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题名NK4基因的克隆及其在Raji细胞中的表达
被引量:5
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作者
滑世轩
岑东
赵行
吕建新
涂植光
裴仁治
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机构
温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室
浙江省鄞州人民医院血液科
重庆医科大学医学检验系教育部"临床检验诊断学"省部共建重点实验室
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出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期970-975,共6页
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基金
浙江省医药卫生科学基金资助项目(No2003B172
No.2007A175)
+1 种基金
宁波市医药卫生科学基金资助项目(No.2003079)
宁波市科技计划资助项目(No.2007C10065)
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文摘
目的:克隆NK4基因,构建其重组真核表达载体,并观察其在Raji细胞中的表达。方法:从人肝组织中提取总RNA,行RT-PCR获得NK4基因cDNA,与载体pVITRO2-mcs构建重组真核表达载体,转染Raji细胞。潮霉素B筛选后,采用实时荧光定量PCR、ELISA、细胞免疫组化和半固体培养等方法检测NK4基因在Raji细胞的表达,筛选稳定表达的细胞株。结果:NK4基因获成功克隆并构建了重组真核表达载体pVITRO2-mcs-NK4;转染NK4基因后的Raji细胞经RT-PCR发现存在特异性DNA片段。NK4基因在Raji细胞可稳定表达NK4mR-NA和蛋白,且可抑制Raji细胞的增殖、迁徙和侵袭。结论:NK4基因成功克隆并构建了重组真核表达载体,转染Raji细胞后表达稳定。
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关键词
基因
NK4
克隆
基因表达
RAJI细胞
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Keywords
Genes, NK4
Cloning
Gene expression
Raji cells
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分类号
R363
[医药卫生—病理学]
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