生理学教学实验模拟课件的开发 被引量：6

1

作者 王莎莉 田庆宜 《实验室研究与探索》 CAS 2003年第4期23-24,29,共3页

采用AUTHORWARE软件等工具探索了生理学教学实验模拟课件的制作技术。在构建的虚拟实验环境中,学生通过与课件交互,可完成整个生理学实验。在利用计算机技术实现生理实验改革中进行了有益的探索。

关键词 生理学教学 教学实验 实验模拟课件 制作 AUTHORWARE软件 高校

在线阅读 下载PDF 职称材料

双胎妊娠合并妊娠期肝内胆汁淤积症面临更严重的不良妊娠结局 被引量：2

2

作者 张蕊 李霞 +6 位作者 刘太行 罗欣 李荣 文乙先 刘学庆 王应雄 耿艳清 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期318-323,共6页

目的:探讨单胎妊娠和双胎妊娠合并妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕妇的不良妊娠结局。方法:收集2018年至2021年重庆医科大学附属第一医院分娩的2886例ICP孕妇的临床信息,经过纳入排除标准,选取1 99... 目的:探讨单胎妊娠和双胎妊娠合并妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕妇的不良妊娠结局。方法:收集2018年至2021年重庆医科大学附属第一医院分娩的2886例ICP孕妇的临床信息,经过纳入排除标准,选取1 992例进行后续分析。根据ICP孕妇的产胎个数进行分组后,分析两组的人群基线特征,并使用倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)消除两组之间人群基线差异。随后使用χ^(2)检验分析ICP孕妇的不良妊娠结局。结果:PSM前两组的基线特征除孕前体重(P=0.064)和吸烟(P=0.129)外均具有统计学差异;PSM后两组的基线特征差异均无统计学意义。在母体结局方面,双胎ICP组的妊娠期高血压(gestational hypertension,GH;8.40%)(P=0.004)、子痫前期(preeclampsia,PE;10.9%)(P=0.035)、胎盘植入性疾病(placenta accreta spectrum,PAS;15.1%)(P=0.004)和羊水过多(5.30%)(P=0.010)的发生率均显著高于单胎ICP组;单胎ICP组的胎膜早破(premature rupture of membranes,PROM;27.0%)(P=0.002)和羊水过少(12.3%)(P=0.022)的发生率均显著高于双胎ICP组。在新生儿结局方面,双胎ICP组的早产(38.9%)(P<0.001)、胎儿畸形(3.90%)(P=0.004)、低出生体重(low birth weight,LBW;44.6%)(P<0.001)及入住新生儿重症病房(neonatal intensive care unit,NICU;24.91%)(P<0.001)的发生率显著高于单胎ICP组;单胎ICP组的巨大儿(4.91%)(P=0.007)发生率显著高于双胎ICP组。结论:双胎ICP孕妇相对于单胎ICP孕妇面临更严重的不良妊娠结局。 展开更多

关键词 妊娠期肝内胆汁淤积症 双胎妊娠 不良妊娠结局

在线阅读 下载PDF 职称材料

靶向敲低腺苷转运体1通过降低炎症反应对阿尔茨海默病的保护作用研究 被引量：1

3

作者 张效源 马子腾 +1 位作者 贾云芳 贺桂琼 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第23期2588-2598,共11页

目的 通过构建腺苷转运体1(equilibrative nucleotide transporter 1,ENT1)过表达和敲低质粒,观察ENT1对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的影响及可能的机制。方法 利用分子克隆的方式构建ENT1过表达质粒pAAV-ENT1-mCherry和敲... 目的 通过构建腺苷转运体1(equilibrative nucleotide transporter 1,ENT1)过表达和敲低质粒,观察ENT1对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的影响及可能的机制。方法 利用分子克隆的方式构建ENT1过表达质粒pAAV-ENT1-mCherry和敲低质粒pAAV-ENT1shRNA-ZsGreen。将过表达质粒转染入小鼠神经元N2A细胞,将敲低质粒转染入含瑞士家族人APP695的N2A细胞(N2A-APP)。结合real-time qPCR和Western blot分别检测ENT1 mRNA和蛋白表达及炎症因子的变化,通过CCK-8试剂盒检测对细胞活性的影响。结果 测序和real-time qPCR验证结果显示小鼠ENT1过表达和敲低质粒已成功构建。CCK-8检测结果显示,过表达ENT1水平24 h内细胞存活率显著下调(P<0.05),而当敲低ENT1时细胞存活率显著上调(P<0.01)。Real-time qPCR检测进一步发现,ENT1过表达可引起细胞内炎症因子IL-1β、TNF-α、C1q-a和C1q-b水平的显著上调(P<0.05),而敲低ENT1时可逆转N2A-APP细胞内炎症因子水平的上调(P<0.05)。结论 靶向敲低ENT1的蛋白水平可通过降低炎症反应从而减轻AD的病理改变,ENT1可能是AD病理机制的一个潜在靶点。 展开更多

关键词 腺苷转运体1 阿尔茨海默病 炎症因子 细胞活力

在线阅读 下载PDF 职称材料

乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对内皮细胞增殖的影响及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的作用 被引量：8

4

作者 隆霜 沈宜 +3 位作者 谢莹珊 范维珂 姜蓉 陈黎 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1054-1058,共5页

目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes。采用MTT法分... 目的研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的促增殖作用,并初步探讨MAPK/ERK和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes。采用MTT法分别检测50、100、200、400μg/ml Exosomes对HUVECs促增殖作用的影响,流式细胞仪测定200μg/ml Exosomes对HUVECs细胞周期的影响,Western blotting检测200μg/ml Exosomes诱导下HUVECs细胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达水平。结果乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes可促进HUVECs细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性。200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24h后,S期细胞比例(27.8%±3.37%)较对照组(15.34%±0.71%)增加(P<0.05),G1/S期细胞比例(2.22%±0.37%)与对照组(4.67%±0.47%)比较下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,200μg/ml Exosomes作用HUVECs细胞24、48、72h后,磷酸化ERK表达(0.3378±0.0415,0.4967±0.0511,0.9205±0.0462)与磷酸化Akt蛋白表达(0.4091±0.0361,0.5484±0.0382,0.7496±0.0481)与对照组(磷酸化ERK 0.1836±0.0324,磷酸化Akt 0.2582±0.0215)相比有所增加(P<0.05)。结论乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes能促进HUVECs的增殖,其机制可能与细胞周期改变,以及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的持续活化有关。 展开更多

关键词 EXOSOMES 胞外信号调节激酶 蛋白激酶B 增殖 乳腺癌

在线阅读 下载PDF 职称材料

紫外分光光度法测定青蒿素的含量 被引量：28

5

作者 李春莉 王莎莉 +1 位作者 王亚平 柯大智 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第4期413-415,共3页

目的:建立测定青蒿中青蒿素含量的紫外分光光度检测方法,为筛选收购优质青蒿提供快速检测的方法。方法:用紫外分光光度计对青蒿素标准溶液进行波长扫描,确定最适吸收波长,在最适吸收波长下建立青蒿素标准品的吸光度-浓度曲线。根据标准... 目的:建立测定青蒿中青蒿素含量的紫外分光光度检测方法,为筛选收购优质青蒿提供快速检测的方法。方法:用紫外分光光度计对青蒿素标准溶液进行波长扫描,确定最适吸收波长,在最适吸收波长下建立青蒿素标准品的吸光度-浓度曲线。根据标准曲线测定青蒿样品中青蒿素的含量。结果:青蒿素的最适吸收波长为290.5nm,吸光度-浓度回归方程为:Y=0.043X+0.006,不同青蒿样品中青蒿素含量有差异。结论:紫外分光光度法测定青蒿中青蒿素成分含量操作简便、快捷、准确。 展开更多

关键词 青蒿素 紫外-可见分光光度法 含量测定

在线阅读 下载PDF 职称材料

IL-1β、TNF-α和IFN-γ引起的大鼠胰岛细胞凋亡及牛磺酸的影响 被引量：6

6

作者 余华荣 张能 +2 位作者 董毅龙 周琴 周岐新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1172-1175,共4页

目的:观察白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)引起胰岛细胞凋亡、胰岛素分泌、Bcl-xL和Bax蛋白表达变化及其牛磺酸的影响。方法:应用体外单层培养Wistar大鼠胰岛细胞,分别检测IL-1β、TNF-α和IFN-γ... 目的:观察白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)引起胰岛细胞凋亡、胰岛素分泌、Bcl-xL和Bax蛋白表达变化及其牛磺酸的影响。方法:应用体外单层培养Wistar大鼠胰岛细胞,分别检测IL-1β、TNF-α和IFN-γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、DNA片段、培养液中NO2-/NO3-含量及NOS活性、胰岛素分泌、Bcl-xL和Bax表达的影响,并进一步观察牛磺酸的作用。结果:IL-1β、TNF-α和IFN-γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率明显增加,DNA明显片段化,同时NO2-/NO3-含量和NOS活性亦明显升高,胰岛素分泌明显降低,Bcl-xL表达下降和Bax表达增强(P<0.01);牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用(P<0.01),并有一定的剂量依赖性。结论:牛磺酸能够改善IL-1β、TNF-α和IFN-γ诱导的胰岛细胞凋亡,其机制可能与抑制NOS活性从而减少NO的生成以及下调Bax/Bcl-xL比例有关。 展开更多

关键词 白细胞介素1 细胞凋亡 一氧化氮 基因表达 牛磺酸 胰岛

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛磺酸对细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡的影响 被引量：8

7

作者 余华荣 张能 方海立 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2001年第4期378-381,共4页

目的：观察牛磺酸对白细胞介素－１β（１Ｌ－１β）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）诱导的胰岛细胞凋亡的影响。方法：应用体外单层培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β、ＴＮＦ和ＩＦＮ－γ以及... 目的：观察牛磺酸对白细胞介素－１β（１Ｌ－１β）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）诱导的胰岛细胞凋亡的影响。方法：应用体外单层培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β、ＴＮＦ和ＩＦＮ－γ以及牛磺酸对胰岛细胞凋亡细胞百分率，培养液中ＮＯ含量及ＮＯＳ活性以及ＤＮＡ片段的影响。结果：ＩＬ－Ｉβ、ＴＮＦ和ＩＦＮ－γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率及ＤＮＡ片段明显增加，同时ＮＯ含量和ＮＯＳ活性亦明显升高（Ｐ＜０．０１）；牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用（Ｐ＜０．０１），且有剂量依赖性。结论：ＮＯ可能是介导上述细胞因子引起胰岛细胞凋亡的重要途径之一。牛磺酸能够改善细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡，其机制可能与抑制ＮＯＳ活性从而减少ＮＯ的生成有关。 展开更多

关键词 白细胞介素-1Β 细胞凋亡 一氧化氮 牛磺酸 胰岛细胞 糖尿病 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

大鼠皮层神经元原代培养方法的改进 被引量：8

8

作者 余华荣 杨贵忠 +2 位作者 杨俊卿 周岐新 汤为学 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第4期392-394,401,共4页

目的:建立一种简单、较理想的新生大鼠皮层神经元体外原代培养方法。方法:采用低浓度、短时间胰酶消化和机械分离相结合的方法制备皮层神经元悬液,进行培养。结果:在体外培养条件下神经元结构特征明显,并能形成典型的神经元网络。结论:... 目的:建立一种简单、较理想的新生大鼠皮层神经元体外原代培养方法。方法:采用低浓度、短时间胰酶消化和机械分离相结合的方法制备皮层神经元悬液,进行培养。结果:在体外培养条件下神经元结构特征明显,并能形成典型的神经元网络。结论:本方法适合普通实验室进行大鼠皮层神经元体外培养。 展开更多

关键词 细胞 培养的 神经系统 大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

环丙沙星致痫大鼠脑脊液氨基酸含量的变化 被引量：10

9

作者 周义文 钱元恕 陆杰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期295-298,共4页

目的　观察环丙沙星 (CPLX )致痫大鼠脑脊液 (CSF)中兴奋性氨基酸 [天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸(Glu) ]和抑制性氨基酸 [γ 氨基丁酸 (GABA)、甘氨酸 (Gly) ]含量的变化 ,探讨CPLX致痫的发生机制。方法给雄性大鼠静脉注射CPLX 10 0mg/kg ,... 目的　观察环丙沙星 (CPLX )致痫大鼠脑脊液 (CSF)中兴奋性氨基酸 [天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸(Glu) ]和抑制性氨基酸 [γ 氨基丁酸 (GABA)、甘氨酸 (Gly) ]含量的变化 ,探讨CPLX致痫的发生机制。方法给雄性大鼠静脉注射CPLX 10 0mg/kg ,于用药前 ,在小脑延髓池抽取CSF作为对照 ,用药后癫痫发作 40min时抽取CSF作为试验样本。CSF中氨基酸的含量用高效液相色谱法测定。结果　癫痫发作后 40min时 ,CSF中γ 氨基酸 (GABA)含量为 ( 1 72± 0 94μ)mol/L ,明显高于用药前的 ( 0 3 1± 0 2 3 ) μmol/L(P <0 0 1) ,而天冬氨酸 (Asp)、谷氨酸 (Glu)、甘氨酸 (Gly)的含量分别为 ( 9 64± 2 62 ) μmol/L、( 9 5 4± 8 5 8) μmol/L、( 18 96±2 84) μmol/L ,均明显低于用药前的 ( 14 5 7± 5 85 ) μmol/L、( 16 19± 7 5 6) μmol/L、( 2 7 66± 8 0 1) μmol/L(P<0 0 5～ 0 0 1)。结论　静注CPLX引起大鼠癫痫发作是由于CPLX明显影响了中枢神经系统内兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的代谢平衡 ,氨基酸含量的变化并可通过CSF中的氨基酸含量反映出来。 展开更多

关键词 氨基酸 脑脊液 环丙沙星 高效液相色谱法 癫痫

在线阅读 下载PDF 职称材料

UO-126对HeLa细胞增殖及对FBW7表达的影响 被引量：6

10

作者 孙迪 沈宜 +3 位作者 汪少华 向自武 谢莹珊 姜歆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期138-140,144,共4页

目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW... 目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW7 mRNA及蛋白在UO-126阻断丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein ki-nases,MAPK)信号通路前后的表达情况。结果:MTT结果显示各浓度UO-126具有抑制HeLa细胞增殖的作用,且具有剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05)。免疫荧光检测显示UO-126处理HeLa细胞后FBW7阳性表达增强。RT-PCR及West-ern blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞明显增高(P<0.05)。结论:MAPK信号通路阻断剂UO-126抑制HeLa细胞增殖,FBW7位于MAPK信号通路的下游。 展开更多

关键词 UO-126 宫颈癌细胞株(HeLa细胞) FBW7 MAPK

在线阅读 下载PDF 职称材料

中效原理在顺铂、足叶乙甙对人肺癌细胞株(PAa)相互作用中的应用 被引量：6

11

作者 沈宜 汤为学 +1 位作者 段红 唐俐 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第2期118-120,共3页

目的 :利用中效原理观察顺铂、足叶乙甙配伍在体外对人肺癌细胞株 (PAa)的相互作用 ,判断联合用药的效果。方法 :采用MTT法利用中效原理判断联合用药的效果。结果 :两种药物单独应用时随药物剂量增加 ,其效应也增加 ,两种药物合用时产... 目的 :利用中效原理观察顺铂、足叶乙甙配伍在体外对人肺癌细胞株 (PAa)的相互作用 ,判断联合用药的效果。方法 :采用MTT法利用中效原理判断联合用药的效果。结果 :两种药物单独应用时随药物剂量增加 ,其效应也增加 ,两种药物合用时产生协同作用 ,两种药物合用时的浓度比例及给药时间次序不同均会影响效应大小。结论 :上述两种药物合用产生协同作用 。 展开更多

关键词 顺铂 足叶乙苷 中效原理 肺肿瘤细胞株

在线阅读 下载PDF 职称材料

顺铂联合exosomes抗小鼠肝癌效应的实验研究 被引量：5

12

作者 汪少华 沈宜 +3 位作者 李静 向自武 范维珂 陈黎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期49-52,共4页

目的:评价顺铂(DDP)与exosomes联用的抗肿瘤效果,研究其可能机制。方法:采用MTT法检测顺铂对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,用H22源exosomes瘤苗免疫小鼠,3H-TdR释放法检测exosomes诱导产生的CTL活性及顺铂对CTL杀伤的增敏作用,RT-PCR检测... 目的:评价顺铂(DDP)与exosomes联用的抗肿瘤效果,研究其可能机制。方法:采用MTT法检测顺铂对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响,用H22源exosomes瘤苗免疫小鼠,3H-TdR释放法检测exosomes诱导产生的CTL活性及顺铂对CTL杀伤的增敏作用,RT-PCR检测顺铂作用后H22细胞中Fas及exosomes免疫后脾淋巴细胞FasL的mRNA表达水平,Western blot检测顺铂对H22细胞Fas的蛋白表达水平的影响。以小鼠肝癌H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,观察顺铂联合exosomes治疗对小鼠生存期的影响。结果:顺铂抑制H22细胞生长呈量效关系;exosomes免疫小鼠可诱导产生针对H22细胞的CTL反应,经2.5mg/L顺铂预处理24h的H22细胞对CTL杀伤的敏感性增强(P<0.05)。顺铂在mRNA和蛋白水平,显著增强H22Fas的表达;exosomes免疫小鼠后,脾淋巴细胞FasL表达增加。顺铂联合exosomes组小鼠生存期较单独治疗组及对照组明显延长(P<0.05)。结论:顺铂与exosomes联合治疗有协同抑制肿瘤的作用,产生协同作用的机制与增强CTL活性有关。 展开更多

关键词 顺铂 EXOSOMES 联合治疗 肿瘤疫苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

大蒜素诱导鼠肝癌细胞MM45T.Li细胞株凋亡 被引量：6

13

作者 张燕 沈宜 汤为学 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期240-243,共4页

目的探讨大蒜素对体外培养的鼠肝癌细胞MM45T.Li生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法用MTT法检测药物效应,透射电镜及流式细胞仪观察大蒜素处理MM45T.Li细胞后细胞凋亡和细胞周期的改变。结果①MTT法证实大蒜素对MM45T.Li细胞生长有... 目的探讨大蒜素对体外培养的鼠肝癌细胞MM45T.Li生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法用MTT法检测药物效应,透射电镜及流式细胞仪观察大蒜素处理MM45T.Li细胞后细胞凋亡和细胞周期的改变。结果①MTT法证实大蒜素对MM45T.Li细胞生长有抑制作用,呈浓度、剂量-效应关系。②DAN琼脂糖凝胶电泳可见细胞凋亡特征性“DAN梯形”。③流式细胞仪检测发现大蒜素处理MM45T.Li细胞后细胞周期滞留于G0/G1期,对照组及实验组细胞凋亡率分别为(4.98±4.841)%、(20.91±5.272)%,并可见凋亡峰。④透射电镜可见MM45T.Li细胞出现凋亡细胞形态学改变。结论大蒜素对鼠肝癌细胞MM45T.Li有抑制作用,其抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡、阻抑细胞周期有关。 展开更多

关键词 抑制 肿瘤 凋亡 细胞周期

在线阅读 下载PDF 职称材料

H_(22)源exosomes瘤苗在小鼠体内的抗肿瘤及免疫调节作用 被引量：4

14

作者 汪少华 沈宜 +3 位作者 李静 向自武 范维珂 孙迪 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期417-420,共4页

目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响。方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组。15d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,... 目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响。方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组。15d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,计算抑瘤率;分别称取脾重、胸腺重,检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数;用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况和细胞毒活性;酶连免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞产生IL-2、INF-γ的能力。结果:接种exosomes瘤苗能显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达42.26%;与对照组比较,实验组荷瘤鼠胸腺指数、脾指数显著提高(P<0.05);exosomes促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,同时脾淋巴细胞培养上清中IL-2、INF-γ的水平升高。结论:exosomes瘤苗可能通过增强小鼠的免疫功能抑制小鼠肝癌移植瘤生长。 展开更多

关键词 EXOSOMES 肝细胞癌 抗肿瘤免疫 肿瘤疫苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠肝癌细胞(H_(22))源外泌体的体内抗肝癌作用研究 被引量：3

15

作者 李静 沈宜 +2 位作者 杨麟 段红 郑维平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1836-1838,共3页

目的在荷瘤动物模型观察小鼠肝癌细胞(H22)来源的外泌体(exosomes)激发宿主抗肝癌免疫应答的效应。方法用自行分离纯化的小鼠肝癌细胞H22源外泌体免疫小鼠,然后给小鼠皮下注射H22肿瘤细胞,观察肿瘤的生长状况。用MTT法检测小鼠脾细胞增... 目的在荷瘤动物模型观察小鼠肝癌细胞(H22)来源的外泌体(exosomes)激发宿主抗肝癌免疫应答的效应。方法用自行分离纯化的小鼠肝癌细胞H22源外泌体免疫小鼠,然后给小鼠皮下注射H22肿瘤细胞,观察肿瘤的生长状况。用MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况和细胞毒活性;用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD4+、CD8+T淋巴细胞浸润情况。结果该外泌体使肿瘤出现时间延迟,肿瘤生长缓慢,小鼠生存率提高。促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,促进CD4+和CD8+T细胞活化。结论小鼠肝癌细胞(H22)源外泌体能诱导抗肿瘤应答,有效地诱导特异性的杀伤肿瘤细胞活性,有针对亲本细胞的免疫保护作用。 展开更多

关键词 外泌体 肝细胞癌 抗肿瘤免疫 肿瘤疫苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

姜黄素对人宫颈癌细胞Caski侵袭转移的影响 被引量：10

16

作者 徐昉 牟晓玲 赵敬 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期92-95,共4页

【目的】研究姜黄素对人宫颈癌细胞Caski侵袭转移的影响并探讨其可能的机制。【方法】以10,25,50μmol/L姜黄素处理Caski细胞24,48,72h后,MTT法检测其对Caski细胞的生长抑制作用。应用Transwell小室进行人工重组基底膜(Matrigel)侵袭和... 【目的】研究姜黄素对人宫颈癌细胞Caski侵袭转移的影响并探讨其可能的机制。【方法】以10,25,50μmol/L姜黄素处理Caski细胞24,48,72h后,MTT法检测其对Caski细胞的生长抑制作用。应用Transwell小室进行人工重组基底膜(Matrigel)侵袭和运动实验,观察姜黄素对Caski细胞侵袭和转移的影响。Westernblot检测细胞中MMP-2、MT1-MMP和NF-κB蛋白水平变化。【结果】应用姜黄素处理后人宫颈癌细胞生长受到抑制且作用呈时效-量效依赖关系;同时细胞侵袭和迁移能力明显降低;MMP-2,MT1-MMP和NF-κB蛋白的表达均明显减弱。【结论】姜黄素能够减弱人宫颈癌细胞Caski的侵袭和转移,其机制可能与降低MMP-2,MT1-MMPandNF-κB的表达有关。 展开更多

关键词 宫颈癌 姜黄素 侵袭 转移

在线阅读 下载PDF 职称材料

食管癌组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-2的表达及其意义 被引量：5

17

作者 綦俊 余和平 余畅 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期58-60,共3页

目的:探讨MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白在食管癌组织中的表达及其与肿瘤细胞侵袭转移的关系。方法:应用western-blot法检测80例食管癌组织、30例癌旁正常组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白表达情况,结合肿瘤的侵袭转移情况进行相关分析。结果... 目的:探讨MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白在食管癌组织中的表达及其与肿瘤细胞侵袭转移的关系。方法:应用western-blot法检测80例食管癌组织、30例癌旁正常组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白表达情况,结合肿瘤的侵袭转移情况进行相关分析。结果:MMP-2蛋白在癌旁正常组织中表达较低:0.51±0.11,在食管癌组织中表达明显增高:1.72±0.15(P<0.05),MMP-9蛋白在癌旁正常组织中表达为0.324±0.13,在食管癌组织中表达为1.33±0.16,(P<0.05)二者差异有显著性。食管癌组织中TIMP-2蛋白表达明显高于癌旁正常组织,分别为0.74±0.12和0.29±0.03(P<0.05)。随着肿瘤浸润深度增加,淋巴结转移的增多,肿瘤细胞分化程度的降低和TNM分期的进展,MMP-2、MMP-9蛋白表达明显升高(P<0.05),但TIMP-2蛋白表达无明显差异,MMP-2/TIMP-2与肿瘤分期呈正相关趋势。结论:MMP-2、MMP-9蛋白在食管癌组织中表达上调,且与肿瘤分期、肿瘤浸润深度以及淋巴结转移成正相关趋势,提示该蛋白在肿瘤的侵袭转移中起重要作用。TIMP-2蛋白表达增高可能是机体抑制肿瘤细胞侵袭转移的机制之一,MMP-2与TIMP-2的对比关系在食管癌的侵袭转移中起到关键的作用。 展开更多

关键词 食管癌 MMP-2 MMP-9 TIMP-2 侵袭转移

在线阅读 下载PDF 职称材料

Amadori糖化白蛋白对牛视网膜血管二酯酰甘油——蛋白激酶C级联的影响 被引量：4

18

作者 周波 汪恕萍 +2 位作者 蒋涛 汤为学 曾昭淳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第2期127-130,共4页

目的 :探讨Amadori糖化血清白蛋白对牛视网膜血管二酯酰甘油 (DAG)———蛋白激酶C(PKC)信号级联的影响及d-α-生育酚的干预作用。方法 :体外制备的Amadori糖化的牛血清白蛋白 (AGSA)分别在生理浓度葡萄糖 (5 .5mmol/L)和高浓度葡萄糖 (... 目的 :探讨Amadori糖化血清白蛋白对牛视网膜血管二酯酰甘油 (DAG)———蛋白激酶C(PKC)信号级联的影响及d-α-生育酚的干预作用。方法 :体外制备的Amadori糖化的牛血清白蛋白 (AGSA)分别在生理浓度葡萄糖 (5 .5mmol/L)和高浓度葡萄糖 (2 0mmol/L)培养液中作用于新鲜牛视网膜血管。采用薄层层析和放射自显影法测定DAG含量和PKC活性 ;并检测d -α-生育酚预处理后DAG、PKC改变。结果 :在生理葡萄糖浓度下 ,牛视网膜血管暴露于AGSA2 4h或 72h后细胞内DAG含量、PKC活性均较对照组显著增加 ,当AGSA和高葡萄糖同时作用于牛视网膜血管时 ,DAG -PKC级联显著激活 ,分别为正常葡萄糖组的 3.4 7倍和 4 .5 4倍 ;在正常血清培养液中 ,与 5 .5mmol/L的葡萄糖相比 ,2 0mmol/L高糖在 2 4h时并不刺激DAG含量增加 (P >0 .0 5 ) ,而 72h时则较对照组增加 4 5 % ,PKC活性较对照增加 5 6 % ,而d -α -生育酚可逆转上述生化改变。结论 :Amadori糖化血清白蛋白可在生理葡萄糖浓度下刺激DAG -PKC途径活化 ,从而影响血管一系列生理功能 ,而d -α-生育酚对血管生化改变有保护作用。 展开更多

关键词 糖化血清蛋白 二酯酰甘油 蛋白激酶C 视网膜血管

在线阅读 下载PDF 职称材料

大鼠脑皮质微血管内皮细胞的培养 被引量：7

19

作者 吴文斌 胡常林 汤为学 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2002年第2期151-152,155,共3页

目的:培养脑皮质微血管内皮细胞。方法:取～乳鼠脑皮质经不同孔径的筛网过滤后,用胶原酶振荡消15d Wistar,化获得的微血管内皮细胞进行培养,用Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定。结果:培养的细胞呈单层贴壁生长,～呈典型的铺79d路卵石样征象... 目的:培养脑皮质微血管内皮细胞。方法:取～乳鼠脑皮质经不同孔径的筛网过滤后,用胶原酶振荡消15d Wistar,化获得的微血管内皮细胞进行培养,用Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定。结果:培养的细胞呈单层贴壁生长,～呈典型的铺79d路卵石样征象。结论:建立了一种简便易行的培养脑皮质微血管内皮细胞的方法。 展开更多

关键词 细胞培养 同血管内皮细胞 WISTAR大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

Ras信号通路阻断剂FTI-277抑制HeLa细胞增殖及对cyclin E表达的影响 被引量：3

20

作者 孙迪 沈宜 +3 位作者 汪少华 向自武 谢莹珊 姜歆 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期84-85,87,共3页

目的:观察Ras信号通路阻断剂(FTI-277)在人类宫颈癌细胞株HeLa细胞中对细胞周期素E(cyclin E)表达及对HeLa增殖、凋亡的影响情况。方法:采用MTT法观察不同浓度的FTI-277对HeLa细胞的生长抑制作用;流式细胞术(FCM)观察Hela细胞的细胞周... 目的:观察Ras信号通路阻断剂(FTI-277)在人类宫颈癌细胞株HeLa细胞中对细胞周期素E(cyclin E)表达及对HeLa增殖、凋亡的影响情况。方法:采用MTT法观察不同浓度的FTI-277对HeLa细胞的生长抑制作用;流式细胞术(FCM)观察Hela细胞的细胞周期变化;RT-PCR、Western blot法检测FTI-277阻断Ras信号通路前后HeLa细胞cyclin E mRNA及蛋白表达。结果:各浓度范围FTI-277均能抑制HeLa细胞的增殖,且具有剂量依赖性和时间依赖性。流式细胞术分析显示,FTI-277作用后的HeLa细胞明显滞留于G1/S期,且具有时间依赖性。RT-PCR及Western blot结果显示,FTI-277作用前后HeLa细胞cyclin E mRNA表达无明显变化,而蛋白表达水平明显降低。结论:FTI-277可以抑制细胞增殖,Ras信号转导通路可能是通过影响HeLa细胞cyclin E转录后的翻译环节减少其表达。 展开更多

关键词 FTI-277 宫颈癌细胞株(HeLa细胞) CYCLINE RAS

在线阅读 下载PDF 职称材料