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MicroRNA-193b对K562细胞bcr/abl表达的影响
被引量：
1
1
作者
舒燕
齐杰玉
+2 位作者
王灿蔚
于淑静
陶崑
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第19期1955-1959,共5页
目的用Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞,探讨miR-193b在细胞中过表达对bcr/abl表达的影响。方法将前期构建的Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞后,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-193b的表达;qRT-PCR检测bcr/abl融合...
目的用Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞,探讨miR-193b在细胞中过表达对bcr/abl表达的影响。方法将前期构建的Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞后,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-193b的表达;qRT-PCR检测bcr/abl融合基因的表达;Western blot检测BCR/ABL融合蛋白的表达;CCK-8检测K562细胞的增殖情况,流式细胞术(FCM)检测K562细胞凋亡率。结果与对照比较,K562细胞感染Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒后,miR-193b表达明显升高;bcr/abl融合基因及BCR/ABL融合蛋白表达明显下调;K562细胞增殖能力明显降低(P<0.05),凋亡水平明显升高(P<0.05)。结论 miR-193b可下调bcr/abl表达,抑制K562细胞的生物学效应,过表达miR-193b能作为治疗CML的有效手段。
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关键词
miR-193b
K562细胞
BCR/ABL
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职称材料
含miR-193b前体基因的重组腺病毒感染K562细胞可抑制其增殖
2
作者
舒燕
齐杰玉
+2 位作者
王灿蔚
于淑静
陶崑
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期452-455,共4页
目的构建小RNA193前体(pre-miR-193b)重组腺病毒,观察miR-193b对慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响。方法化学合成miR-193b cDNA序列,克隆进入pAdTrack-CMV穿梭质粒;重组穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1...
目的构建小RNA193前体(pre-miR-193b)重组腺病毒,观察miR-193b对慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响。方法化学合成miR-193b cDNA序列,克隆进入pAdTrack-CMV穿梭质粒;重组穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞中进行同源重组,获得pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经PacI线性化后转入HEK293细胞包装、扩增。倍比稀释法测定病毒滴度。实时荧光定量PCR检测K562细胞中miR-193b表达水平,MTT法检测K562细胞增殖能力。结果pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经限制性内切酶鉴定和测序分析显示构建成功,并能够高效转染K562细胞;与对照组相比,荧光定量PCR检测显示重组腺病毒载体感染K562细胞后,miR-193b基因表达明显增加;同时高表达miR-193b基因的K562细胞增殖水平低于对照组。结论K562细胞高效表达的miR-193b可抑制K562细胞的增殖。
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关键词
腺病毒
微小RNA193前体
K562细胞
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职称材料
题名
MicroRNA-193b对K562细胞bcr/abl表达的影响
被引量：
1
1
作者
舒燕
齐杰玉
王灿蔚
于淑静
陶崑
机构
重庆医科大学基础医学院免疫学教研室分子医学与肿瘤研究中心
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第19期1955-1959,共5页
基金
重庆市自然科学基金(CSTC2010BB5369S)~~
文摘
目的用Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞,探讨miR-193b在细胞中过表达对bcr/abl表达的影响。方法将前期构建的Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒感染K562细胞后,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-193b的表达;qRT-PCR检测bcr/abl融合基因的表达;Western blot检测BCR/ABL融合蛋白的表达;CCK-8检测K562细胞的增殖情况,流式细胞术(FCM)检测K562细胞凋亡率。结果与对照比较,K562细胞感染Ad-pre-miRNA-193b重组腺病毒后,miR-193b表达明显升高;bcr/abl融合基因及BCR/ABL融合蛋白表达明显下调;K562细胞增殖能力明显降低(P<0.05),凋亡水平明显升高(P<0.05)。结论 miR-193b可下调bcr/abl表达,抑制K562细胞的生物学效应,过表达miR-193b能作为治疗CML的有效手段。
关键词
miR-193b
K562细胞
BCR/ABL
Keywords
miR-193b
K562细胞
bcr/abl
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
R733.72 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
含miR-193b前体基因的重组腺病毒感染K562细胞可抑制其增殖
2
作者
舒燕
齐杰玉
王灿蔚
于淑静
陶崑
机构
重庆医科大学基础医学院免疫学教研室分子医学与肿瘤研究中心
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期452-455,共4页
基金
重庆市科委课题(CSTC:2010BB5369S)
文摘
目的构建小RNA193前体(pre-miR-193b)重组腺病毒,观察miR-193b对慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响。方法化学合成miR-193b cDNA序列,克隆进入pAdTrack-CMV穿梭质粒;重组穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞中进行同源重组,获得pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经PacI线性化后转入HEK293细胞包装、扩增。倍比稀释法测定病毒滴度。实时荧光定量PCR检测K562细胞中miR-193b表达水平,MTT法检测K562细胞增殖能力。结果pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经限制性内切酶鉴定和测序分析显示构建成功,并能够高效转染K562细胞;与对照组相比,荧光定量PCR检测显示重组腺病毒载体感染K562细胞后,miR-193b基因表达明显增加;同时高表达miR-193b基因的K562细胞增殖水平低于对照组。结论K562细胞高效表达的miR-193b可抑制K562细胞的增殖。
关键词
腺病毒
微小RNA193前体
K562细胞
Keywords
adenovirus
pre-miR-193b
K562 cell
分类号
Q279 [生物学—细胞生物学]
Q253 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MicroRNA-193b对K562细胞bcr/abl表达的影响
舒燕
齐杰玉
王灿蔚
于淑静
陶崑
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
含miR-193b前体基因的重组腺病毒感染K562细胞可抑制其增殖
舒燕
齐杰玉
王灿蔚
于淑静
陶崑
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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