cleaved Caspase-3表达增高,P53及P16无变化;然而添加了EPO处理的各组p-EPOR、Jak2、p-STAT5、P53及P16的表达明显增加,Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3的表达没有变化。结论 TSPG能下调细胞内由EPOR介导的Jak-STAT通路相关蛋白的表达,并降低EPOR的活性,进而下调Bcl-2、上调Bax和Cleaved Caspase-3来促进细胞凋亡;而添加了EPO后这种作用被拮抗,抑制细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的。 展开更多

关键词 人参总皂苷 KG1-α细胞 促红细胞生成素 细胞凋亡 细胞衰老

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抑郁症大鼠海马CA1区及齿状回毛细血管的体视学研究 被引量：5

11

作者 谭川雪 王飞飞 +8 位作者 陈林木 黄春霞 高原 蒋林 张毅 周春妮 晁凤蕾 张蕾 唐勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期649-655,共7页

目的:研究慢性不可预见性刺激(chronically unpredicted stress,CUS)所致抑郁症模型大鼠海马CA1区和齿状回(dentate gyrus,DG)体积及毛细血管的改变。方法:选取Sprague Dawley(SD)大鼠,经筛选后随机分为对照组10只和模型组10只。模型组... 目的:研究慢性不可预见性刺激(chronically unpredicted stress,CUS)所致抑郁症模型大鼠海马CA1区和齿状回(dentate gyrus,DG)体积及毛细血管的改变。方法:选取Sprague Dawley(SD)大鼠,经筛选后随机分为对照组10只和模型组10只。模型组采取慢性不可预见刺激建立抑郁症模型,共给予应激35 d,对照组不给予应激。利用糖水偏好实验和开场实验检测模型是否建立成功。建模成功后,分别从模型组和对照组中各随机选取5只SD大鼠,运用体视学和免疫组化染色相结合的方法对大鼠海马CA1区和DG毛细血管进行定量研究,剩余5只进行相关分子生物学研究。结果:模型组大鼠和对照组大鼠在体质量[(314.81±31.52)g,(349.18±28.23)g,t=2.569,P=0.019]、糖水偏好实验[(82.37±8.44)%,(89.33±3.97)%,t=2.359,P=0.03]、开场实验结果[(48.30±39.49)分,(87.70±38.32)分,u=-1.988,P=0.047]具有统计学差异,模型组较对照组大鼠海马总体积[(88.84±7.51)mm3,(99.89±12.55)mm3,t=2.388,P=0.028]、海马CA1区[(27.78±1.84)mm3,(32.38±3.69)mm3,t=3.522,P=0.004]和DG[(21.02±2.61)mm3,(24.20±3.33)mm3,t=2.377,P=0.029]体积明显减少,模型组较对照组大鼠海马CA1区毛细血管总长度[(8.454±1.010)m,(11.012±1.642)m,t=2.967,P=0.018]、总体积[(0.104±0.019)mm3,(0.151±0.021)mm3,t=3.720,P=0.006]、总表面积[(1.025±0.113)cm2,(1.589±0.313)cm2,t=3.794,P=0.013]、平均直径[(3.884±0.458)μm,(4.580±0.419)μm,t=2.509,P=0.036]下降以及DG毛细血管的总体积[(0.078±0.021)mm3,(0.117±0.024)mm3,t=2.716,P=0.026]、总表面积[(0.838±0.184)cm2,(1.133±0.074)cm2,t=3.32,P=0.011]、平均直径[(3.611±0.493)μm,(4.630±0.635)μm,t=2.834,P=0.022]下降,结果具有统计学意义。结论:抑郁症模型大鼠大脑海马萎缩,CA1区、DG毛细血管改变,海马结构与毛细血管的改变可能参与了抑郁症的发病机制。 展开更多

关键词 抑郁症 海马 CA1 齿状回 毛细血管 体视学

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大鼠胼胝体中段和压部体积及有髓神经纤维老年改变的体视学研究 被引量：1

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作者 闵琦珵 徐瑲 +5 位作者 卢伟 姜蓉 张蕾 龚霞 卢芳 唐勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期2185-2188,共4页

目的研究大鼠胼胝体中段和压部体积及其内有髓神经纤维的老年改变。方法运用新的体视学方法和透射电镜技术定量研究成年、中年和老年雌性Long-Evans大鼠胼胝体中段和压部的体积、有髓神经纤维的长度密度、总长度、有髓神经纤维的直径。... 目的研究大鼠胼胝体中段和压部体积及其内有髓神经纤维的老年改变。方法运用新的体视学方法和透射电镜技术定量研究成年、中年和老年雌性Long-Evans大鼠胼胝体中段和压部的体积、有髓神经纤维的长度密度、总长度、有髓神经纤维的直径。结果胼胝体中段体积在老年组比成年组和中年组分别显著降低21.5%和18.1%,而胼胝体压部体积变化不明显。胼胝体中段和压部有髓神经纤维的长度密度、总长度、平均直径均没有明显的老年改变。老年组大鼠大脑胼胝体中段内直径为0.7～0.8μm的有髓神经纤维总长度比成年组大鼠显著减少3.45km,直径为1.5～1.6μm的有髓神经纤维的总长度比成年组显著增加0.5km。老年组大鼠大脑胼胝体压部内直径为1.2～1.3μm和1.4～1.5μm的有髓神经纤维总长度分别较成年组大鼠显著增加0.123km和0.108km。结论老年大脑胼胝体压部没有发生显著性萎缩。老年大脑胼胝体中段体积显著性下降,胼胝体中段内小直径的有髓神经纤维总长度显著性降低可能是老年胼胝体中段体积显著性下降的重要原因之一。 展开更多

关键词 胼胝体 有髓神经纤维 老年改变 体视学

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当归多糖促进骨髓移植小鼠造血功能重建及其机制研究 被引量：18

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作者 牛雪芳 廖奎 +6 位作者 汪子铃 侯吉颖 曾娣 肖含先之 杜坤航 王璐 王亚平 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第16期1621-1628,共8页

目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对接受供体骨髓细胞移植后受体小鼠的造血功能重建及其初步机制。方法取10只20~25 g雄性C57BL/6J小鼠作为供体小鼠,提取其骨髓细胞;将30只8~10周龄同系受体雌性小鼠经8.0 Gy的... 目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对接受供体骨髓细胞移植后受体小鼠的造血功能重建及其初步机制。方法取10只20~25 g雄性C57BL/6J小鼠作为供体小鼠,提取其骨髓细胞;将30只8~10周龄同系受体雌性小鼠经8.0 Gy的X射线(一次性致死剂量)全身辐射后,将供体小鼠的骨髓细胞通过尾静脉输入受体小鼠体内来构建小鼠骨髓移植模型,随后采用简单随机化法将受体小鼠分为3组,每组10只。对照组(Ctrl组):受体小鼠辐射后不移植骨髓细胞;骨髓移植组(BMT组):受体小鼠辐射后移植骨髓细胞(5×10^(6)个/只);骨髓移植+当归多糖组(TASP组):辐射剂量与移植骨髓细胞数同骨髓移植组,同时给受体小鼠腹腔注ASP(100 mg/kg×9 d)。期间动态测量受体小鼠体质量变化。移植骨髓细胞后第9天,PCR方法鉴定受体鼠脾集落细胞和骨髓细胞的Y染色体基因。采集受体小鼠眼眶血,检测白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)数量。取受体小鼠股骨,计数每只股骨有核细胞数,流式细胞术检测骨髓细胞周期。培养受体鼠骨髓基质细胞,观察基质细胞贴壁情况,EDU法检测骨髓基质细胞增殖能力,并计数成纤维细胞集落生成单位(CFU-F)。ELISA法检测受体鼠血清和骨髓基质细胞培养上清液中相关造血因子含量。结果对照组小鼠7 d内全部死亡,BMT组与TASP组小鼠全部存活。两个移植组的小鼠体质量5~6 d降至最低后开始恢复,TASP组恢复更快(P<0.05)。在雌性受体小鼠脾集落细胞和骨髓造血细胞中检测到Y染色体基因。TASP组小鼠外周血WBC、RBC、HGB数量与每只股骨有核细胞数均显著高于BMT组(P<0.05;P<0.01),且骨髓细胞G_(0)/G_(1)期细胞比例下降,S期和G_(2)/M期细胞比例增高(P<0.05)。TASP组受体小鼠的骨髓基质细胞贴壁数量、增殖能力和形成CFU-F集落数量也明显高于BMT组(P<0.05),且小鼠血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素3(IL-3)以及骨髓基质细胞培养上清液中GM-CSF和干细胞因子(SCF)含量显著增高(P<0.05)。结论ASP可促进移植骨髓细胞在受体小鼠体内造血功能的重建,其初步机制可能与改善造血微环境和促进造血因子分泌有关。 展开更多

关键词 当归多糖 骨髓移植 造血功能重建 造血微环境 造血因子

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抑郁症易感性差异与海马CA3区及DG内树突棘数量变化的相关性研究 被引量：2

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作者 蒋艳红 王瑾 +10 位作者 胡梦兰 罗艳敏 高原 梁芯 肖倩 周春妮 晁凤蕾 张蕾 唐静 黄春霞 唐勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期856-862,共7页

目的:探讨在慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型中压力耐受大鼠海马结构CA3及海马齿状回(dentate gyrus,DG)内树突棘数量的改变情况,以期深入了解抑郁症发病的结构基础。方法:选用4~5周龄雄性spraguedawley(SD)... 目的:探讨在慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型中压力耐受大鼠海马结构CA3及海马齿状回(dentate gyrus,DG)内树突棘数量的改变情况,以期深入了解抑郁症发病的结构基础。方法:选用4~5周龄雄性spraguedawley(SD)大鼠,将糖水偏好稳定的大鼠随机分为空白对照组和CUS造模组,造模组采取孤养并给予4周的CUS干预。根据糖水偏好结果筛选出CUS敏感组和CUS耐受组。利用免疫组织化学结合体视学方法对每组抽选出的5只大鼠海马结构CA3和DG内的树突棘数量进行精确的三维定量研究。结果:与空白对照组、CUS耐受组相比,CUS敏感组的糖水偏好百分比均明显下降(P=0.000,P=0.000),而空白对照组与CUS耐受组的糖水偏好百分比无明显差异(P=0.262);与空白对照组和CUS耐受组相比较,CUS敏感组大鼠海马结构CA3区内的树突棘数量明显下降(P=0.008,P=0.004),CUS敏感组大鼠海马结构DG区内的树突棘数量也明显下降(P=0.001,P=0.001);而在大鼠海马结构CA3及DG内,CUS耐受组与空白对照组的树突棘总数目无明显差异(P=0.656,P=0.950)。结论:CUS耐受组大鼠海马结构CA3及DG内树突棘的数量不受CUS干预的影响,提示海马结构内树突棘数量可能是抑郁症易感性差异的关键因素之一,为抑郁症的治疗提供了新的方向。 展开更多

关键词 抑郁症 CUS耐受组 大鼠海马 树突棘 体视学

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胼胝体额区有髓神经纤维髓鞘超微结构老年改变的体视学研究

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作者 卢芳 张蕾 +5 位作者 卢伟 徐瑲 姜蓉 龚霞 闵琦埕 唐勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期2476-2479,共4页

目的探讨大鼠胼胝体额区有髓神经纤维髓鞘超微结构的老年性改变。方法运用电子显微镜和三维体视学方法分别对年轻组(6月龄)、中老年组(18月龄)和老年组(27月龄)雌性Long-Evans大鼠大脑胼胝体额区有髓神经纤维超微结构进行定量研究。结... 目的探讨大鼠胼胝体额区有髓神经纤维髓鞘超微结构的老年性改变。方法运用电子显微镜和三维体视学方法分别对年轻组(6月龄)、中老年组(18月龄)和老年组(27月龄)雌性Long-Evans大鼠大脑胼胝体额区有髓神经纤维超微结构进行定量研究。结果年轻组、中老年组和老年组的有髓神经纤维轴突平均直径(内径)、有髓神经纤维平均直径(外径)、平均内周长、平均外周长、髓鞘平均厚度均未见显著性改变。将有髓神经纤维髓鞘厚度按<0.2μm、0.2～0.4μm(不含0.4,以下类推)、0.4～0.6μm、0.6～0.8μm、0.8～1.0μm、≥1.0μm 6个段分别进行统计分析,结果显示,在0.2～0.4μm直径段内,中老年组和老年组髓鞘厚度较年轻组均存在显著降低(P<0.05);在0.4～0.6μm直径段内,老年组髓鞘厚度较年轻组存在显著性降低(P<0.05);在0.6～0.8μm直径段内,老年组髓鞘厚度较中老年组显著性降低(P<0.05)。结论胼胝体额区有髓神经纤维尤其是小直径的有髓神经纤维髓鞘厚度存在显著老年性降低。 展开更多

关键词 有髓神经纤维 髓鞘 胼胝体额区 体视学

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抑郁症模型大鼠海马内小胶质细胞数量和炎症因子表达增加 被引量：11

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作者 肖凯 罗艳敏 +10 位作者 梁芯 唐静 王瑾 肖倩 綦英强 黎悦 祝佩林 杨浩 谢雨涵 唐勇 吴宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期367-375,共9页

目的探讨慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)抑郁症模型大鼠海马小胶质细胞总数量、活化小胶质细胞和炎症因子的变化情况。方法选取6~8周龄的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,在适应性饲养、糖水偏好基线调整及筛选后采... 目的探讨慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)抑郁症模型大鼠海马小胶质细胞总数量、活化小胶质细胞和炎症因子的变化情况。方法选取6~8周龄的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,在适应性饲养、糖水偏好基线调整及筛选后采用分层随机法分为空白对照组(n=19)和CUS干预组(n=48),给予CUS干预组大鼠5周的CUS干预,运用糖水偏好实验来评估两组大鼠的抑郁样行为,筛选出成模大鼠16只,即CUS模型组。采用免疫组织化学与体视学相结合的方法对两组大鼠海马各亚区小胶质细胞的总数量进行精确定量研究,运用免疫荧光方法评估大鼠海马各亚区活化小胶质细胞的密度,并采用实时定量PCR技术检测海马炎症因子的水平。结果与空白对照组相比,CUS模型组大鼠的体质量明显下降(P<0.01)、糖水偏好百分比显著降低(P<0.01);CUS模型组大鼠海马CA1、CA2/3和DG区小胶质细胞的总数量较空白对照组均显著增加(P<0.001,P=0.002,P=0.002);CUS模型组大鼠海马CA1、CA2/3和DG区活化小胶质细胞的密度和比例较空白对照组均显著增加(P=0.011,P=0.015,P<0.001;P=0.018,P=0.019,P<0.001);相对于空白对照组,CUS模型组大鼠海马炎症因子IL-1β和iNOS的mRNA表达量显著升高(P=0.012,P=0.020)。结论抑郁症模型大鼠海马各亚区内小胶质细胞总数量、活化小胶质细胞的密度和比例增加,炎症因子表达升高,表明海马小胶质细胞的改变可能参与抑郁症的病理过程。 展开更多

关键词 抑郁症 海马 小胶质细胞 白细胞介素1Β 诱导型一氧化氮合酶 体视学

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硝普钠促进静脉移植BMSCs向溃疡性结肠炎大鼠结肠的迁移 被引量：2

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作者 陈晓云 徐艳华 +1 位作者 姜蓉 汪维伟 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期152-155,共4页

目的:观察硝普钠能否促进静脉移植的大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis,UC)大鼠结肠的迁移。方法:分离培养4、’,6-二脒基-2-苯基吲哚盐酸(4’,6-diamidino-2-phenylind... 目的:观察硝普钠能否促进静脉移植的大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis,UC)大鼠结肠的迁移。方法:分离培养4、’,6-二脒基-2-苯基吲哚盐酸(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)荧光标记SD大鼠BMSCs。免疫复合法建立UC大鼠模型,1、2组UC大鼠均经尾静脉注射DAPI标记BMSCs的细胞悬液,2组细胞悬液还含0.2 mg/kg体重的硝普钠。移植后第7、14天各处死5只大鼠,取溃疡及非溃疡部位结肠做恒冷切片,荧光显微镜下分别计数各组DAPI标记BMSCs在溃疡及非溃疡部位结肠的细胞数。结果:移植第7、14天,2组结肠溃疡部位阳性细胞数均明显高于非溃疡部位(P<0.01);移植第7天,2组溃疡及非溃疡部位的阳性细胞数均高于1组(P<0.05)。结论:静脉移植BMSCs的同时给予硝普钠能促进BMSCs向结肠溃疡部位的迁移。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 移植 溃疡性结肠炎 硝普钠

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N^ω硝基左旋精氨酸甲酯对大鼠海马CA1区毛细血管的影响

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作者 綦英强 王三荣 +11 位作者 晁凤蕾 张蕾 马晶 况超 陈林木 张毅 梁芯 唐静 张杨 朱殷青 罗艳敏 唐勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1385-1391,共7页

目的探讨Nω硝基左旋精氨酸甲酯(Nω-nitro-左旋精氨酸methyl ester,L-NAME)对大鼠空间学习、记忆能力和海马CA1区毛细血管的影响。方法内导管成功埋植后,阻断剂组(L-NAME组)大鼠每日给予5μL的1μmol/μL L-NAME侧脑室注射,对照组(Sham... 目的探讨Nω硝基左旋精氨酸甲酯(Nω-nitro-左旋精氨酸methyl ester,L-NAME)对大鼠空间学习、记忆能力和海马CA1区毛细血管的影响。方法内导管成功埋植后,阻断剂组(L-NAME组)大鼠每日给予5μL的1μmol/μL L-NAME侧脑室注射,对照组(Sham组)每日给予5μL生理盐水侧脑室注射,持续4周。然后用Morris水迷宫测试大鼠空间学习和记忆能力,用试剂盒检测海马组织中NOS活性及NO含量,用体视学方法测定海马和海马CA1区总体积、海马CA1区毛细血管总长度、总表面积和总体积。结果水迷宫实验中L-NAME组的潜伏期显著长于Sham组(P=0.006);L-NAME组海马组织中的NOS活性及NO含量均显著低于Sham组(P<0.01);L-NAME组海马体积、CA1区体积与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05);L-NAME组CA1区毛细血管总长度、毛细血管总表积、毛细血管总体积均较Sham组显著减少(P<0.05)。结论 L-NAME可以导致大鼠空间学习、记忆能力下降和大鼠海马CA1区毛细血管总长度、总表面积以及总体积减少。 展开更多

关键词 Nω硝基左旋精氨酸甲酯 内源性一氧化氮 海马CA1区 毛细血管 体视学

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当归多糖拮抗D-半乳糖致大鼠脑衰老的作用 被引量：17

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作者 汪兰 张梦思 +10 位作者 王顺和 汪子铃 侯吉颖 肖含先之 黄彩虹 曾娣 张进 牛雪芳 牛依琳 王璐 王亚平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期1839-1845,共7页

目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide,ASP)拮抗氧化致衰剂D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致大鼠脑衰老的作用。方法将SD大鼠分为对照组、ASP组、衰老模型组、ASP衰老模型组。采用水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力;衰老... 目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide,ASP)拮抗氧化致衰剂D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致大鼠脑衰老的作用。方法将SD大鼠分为对照组、ASP组、衰老模型组、ASP衰老模型组。采用水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力;衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测脑组织细胞衰老;色谱法测量海马匀浆SOD、MDA和GSH的含量;ELISA法检测海马组织匀浆中IL-1β,IL-6的含量;Southern blot检测海马细胞端粒长度,TRAP-PCR检测端粒酶活性。从SD胎鼠脑组织中分离、培养、鉴定神经干细胞(neural stem cells,NSCs)。将培养第3代NSCs分为对照组、ASP组、衰老模型组、ASP衰老模型组。色谱法测定细胞内MDA含量;流式细胞仪测定细胞内ROS水平;RT-PCR检测衰老相关基因的p19、p21、p53 mRNA的表达。结果与衰老模型组相比,ASP衰老模型组大鼠空间学习记忆能力明显改善;脑组织中SA-β-Gal染色阳性的细胞数减少(P<0.05);海马区SOD、GSH含量增高,MDA含量降低(P<0.05);IL-1β,IL-6的分泌水平降低(P<0.05);端粒长度和端粒酶活性增加。成功分离并鉴定出NSCs;与NSCs衰老组相比,ASP衰老组NSCs中MDA含量和ROS水平显著降低(P<0.05);衰老相关基因p19、p21、p53 mRNA表达降低(P<0.05)。结论ASP可能通过调控细胞端粒长度和端粒酶活性,下调衰老相关基因表达,降低炎症因子表达,提高细胞抗氧化能力,进而拮抗D-gal对NSCs和海马细胞的致衰作用。 展开更多

关键词 当归多糖 D-半乳糖 脑衰老 神经干细胞 抗衰老

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5-氟尿嘧啶损伤骨髓血管周造血龛的机制 被引量：2

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作者 牛依琳 肖含先之 +3 位作者 王碧瑶 汪子铃 王亚平 王璐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1681-1687,共7页

目的以体外分离小鼠骨髓血管周间充质祖细胞为研究对象,探讨5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对血管周造血龛的损伤及其机制。方法胶原酶消化分离提取C57BL/6J小鼠骨髓血管周间充质祖细胞,体外培养;琼脂糖凝胶电泳检测造血龛特异性基因... 目的以体外分离小鼠骨髓血管周间充质祖细胞为研究对象,探讨5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对血管周造血龛的损伤及其机制。方法胶原酶消化分离提取C57BL/6J小鼠骨髓血管周间充质祖细胞,体外培养;琼脂糖凝胶电泳检测造血龛特异性基因表达,台盼蓝计数活细胞,CCK-8检测细胞增殖,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老,酶学法检测丙二醛MDA和超氧化物歧化酶SOD水平,成骨成脂诱导分化和成骨相关基因qRT-PCR实验检测细胞成骨与成脂分化潜能,qRT-PCR检测造血因子基因表达。建立造血细胞与血管周间充质祖细胞共培养体系,进行基质细胞-造血细胞间黏附分子及信号分子检测,造血细胞活性、氧化还原指标以及β-半乳糖苷酶特异性细胞衰老检测。结果5-FU导致血管周间充质祖细胞同时发生凋亡和衰老,抑制细胞增殖,氧化应激导致细胞成骨/成脂分化失衡,下调造血因子SCF、CXCL12、G-CSF转录,减弱与造血细胞间VLA-4/VCAM-1、ICAM-1/LFA1黏附作用、削减TPO/MPL、Ang-1/Tie-2信号作用,导致造血细胞发生氧化应激,诱发细胞衰老。结论5-FU诱导血管周间充质祖细胞氧化损伤,间接引起造血细胞氧化应激性衰老。 展开更多

关键词 5-氟尿嘧啶 血管周间充质祖细胞 血管周造血龛 造血细胞 氧化应激 骨髓抑制

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