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Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响
被引量：
2
1
作者
王洪鹏
王驰
+2 位作者
谭毅
叶琳
陈鸿雁
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期157-160,共4页
目的探讨肿瘤转移抑制基因Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响。方法以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,以转染空病毒载...
目的探讨肿瘤转移抑制基因Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响。方法以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,以转染空病毒载体及未转染Kai1的喉癌细胞株为对照,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定Kai1对细胞增殖能力的影响,用RT-PCR技术对转染后的细胞进行检测。结果rAd-Kai1经扩增、纯化后,滴度可达6×1010PFU/ml,当病毒量为30 MOI时,Hep-2细胞的转染率可达90%以上。MTT实验显示转染空腺病毒组与未转染组比较,Hep-2细胞株体外增殖能力无统计学差异,转染Kai1组Hep-2细胞株体外增殖能力明显弱于未转染组(P<0.05),抑制率可达29%。结论肿瘤转移抑制基因Kai1/CD82对喉癌细胞株体外增殖能力具有抑制作用。
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关键词
KAI1/CD82
HEP-2
喉肿瘤
腺病毒载体
转染
细胞增殖
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职称材料
人乳头瘤病毒关键基因在裸鼠体内表达的初步研究
被引量：
2
2
作者
潘巍巍
徐营
+4 位作者
易发平
曹利仙
卜友泉
赖国旗
宋方洲
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期209-214,共6页
目的:初步研究HPV16E6/E7基因在裸鼠体内不同组织引起的病变。方法:将重组腺病毒Ad-CMV-E6/E7、Ad-K14-E6/E7病毒上清以及作为对照的重组腺病毒空载体pAd-CMV和pAdtrack的上清液,经过纯化后,通过裸鼠的尾缘静脉注射到裸鼠体内,并每天注...
目的:初步研究HPV16E6/E7基因在裸鼠体内不同组织引起的病变。方法:将重组腺病毒Ad-CMV-E6/E7、Ad-K14-E6/E7病毒上清以及作为对照的重组腺病毒空载体pAd-CMV和pAdtrack的上清液,经过纯化后,通过裸鼠的尾缘静脉注射到裸鼠体内,并每天注射0.05mg雌激素到注射病毒的裸鼠,同时做阴性对照。12周后给裸鼠注射2.5%阿佛丁进行麻醉,并将其耳朵、头颈部皮肤、口腔黏膜、结肠、直肠、子宫颈-阴道移行区等组织取出,浸泡在3.75%多聚甲醛中4℃固定过夜,然后做石蜡包埋切片、HE染色、免疫组化检测P53蛋白和Bcl-2的表达,取裸鼠的各个组织提取DNA、RNA和蛋白质,然后分别检测有无重组腺病毒的感染、病毒表达的情况及E6蛋白的表达。结果:实验组1注射腺病毒Ad-K14-E6/E7的裸鼠组织HE染色结果显示裸鼠子宫颈-阴道移行处的增生较明显。SP法免疫组化发现突变型P53和Bcl-2在该组裸鼠的子宫颈-阴道移行处表达都增加(P<0.05),并且RT-PCR检测子宫颈-阴道移行处组织也有E6/E7的表达,Western blotting检测该组织也有E6蛋白的表达。结论:K14启动子增加了E6/E7在裸鼠子宫颈-阴道移行处的表达,并且使子宫颈-阴道移行处的上皮组织发生病变。
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关键词
乳头状瘤病毒
人
腺病毒
基因
E6/E7
小鼠
裸
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职称材料
Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖及生长周期的影响
被引量：
1
3
作者
王洪鹏
叶琳
+3 位作者
黄闯
王驰
谭毅
陈鸿雁
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期519-521,共3页
目的:探讨肿瘤转移抑制基因Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力及生长周期的影响。方法:本研究以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,利...
目的:探讨肿瘤转移抑制基因Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力及生长周期的影响。方法:本研究以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,利用RT-PCR技术对转染效果进行检测,以未转染Kai1的喉癌细胞株为对照组,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术测定转染组细胞株的增殖抑制率和细胞周期。结果:rAd-Kai1经扩增、纯化后,滴度可达1010PFU/ml,当病毒量为30MOI时,对Hep-2细胞的转染率达93%以上。MTT实验显示转染Kai1的Hep-2细胞株体外增殖能力明显弱于对照组(P<0.01),抑制率可达29%。流式细胞术显示与对照组比较,转染组G0/G1期细胞数量增加,S期细胞数量减少,差异有显著性(P<0.05)。结论:通过重组腺病毒介导,成功地将Kai1基因转入喉癌Hep-2细胞株,Kai1对喉癌细胞体外增殖能力具有抑制作用,其机制可能是将Hep-2细胞生长周期阻滞于G0/G1期,提示:Kai1抑癌基因可能通过阻滞肿瘤细胞生长周期实现抑制肿瘤细胞增殖。
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关键词
KAI1/CD82
HEP-2
喉癌
腺病毒
转染
增殖
生长周期
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职称材料
题名
Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响
被引量：
2
1
作者
王洪鹏
王驰
谭毅
叶琳
陈鸿雁
机构
重庆医科大学
附属第一医院耳鼻喉科
重庆医科大学
药学院药物化学教研室
重庆医科大学动物实验中心
重庆医科大学
附属第一医院胸心外科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期157-160,共4页
基金
重庆市科委资助课题(渝科发计字[2006]29号
CSTC
2006BB)~~
文摘
目的探讨肿瘤转移抑制基因Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响。方法以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,以转染空病毒载体及未转染Kai1的喉癌细胞株为对照,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定Kai1对细胞增殖能力的影响,用RT-PCR技术对转染后的细胞进行检测。结果rAd-Kai1经扩增、纯化后,滴度可达6×1010PFU/ml,当病毒量为30 MOI时,Hep-2细胞的转染率可达90%以上。MTT实验显示转染空腺病毒组与未转染组比较,Hep-2细胞株体外增殖能力无统计学差异,转染Kai1组Hep-2细胞株体外增殖能力明显弱于未转染组(P<0.05),抑制率可达29%。结论肿瘤转移抑制基因Kai1/CD82对喉癌细胞株体外增殖能力具有抑制作用。
关键词
KAI1/CD82
HEP-2
喉肿瘤
腺病毒载体
转染
细胞增殖
Keywords
Kai1/CD82 Hep-2 laryngeal neoplasms adenovirus vector transfected cell proliferation
分类号
R739.65 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
人乳头瘤病毒关键基因在裸鼠体内表达的初步研究
被引量：
2
2
作者
潘巍巍
徐营
易发平
曹利仙
卜友泉
赖国旗
宋方洲
机构
重庆医科大学
生物化学与分子生物学教研室
嘉兴学院医学院
教育部临床检验诊断学重点
实验
室
重庆医科大学动物实验中心
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期209-214,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30371479)
教育部"春晖计划"资助项目(No.Z2004-1-55103)
+2 种基金
嘉兴市科技局科研重点资助项目(No.2007AZ2013)
嘉兴市科技局科研项目(No.2008AYZ039-3)
浙江省实验动物科研计划项目(2008F80025)
文摘
目的:初步研究HPV16E6/E7基因在裸鼠体内不同组织引起的病变。方法:将重组腺病毒Ad-CMV-E6/E7、Ad-K14-E6/E7病毒上清以及作为对照的重组腺病毒空载体pAd-CMV和pAdtrack的上清液,经过纯化后,通过裸鼠的尾缘静脉注射到裸鼠体内,并每天注射0.05mg雌激素到注射病毒的裸鼠,同时做阴性对照。12周后给裸鼠注射2.5%阿佛丁进行麻醉,并将其耳朵、头颈部皮肤、口腔黏膜、结肠、直肠、子宫颈-阴道移行区等组织取出,浸泡在3.75%多聚甲醛中4℃固定过夜,然后做石蜡包埋切片、HE染色、免疫组化检测P53蛋白和Bcl-2的表达,取裸鼠的各个组织提取DNA、RNA和蛋白质,然后分别检测有无重组腺病毒的感染、病毒表达的情况及E6蛋白的表达。结果:实验组1注射腺病毒Ad-K14-E6/E7的裸鼠组织HE染色结果显示裸鼠子宫颈-阴道移行处的增生较明显。SP法免疫组化发现突变型P53和Bcl-2在该组裸鼠的子宫颈-阴道移行处表达都增加(P<0.05),并且RT-PCR检测子宫颈-阴道移行处组织也有E6/E7的表达,Western blotting检测该组织也有E6蛋白的表达。结论:K14启动子增加了E6/E7在裸鼠子宫颈-阴道移行处的表达,并且使子宫颈-阴道移行处的上皮组织发生病变。
关键词
乳头状瘤病毒
人
腺病毒
基因
E6/E7
小鼠
裸
Keywords
Papillomavirus, human
Adenovirus
Genes, E6/E7
Mice, nude
分类号
R373.39 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖及生长周期的影响
被引量：
1
3
作者
王洪鹏
叶琳
黄闯
王驰
谭毅
陈鸿雁
机构
重庆医科大学
附属第一医院耳鼻喉科
重庆医科大学
附属第一医院胸心外科
重庆医科大学
药学院药物化学教研室
重庆医科大学动物实验中心
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期519-521,共3页
基金
重庆市科委资助课题(编号:渝科发计字[2006]29号)
文摘
目的:探讨肿瘤转移抑制基因Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力及生长周期的影响。方法:本研究以喉癌Hep-2细胞株为研究对象,将携带有Kai1基因的重组腺病毒(rAd-Kai1)进行扩增、纯化并测定其滴度,用适量rAd-Kai1转染人喉癌Hep-2细胞株,利用RT-PCR技术对转染效果进行检测,以未转染Kai1的喉癌细胞株为对照组,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术测定转染组细胞株的增殖抑制率和细胞周期。结果:rAd-Kai1经扩增、纯化后,滴度可达1010PFU/ml,当病毒量为30MOI时,对Hep-2细胞的转染率达93%以上。MTT实验显示转染Kai1的Hep-2细胞株体外增殖能力明显弱于对照组(P<0.01),抑制率可达29%。流式细胞术显示与对照组比较,转染组G0/G1期细胞数量增加,S期细胞数量减少,差异有显著性(P<0.05)。结论:通过重组腺病毒介导,成功地将Kai1基因转入喉癌Hep-2细胞株,Kai1对喉癌细胞体外增殖能力具有抑制作用,其机制可能是将Hep-2细胞生长周期阻滞于G0/G1期,提示:Kai1抑癌基因可能通过阻滞肿瘤细胞生长周期实现抑制肿瘤细胞增殖。
关键词
KAI1/CD82
HEP-2
喉癌
腺病毒
转染
增殖
生长周期
Keywords
Kai1/CD82
Hep-2
Laryngeal carcinoma
Adenovirus
Transfection
Proliferation
Cell cycle
分类号
R739.65 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Kai1/CD82对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力的影响
王洪鹏
王驰
谭毅
叶琳
陈鸿雁
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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下载PDF
职称材料
2
人乳头瘤病毒关键基因在裸鼠体内表达的初步研究
潘巍巍
徐营
易发平
曹利仙
卜友泉
赖国旗
宋方洲
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
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职称材料
3
Kai1对人喉癌Hep-2细胞株增殖及生长周期的影响
王洪鹏
叶琳
黄闯
王驰
谭毅
陈鸿雁
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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