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RNAi重组体抑制白血病K562细胞系中NPM1基因的表达被引量：3: 1; 作者何鹏骆展鹏 +3 位作者张伶杨松钟晓明高玉洁《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期938-941,共4页; 目的构建核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin1,NPM1)特异性的RNAi真核表达载体,观察对白血病K562细胞系NPM1表达的抑制作用。方法采用RT-PCR检测白血病细胞系(THP1和K562)和急性髓系白血病(AML)细胞NPM1mRNA水平。设计合成2条针对NPM1基因并... 展开更多; 关键词核仁磷酸蛋白1 RNA干扰白血病 K562细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

稳定表达BCR／ABL的小鼠BaF3-P210细胞株的建立及其生物学特性的研究被引量：11: 2; 作者史梦冯文莉 +8 位作者张文萍王小中黄世锋曾建明温健萍陶昆陈新敏曹唯希黄宗干《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1791-1794,共4页; 目的构建能稳定表达BCR/ABL的小鼠转化细胞株BaF3-P210,并初步探讨BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。方法将含有bcr/abl基因的逆转录病毒载体转染到包装细胞,收集病毒感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆,获得稳定表达BCR/ABL的转基因BaF3-P... 展开更多; 关键词慢性粒细胞白血病 BCR/ABL融合基因逆转录病毒载体 BaF3细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

钟基因Per2对白血病K562细胞增殖、分化、凋亡的影响及其机制研究被引量：3: 3; 作者孙成铭黄世峰 +7 位作者罗红伟刘钉宾田文君朱喜丹冯文莉涂植光温健萍黄宗干《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期301-306,共6页; 目的研究钟基因Period2(Per2)对慢粒急变K562细胞株增殖、分化、凋亡的影响及可能的分子机制。方法将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染K562细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株。瑞氏染色... 展开更多; 关键词钟基因增殖凋亡细胞周期节律调节; 在线阅读下载PDF 职称材料

Apg-2对H2O2诱导的BaF3-P210细胞损伤的影响被引量：2: 4; 作者李春莉刘钉宾 +5 位作者袁颖彭智陶崑史梦黄宗干冯文莉《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期1621-1624,共4页; 目的探讨Apg-2对H2O2诱导的Bcr/Abl阳性BaF3-P210细胞损伤的影响。方法以H2O2诱导的pMIGR1空载体感染细胞BaF3-MIGR1和稳定表达Bcr/Abl的BaF3-P210细胞为损伤模型,Western blot和RT-PCR检测H2O2损伤后2组细胞Apg-2表达;建立过表达Apg-2... 展开更多; 关键词 Apg-2 H2O2慢性粒细胞白血病 Bcr/Ab1 细胞损伤; 在线阅读下载PDF 职称材料

结核菌H37Ra在小鼠体内诱导的抗结核细胞免疫应答的研究被引量：1: 5; 作者王淑玲刘来成 +1 位作者卢贤瑜冯文莉《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第5期553-556,共4页; 目的:研究结核菌H37Ra免疫小鼠后产生的特异性细胞免疫应答及其对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)毒株感染的保护力。方法:Balb/c小鼠随机分为H37Ra组、BCG组和生理盐水(NS)组,皮内免疫8周后处死小鼠,流式细胞分析仪检测... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌 H37RA 细胞免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

柔红霉素体外对HL-60细胞的凋亡作用被引量：1: 6; 作者陈敏冯文莉黄宗干《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2002年第1期59-61,共3页; 目的：了解柔红霉素（ＤＮＲ）体外作用于ＨＬ－６０　细胞时产生凋亡的规律及一些相关蛋白表达的变化。方法：应用光镜、ＤＮＡ电泳及ＦＣＭ检测ＨＬ－６０细胞发生的凋亡模式；用ＩＣ、ＦＣＭ观察相关蛋白的变化。结果：当ＤＮＲ浓度... 展开更多; 关键词柔红霉素细胞凋亡白血病; 在线阅读下载PDF 职称材料

hnRNPE2诱骗RNA逆转32D-BCR-ABL细胞四倍性的研究: 7; 作者王雅珍袁颖 +5 位作者曾建明魏容彭智肖青陈新敏冯文莉《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期942-945,共4页; 目的初步探讨多聚胞嘧啶结合蛋白E2(hnRNPE2)诱骗RNA对逆转细胞的四倍体特性的作用。方法取32Dcl3细胞(小鼠正常髓母细胞),32D-BCR-ABL细胞(含人类bcr-ablcDNA的转化细胞),32DP210-pGD细胞和32DP210-pGM细胞(表达hnRNPE2诱骗RNA野生型序... 展开更多; 关键词白血病髓样慢性融合蛋白质类 bcr-abl 多倍性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名RNAi重组体抑制白血病K562细胞系中NPM1基因的表达被引量：3: 1; 作者何鹏骆展鹏张伶杨松钟晓明高玉洁; 机构重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期938-941,共4页; 基金重庆市教委科学技术研究基金(KJ050309)~~; 文摘目的构建核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin1,NPM1)特异性的RNAi真核表达载体,观察对白血病K562细胞系NPM1表达的抑制作用。方法采用RT-PCR检测白血病细胞系(THP1和K562)和急性髓系白血病(AML)细胞NPM1mRNA水平。设计合成2条针对NPM1基因并具有小发夹结构的DNA序列,经退火形成互补双链,再克隆至载体pGenSil-1中构建含NPM1的RNAi重组体,经酶切及测序鉴定后通过脂质体转染K562细胞,同时设立pGenSil-1转染组和pGenSil-1/neg转染组。采用RT-PCR检测各组转染细胞中NPM1的mRNA水平。结果白血病细胞系和AML细胞均高表达NPM1 mRNA。针对人NPM1基因的RNAi重组体构建成功,并能够稳定转染K562细胞,导致白血病细胞NPM1mR-NA相对表达量下降64%,而pGenSil-1转染组和pGenSil-1/neg转染组未能下调NPM1表达。结论白血病细胞高表达NPM1基因,其mRNA表达水平能够被靶向NPM1的RNAi重组体特异性地下调。; 关键词核仁磷酸蛋白1 RNA干扰白血病 K562细胞; Keywords nucleophosmin 1 RNA interference leukemia K562 cells; 分类号 R394.3 [医药卫生—医学遗传学] R73-362 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名稳定表达BCR／ABL的小鼠BaF3-P210细胞株的建立及其生物学特性的研究被引量：11: 2; 作者史梦冯文莉张文萍王小中黄世锋曾建明温健萍陶昆陈新敏曹唯希黄宗干; 机构重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室 Canadian Blood Services 重庆医科大学附属第一医院血液科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1791-1794,共4页; 基金教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20050631007)~~; 文摘目的构建能稳定表达BCR/ABL的小鼠转化细胞株BaF3-P210,并初步探讨BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。方法将含有bcr/abl基因的逆转录病毒载体转染到包装细胞,收集病毒感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆,获得稳定表达BCR/ABL的转基因BaF3-P210细胞。用PCR、DNA测序、RT-PCR和Westernblot检测bcr/abl基因在靶细胞中的整合和表达;用台盼蓝细胞计数法、流式细胞仪(FCM)和MTT法研究BCR/ABL对BaF3细胞生物学特性的影响。结果bcr/abl基因整合在BaF3细胞基因组中,BaF3-P210细胞能稳定表达bcr/abl基因及其蛋白。与对照组相比,BaF3-P210细胞增殖速度增快(P<0.05);G0/G1期细胞比例下降,S期和G2/M期细胞比例增高(P<0.05);经STI571处理后的细胞增殖抑制率为(54.08±1.90)%(P<0.05),早期凋亡率为(12.35±2.04)%(P<0.05)。结论成功构建的能稳定表达BCR/ABL的小鼠BaF3-P210转化细胞株具有增殖能力增强、细胞周期进程加速和对STI571敏感的恶性表型特征。; 关键词慢性粒细胞白血病 BCR/ABL融合基因逆转录病毒载体 BaF3细胞; Keywords chronic myeloid leukemia bcr/abl fusion gene retroviral vector BaF3 cell line; 分类号 R73-354 [医药卫生—肿瘤] R730.23 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名钟基因Per2对白血病K562细胞增殖、分化、凋亡的影响及其机制研究被引量：3: 3; 作者孙成铭黄世峰罗红伟刘钉宾田文君朱喜丹冯文莉涂植光温健萍黄宗干; 机构重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室 Canadian Blood Services 重庆医科大学附属第一医院血液科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期301-306,共6页; 基金国家自然科学基金(30600748)~~; 文摘目的研究钟基因Period2(Per2)对慢粒急变K562细胞株增殖、分化、凋亡的影响及可能的分子机制。方法将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染K562细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株。瑞氏染色观察细胞形态,台盼蓝拒染法和MTT法检测K562细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,电镜观察细胞凋亡,RT-PCR及Western blot方法检测该细胞株中增殖、凋亡相关基因p53、cyclin B1和c-myc等的表达。结果筛选到稳定表达Per基因的稳定表达细胞株K562/Per2细胞,与空载体转染组及未处理对照组细胞相比,K562/Per2细胞体积缩小,但是分化不明显;台盼蓝拒染法和MTT实验发现Per2抑制细胞生长与增殖能力;流式细胞仪检测周期结果K562/Per2细胞中G2期细胞增多[转染组(36.1±5.5)%,空载组(12.5±2.9)%,未处理对照组(9.7±2.3)%,P<0.05],凋亡检测显示转染组细胞凋亡明显增加[14.8%P<0.05];电镜结果显示染色质浓集、断裂,核固缩和凋亡小体;RT-PCR及Western blot显示Per2明显上调p53基因的mRNA和蛋白表达,而抑制cyclin B1、c-myc基因mR-NA和蛋白的表达。结论钟基因Per2能抑制K562细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,但对分化无明显作用。其机制可能是通过对细胞周期相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的。; 关键词钟基因增殖凋亡细胞周期节律调节; Keywords circadian clock gene proliferation apoptosis cell cycle rhythm regulation; 分类号 R394.2 [医药卫生—医学遗传学] R730.23 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Apg-2对H2O2诱导的BaF3-P210细胞损伤的影响被引量：2: 4; 作者李春莉刘钉宾袁颖彭智陶崑史梦黄宗干冯文莉; 机构重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室重庆医科大学附属第一医院普外科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期1621-1624,共4页; 基金教育部博士学科点专项基金(2005631007)~~; 文摘目的探讨Apg-2对H2O2诱导的Bcr/Abl阳性BaF3-P210细胞损伤的影响。方法以H2O2诱导的pMIGR1空载体感染细胞BaF3-MIGR1和稳定表达Bcr/Abl的BaF3-P210细胞为损伤模型,Western blot和RT-PCR检测H2O2损伤后2组细胞Apg-2表达;建立过表达Apg-2的BaF3-MIGR1细胞(BaF3-MIGR1-Apg2)和BaF3-P210细胞(BaF3-P210-Apg2)H2O2诱导的损伤模型,Western blot检测磷酸化组蛋白(γ-H2AX)的表达,免疫荧光法检测γ-H2AX焦点数。结果 H2O2作用后的BaF3-MIGR1和BaF3-P210细胞的Apg-2蛋白和mRNA水平表达均升高(P<0.05)。H2O2作用BaF3-MIGR1和BaF3-MIGR1-Apg2细胞后其γ-H2AX蛋白表达升高,γ-H2AX焦点数亦增加;BaF3-P210和BaF3-P210-Apg2细胞H2O2损伤后γ-H2AX蛋白表达和焦点数均无明显变化。结论 Apg-2可减少H2O2诱导的BaF3-P210细胞γ-H2AX表达,从而可能降低其细胞损伤。; 关键词 Apg-2 H2O2慢性粒细胞白血病 Bcr/Ab1 细胞损伤; Keywords Apg-2 H2O2 chronic granulocyte leukemia Bcr/Abl cell damage; 分类号 R341 [医药卫生—基础医学] R730.23 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结核菌H37Ra在小鼠体内诱导的抗结核细胞免疫应答的研究被引量：1: 5; 作者王淑玲刘来成卢贤瑜冯文莉; 机构重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室重庆医科大学附属儿童医院检验科重庆医科大学临床免疫学教研室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第5期553-556,共4页; 基金重庆市教委科研基金(2004-12) 重庆医科大学科技创新基金(CX200204); 文摘目的:研究结核菌H37Ra免疫小鼠后产生的特异性细胞免疫应答及其对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)毒株感染的保护力。方法:Balb/c小鼠随机分为H37Ra组、BCG组和生理盐水(NS)组,皮内免疫8周后处死小鼠,流式细胞分析仪检测小鼠脾脏T淋巴细胞亚群的变化;取小鼠脾淋巴细胞体外培养并用PPD刺激,MTT法检测脾淋巴细胞的刺激指数(SI);ELISA法检测培养上清液中IFN-γ;免疫后第8周,用MTB毒株H37Rv经小鼠腹腔注射,4周后处死小鼠,测定小鼠肺脏荷菌量,观察免疫小鼠对MTB抵抗作用。结果:H37Ra免疫小鼠脾脏CD3^+T细胞、CD4^+T细胞的百分率分别为(41.63±1.68)%、(27.08±0.58)%,显著高于NS对照组(38.34±0.74)%、(24.37±1.60)%(P<0.05)。H37Ra免疫组脾脏CD3^+T细胞、CD4^+T细胞及CD8^+T细胞的百分率均不同程度地高于BCG免疫组,但差异无统计学意义。脾淋巴细胞SI和IFN-γ水平检测均发现H37Ra免疫组显著高于NS对照组(P<0.05),略高于BCG免疫组。感染4周后H37Ra组小鼠肺脏荷菌量与NS对照组比较下降0.954log_(10)CFU,差异有显著性(P<0.05),与BCG组之间差异均无显著性(P>0.05)。结论:H37Ra免疫小鼠后可以诱导产生特异性抗结核的细胞免疫应答,能够抵抗毒株H37Rv的攻击,且免疫效果与BCG相近。; 关键词结核分枝杆菌 H37RA 细胞免疫; Keywords Mycobacterium tuberculosis H37Ra Cellular immune response; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名柔红霉素体外对HL-60细胞的凋亡作用被引量：1: 6; 作者陈敏冯文莉黄宗干; 机构重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室重庆医科大学临床学院血液科; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2002年第1期59-61,共3页; 文摘目的：了解柔红霉素（ＤＮＲ）体外作用于ＨＬ－６０　细胞时产生凋亡的规律及一些相关蛋白表达的变化。方法：应用光镜、ＤＮＡ电泳及ＦＣＭ检测ＨＬ－６０细胞发生的凋亡模式；用ＩＣ、ＦＣＭ观察相关蛋白的变化。结果：当ＤＮＲ浓度为０．２μＭ～２μＭ时，ＨＬ－６０细胞发生的凋亡率随浓度的增加与作用时间的延长而升高，可见典型的凋亡细胞及明显的ＤＮＡ梯度条带。１μＭ　ＤＮＲ作用２ｈ时，ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ的荧光强度指数（ＦＩ）降低，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３　的　ＦＩ　升高；而作用５ｈ时，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３的ＦＩ值反而降低。结论：一定浓度的ＤＮＲ在体外可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，它可抑制ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达，而激活ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白的表达。; 关键词柔红霉素细胞凋亡白血病; Keywords Daunorubicin Cell apoptosis; 分类号 R733.705 [医药卫生—肿瘤] R730.53 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hnRNPE2诱骗RNA逆转32D-BCR-ABL细胞四倍性的研究: 7; 作者王雅珍袁颖曾建明魏容彭智肖青陈新敏冯文莉; 机构重庆医科大学医学检验系临床血液学教研室重庆医科大学附属第一医院普外科; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期942-945,共4页; 基金国家自然科学基金(30600748); 文摘目的初步探讨多聚胞嘧啶结合蛋白E2(hnRNPE2)诱骗RNA对逆转细胞的四倍体特性的作用。方法取32Dcl3细胞(小鼠正常髓母细胞),32D-BCR-ABL细胞(含人类bcr-ablcDNA的转化细胞),32DP210-pGD细胞和32DP210-pGM细胞(表达hnRNPE2诱骗RNA野生型序列pGD和突变性序列pGM的32D-BCR-ABL细胞)作为研究对象。采用流式细胞仪进行细胞的DNA倍体测定;对细胞进行染色体计数,确定染色体核型;采用Western blotting检测细胞cyclinB1和p53蛋白的表达。结果所有32Dcl3均为含40条正常染色体的二倍体细胞,32DP210-pGD细胞中,75.83%以上为二倍体细胞群;32DP210-pGM细胞与32D-BCR-ABL细胞内分别含81.25%和85.81%的四倍体细胞,含80条染色体。与32D-BCR-ABL细胞相比,32DP210-pGD细胞的cyclinB1蛋白水平表达下调,p53蛋白水平无明显变化;32DP210-pGM细胞的cyclinB1和p53蛋白表达均无明显变化。结论 hnRNPE2诱骗RNA能逆转32D-BCR-ABL细胞的四倍体特性。; 关键词白血病髓样慢性融合蛋白质类 bcr-abl 多倍性; Keywords leukemia myeloid chronic fusion proteins bcr-abl polyploidy; 分类号 R965.1 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	RNAi重组体抑制白血病K562细胞系中NPM1基因的表达	何鹏骆展鹏张伶杨松钟晓明高玉洁	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	稳定表达BCR／ABL的小鼠BaF3-P210细胞株的建立及其生物学特性的研究	史梦冯文莉张文萍王小中黄世锋曾建明温健萍陶昆陈新敏曹唯希黄宗干	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	11	在线阅读下载PDF 职称材料
3	钟基因Per2对白血病K562细胞增殖、分化、凋亡的影响及其机制研究	孙成铭黄世峰罗红伟刘钉宾田文君朱喜丹冯文莉涂植光温健萍黄宗干	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	Apg-2对H2O2诱导的BaF3-P210细胞损伤的影响	李春莉刘钉宾袁颖彭智陶崑史梦黄宗干冯文莉	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	结核菌H37Ra在小鼠体内诱导的抗结核细胞免疫应答的研究	王淑玲刘来成卢贤瑜冯文莉	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	柔红霉素体外对HL-60细胞的凋亡作用	陈敏冯文莉黄宗干	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	hnRNPE2诱骗RNA逆转32D-BCR-ABL细胞四倍性的研究	王雅珍袁颖曾建明魏容彭智肖青陈新敏冯文莉	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料