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白藜芦醇对呼吸道合胞病毒感染小鼠肺部病毒滴度及其气道炎症的影响 被引量：12
1
作者 臧娜 谢晓虹 +5 位作者 邓昱 李思敏 倪科 罗艳 王莉佳 刘恩梅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期1924-1927,共4页
目的研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠肺部病毒滴度及其所致气道炎症的影响。方法 6～8周龄雌性BALB/c小鼠,环磷酰胺100 mg/kg腹腔注射后,随机分为对照组、RSV感染组、白藜芦... 目的研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠肺部病毒滴度及其所致气道炎症的影响。方法 6～8周龄雌性BALB/c小鼠,环磷酰胺100 mg/kg腹腔注射后,随机分为对照组、RSV感染组、白藜芦醇腹腔注射组、白藜芦醇雾化组,每组8只。环磷酰胺处理5 d后,给予RSV滴鼻建立RSV感染模型,并在RSV感染1 h后给予白藜芦醇30 mg/(kg.d)腹腔注射和雾化吸入。5 d后检测小鼠清醒状态下气道阻力,处死小鼠研究肺部RSV病毒滴度、肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数、肺部病理组织炎症及评分。结果白藜芦醇不同方式给药,干预组肺部RSV病毒滴度均显著低于RSV感染组(P<0.01),BALF中细胞总数白藜芦醇干预组明显低于RSV感染组(P<0.05),而白藜芦醇干预组与对照组相比差异无显著性;肺组织炎症病理评分:白藜芦醇干预组明显低于RSV感染组(P<0.01),白藜芦醇干预组清醒状态小鼠气道高反应(吸入乙酰甲胆碱浓度12.5～50.0 mg/ml时)较单纯RSV感染组明显减轻(P<0.05)。结论白藜芦醇不同方式给药均能够减轻RSV诱发的肺部炎症及气道高反应,其机制可能是通过抑制RSV感染后肺部病毒滴度,减少RSV在体内的复制。 展开更多
关键词 白藜芦醇 RSV 气道炎症 气道高反应
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Frizzled/LRP受体与ROR2受体在白血病细胞中的表达及其机制研究 被引量：2
2
作者 李瑞燕 胡艳妮 +1 位作者 顾晓艳 徐酉华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期612-616,共5页
目的:探讨WNT信号通路中卷曲蛋白-低密度脂蛋白相关蛋白复合受体(Frizzled/LRP)、酪氨酸激酶样孤独受体-2(ROR2)在淋巴细胞白血病发生发展中的作用。方法:实验分组:1)实验组1:急性淋巴细胞白血病骨髓(ALL);2)对照组1:特发性血小板减少... 目的:探讨WNT信号通路中卷曲蛋白-低密度脂蛋白相关蛋白复合受体(Frizzled/LRP)、酪氨酸激酶样孤独受体-2(ROR2)在淋巴细胞白血病发生发展中的作用。方法:实验分组:1)实验组1:急性淋巴细胞白血病骨髓(ALL);2)对照组1:特发性血小板减少性紫癜骨髓(ITP);3)实验组2:氯化锂作用后的Jurkat、K562和HL-60细胞株;4)对照组2:Jurkat、K562和HL-60细胞株。以RT-PCR方法从mRNA水平检测Frizzled/LRP(FZD/LRP)受体、ROR2受体的表达;以Western blot方法从蛋白水平检测FZD-5和ROR2的表达;通过MTT法检测细胞增殖情况;通过流式细胞仪检测细胞周期。结果:所有白血病细胞中均可见FZD-2、LRP-6和ROR2的表达,ROR2在HL-60细胞中的表达明显低于其他白血病细胞,其他各组受体表达水平未见差异;11例ITP骨髓标本中2例标本可见ROR2表达,FZD受体的表达与白血病细胞无显著性差异。氯化锂处理后,ROR2在Jurkat细胞中的表达明显减少,其他受体的表达未见显著性差异。重复MTT试验结果显示:不同浓度(5、10、20mmol/L)氯化锂(LiCl)对各组细胞均有增殖抑制作用,在一定范围内呈剂量依赖性。氯化锂处理后,Jurkat和HL-60细胞周期与正常组相比G_1期和S期比例减少,G_2期增高,发生G_2/M期阻滞,差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度组K562的细胞周期未见明显差异。结论:ROR2在急性淋巴细胞白血病骨髓中的表达较其在ITP骨髓中的表达高,在Jurkat细胞株中有高表达,氯化锂作用后的Jurkat细胞中ROR2的表达明显减低,细胞增殖受抑制,提示ROR2可能与淋巴细胞白血病的发生有关。 展开更多
关键词 WNT信号通路 ROR2受体 Frizzled/LRP受体 氯化锂 白血病
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姜黄素对高氧致新生鼠支气管肺发育不良的保护作用
3
作者 张钰 韦红 +1 位作者 王小玲 张晓萍 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第2期120-123,190,共5页
目的研究姜黄素对高氧暴露致新生鼠支气管肺发育不良的影响,探讨其作用机制。方法给予出生6 h内的SD大鼠持续60%氧暴露14d建立肺损伤模型,通氧的同时予姜黄素100 mg/(kg.d)灌胃。观察肺组织病理学改变,进行辐射状肺泡计数(RAC),末端脱... 目的研究姜黄素对高氧暴露致新生鼠支气管肺发育不良的影响,探讨其作用机制。方法给予出生6 h内的SD大鼠持续60%氧暴露14d建立肺损伤模型,通氧的同时予姜黄素100 mg/(kg.d)灌胃。观察肺组织病理学改变,进行辐射状肺泡计数(RAC),末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡,免疫组化和Western blot法检测肺组织活化半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达。结果与空气对照组相比,随着氧暴露时间的延长,高氧组的大鼠出现肺发育停滞的典型病理表现:肺泡增大、结构简化,肺泡隔增厚。RAC明显减少,肺组织细胞凋亡明显增加,免疫组化和Western blot法均显示肺组织活化Caspase-3表达明显升高。姜黄素能改善损伤的肺病理结构,并在干预14d后使RAC显著增多,肺组织凋亡细胞显著减少,干预4d后肺组织活化Caspase-3显著降低。结论姜黄素可减轻高氧暴露所致的BPD,可能是通过抗凋亡机制实现其保护作用。 展开更多
关键词 高氧症 支气管肺发育不良 姜黄素 半胱氨酸蛋白酶类 新生大鼠
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弹性纤维系统在小鼠支气管肺发育不良中的动态表达规律 被引量：3
4
作者 刘秋彤 韩文莉 +3 位作者 郭春宝 余本莉 刘朝云 邓春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期2353-2357,共5页
目的观察支气管肺发育不良模型小鼠肺发育过程中弹性蛋白及其相关蛋白的表达情况,探讨弹性蛋白平衡紊乱在支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）中的作用。方法新生1 d内的C57BL/6小鼠按随机数字表法分为两组：BPD组及对... 目的观察支气管肺发育不良模型小鼠肺发育过程中弹性蛋白及其相关蛋白的表达情况,探讨弹性蛋白平衡紊乱在支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）中的作用。方法新生1 d内的C57BL/6小鼠按随机数字表法分为两组：BPD组及对照组,BPD组应用高浓度氧暴露建立BPD模型,运用HE染色和免疫组化法观察各组小鼠肺组织形态学改变,弹性纤维染色观察各组小鼠弹性纤维含量,荧光定量PCR技术观察弹性蛋白及其相关蛋白mRNA在各组小鼠中随时间变化的表达情况。结果与对照组相比,BPD组小鼠第3天开始肺部次级脊形成受阻,直至21 d可见肺泡融合导致正常肺泡结构消失,次级脊消失,弹性纤维和弹性蛋白明显增加且紊乱无序的沉积在肺泡间隔上;BPD组弹性蛋白及其相关蛋白基因的表达显示：Tropoelastin及其相关合成蛋白Fibrillin-1、Fibrillin-2、Fibulin-4、Fibulin-5 mRNA的表达在给氧21 d时有不同程度的增加（P〈0.05）,弹性蛋白交联酶Lox mRNA在给氧3-21 d较对照组明显增加（P〈0.01）,弹性蛋白降解酶Neutrophil elastase mRNA在给氧1-14 d表达较对照组增加（P〈0.05）,21 d时减少至与对照组无明显差异（P〉0.05）。结论弹性蛋白平衡是肺泡发育的重要机制,弹性蛋白平衡紊乱在BPD小鼠病理过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 弹性蛋白 支气管肺发育不良 肺发育
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携带siANGPTL4重组腺病毒的构建及其对MG63增殖的抑制作用 被引量：3
5
作者 洪思琦 毕杨 +2 位作者 郭振华 陈镜宇 李映良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期28-32,共5页
目的应用AdEasy腺病毒改良载体系统构建携带siANGPTL4基因的重组腺病毒,进一步研究ANGPTL4基因对骨肉瘤细胞株MG63增殖的影响。方法将设计的siRNA靶点寡聚核苷酸克隆到pSES-HUS载体构建重组质粒pSES-siANGPTL4,在B J5183大肠杆菌内与pAd... 目的应用AdEasy腺病毒改良载体系统构建携带siANGPTL4基因的重组腺病毒,进一步研究ANGPTL4基因对骨肉瘤细胞株MG63增殖的影响。方法将设计的siRNA靶点寡聚核苷酸克隆到pSES-HUS载体构建重组质粒pSES-siANGPTL4,在B J5183大肠杆菌内与pAdEasy1骨架质粒完成同源重组;经脂质体介导转入HEK293细胞包装、扩增并经反复感染获得携带siANGPTL4基因的重组腺病毒Ad-siANGPTL4;有限稀释法检测病毒滴度;根据加入的重组腺病毒携带的基因不同将实验细胞分为阴性对照组、RFP组(加入Ad-RFP)、ANGPTL4组(加入Ad-ANGPTL4)及siANGPTL4组(加入Ad-siANGPTL4),利用腺病毒感染人骨肉瘤细胞株MG63,RT-PCR法检测细胞内ANGPTL4基因相对表达强度。结晶紫染色及细胞计数观察ANGPTL4基因对MG63细胞增殖的影响。结果成功构建携带siANGPTL4基因的重组腺病毒Ad-siANGPTL4,病毒滴度达1.2×1011～2.6×1011efu/m l;阴性对照组、RFP组、ANGPTL4组及siANGPTL4组细胞ANGPTL4基因表达的相对强度分别为(104.87±5.21)、(110.95±4.15)、(145.24±7.26)、(72.81±3.61);siANGPTL4组相对表达强度显著降低(P<0.05)。结晶紫染色及细胞计数显示,ANGPTL4基因过度表达可促进MG63细胞增殖;该基因抑制后MG63细胞增殖明显减缓(P<0.05)。结论成功构建了Ad-siANGPTL4重组腺病毒并感染MG63使其内源性表达的ANGPTL4基因沉默;该基因的表达沉默抑制MG63细胞体外增殖。 展开更多
关键词 腺病毒 血管生成素样蛋白4 转染 骨肉瘤 红色荧光蛋白
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2,3,7,8-四氯二苯二噁英诱导腭裂发生的差异蛋白筛选 被引量：2
6
作者 刘丽玲 傅跃先 +1 位作者 蒲亚兰 甘立强 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1087-1090,共4页
目的:以蛋白质组学方法筛选2,3,7,8-四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致先天性腭裂发生的差异表达蛋白。方法:以TCDD诱导建立胎鼠先天性腭裂模型,行腭部的大体解剖及组织学检查。取实验组和对照组胎鼠的腭组织... 目的:以蛋白质组学方法筛选2,3,7,8-四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致先天性腭裂发生的差异表达蛋白。方法:以TCDD诱导建立胎鼠先天性腭裂模型,行腭部的大体解剖及组织学检查。取实验组和对照组胎鼠的腭组织,分别提取组织总蛋白。通过双向电泳和质谱分析,筛选出实验组和对照组腭组织的差异表达蛋白,并用免疫组化对鉴定出的相关蛋白质进行验证。结果:成功诱导胎鼠腭裂模型。筛选出10种差异表达的蛋白,其中7个蛋白点在试验组上调,3个蛋白点在实验组下调。过氧化物还原酶1(Peroxiredoxin 1,Prx 1)与鸟嘌呤核苷酸解离抑制剂(GDP-dissociation inhibitor,GDI)在实验组表达明显增强。结论:Prx 1、GDI表达的明显增强可能与TCDD所致胎鼠先天性腭裂有关。 展开更多
关键词 23 7 8-四氯二苯二噁英 腭裂 蛋白质组学
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Wnt5a 修饰的bMSCs 对白血病小鼠造血及白血病细胞生长的影响 被引量：1
7
作者 沈亚莉 徐酉华 顾晓艳 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期811-816,共6页
目的: 探讨Wnt5a基因修饰的骨髓间充质干细胞(bMSCs)对急性髓系白血病小鼠体内造血和白血病细胞生长的影响。方法:外周血瑞氏染色、骨髓流式细胞仪鉴定移植性HL60人白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠模型。造模成功的SCID小鼠,随机分为... 目的: 探讨Wnt5a基因修饰的骨髓间充质干细胞(bMSCs)对急性髓系白血病小鼠体内造血和白血病细胞生长的影响。方法:外周血瑞氏染色、骨髓流式细胞仪鉴定移植性HL60人白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠模型。造模成功的SCID小鼠,随机分为实验组(A组:Ad5-Wnt5a-bMSCs+模型小鼠);对照组(B组:Ad5-GFP-bMSC+模型小鼠;C组:bMSC+模型小鼠;D组:模型小鼠)。RT-PCR检测外源性Wnt5a基因经骨髓腔移植入白血病小鼠模型后的定植情况。骨髓MSC及CFU-Mix培养、流式细胞仪、组织细胞化学及组织病理检测白血病小鼠移植前后各组外周血、骨髓、肝、脾、肾中的白血病细胞以及骨髓造血的变化。结果:成功建立急性髓性白血病模型;外源性Wnt5a基因转染人bMSCs,转染率达37.38%。外源性Wnt5a基因成功定植于受体骨髓中。Wnt5a基因修饰bMSCs移植后,与对照组比较,实验组SCID小鼠生存率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);外周血有核细胞及瘤细胞计数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);CFU-Mix和MSC集落生长恢复较快,集落数明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);小鼠骨髓、肺、肝、脾、肾CD33阳性率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Wnt5a基因修饰的bMSCs在体内能有效地抑制白血病细胞生长,支持骨髓造血。 展开更多
关键词 Wnt5a基因修饰的bMSCs 骨髓移植 白血病动物模型 HL60
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