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含hIGF-1基因腺病毒的构建及在兔骨髓间充质干细胞的表达
被引量：
3
1
作者
丁幸坡
金先庆
+2 位作者
罗小辑
邱林
刘伟
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第14期1495-1498,共4页
目的用Adeasy系统构建荧光蛋白基因标记的腺病毒载体Ad-hIGF-1,然后转染兔骨髓间充质干细胞并检测其表达。方法根据GenBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物,从质粒pcDNA3.1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1,亚克隆至pMD-T载体,鉴定后酶切出目...
目的用Adeasy系统构建荧光蛋白基因标记的腺病毒载体Ad-hIGF-1,然后转染兔骨髓间充质干细胞并检测其表达。方法根据GenBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物,从质粒pcDNA3.1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1,亚克隆至pMD-T载体,鉴定后酶切出目的基因插入pAdtrack-CMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdtrack-hIGF-1,经Pm eⅠ线性化后采用电穿孔法转化至已包含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的B J5183大肠杆菌中,挑选同源重组质粒线性化后转染HEK293细胞收获腺病毒,然后转染靶细胞兔骨髓间充质干细胞,通过绿色荧光蛋白表达情况以及流式细胞仪、免疫细胞化学等方法检测hIGF-1的表达。结果成功构建了绿色荧光蛋白基因标记的腺病毒Ad-hIGF-1,并在兔骨髓间充质干细胞得以高效表达。结论Adeasy腺病毒系统是基因转染的高效载体系统。腺病毒Ad-hIGF-1转染的骨髓间充质干细胞可作为基因修饰的软骨组织工程种子细胞。
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关键词
人胰岛素样生长因子-1
腺病毒载体
骨髓间充质干细胞
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职称材料
碱性成纤维细胞生长因子和谷氨酰胺对小肠上皮细胞生长的促进作用
被引量：
1
2
作者
伍烽
金先庆
+4 位作者
吴仕孝
李镜
王珊
许嘉陵
李欣
《肠外与肠内营养》
CAS
1997年第1期1-4,共4页
探讨了碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、谷氨酰胺 ,以及二者联合使用对原代培养的小肠上皮细胞生长和分化的影响。实验分bFGF、谷氨酰胺、bFGF +谷氨酰胺三组 ,于小肠上皮细胞原代培养中加入不同剂量的药物 ,测定细胞的生长和ALP、CK活...
探讨了碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、谷氨酰胺 ,以及二者联合使用对原代培养的小肠上皮细胞生长和分化的影响。实验分bFGF、谷氨酰胺、bFGF +谷氨酰胺三组 ,于小肠上皮细胞原代培养中加入不同剂量的药物 ,测定细胞的生长和ALP、CK活性。结果显示 :单一bFGF或谷氨酰胺能促进肠上皮细胞生长和减少细胞死亡 ,bFGF使细胞分化降低 ,谷氨酰胺促进细胞分化。二者联合用药的效果明显优于单独用药。
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关键词
碱性成纤维细胞
生长因子
谷氨酰胺
肠上皮细胞
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职称材料
题名
含hIGF-1基因腺病毒的构建及在兔骨髓间充质干细胞的表达
被引量：
3
1
作者
丁幸坡
金先庆
罗小辑
邱林
刘伟
机构
重庆医科大学儿童医院外科研究室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第14期1495-1498,共4页
文摘
目的用Adeasy系统构建荧光蛋白基因标记的腺病毒载体Ad-hIGF-1,然后转染兔骨髓间充质干细胞并检测其表达。方法根据GenBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物,从质粒pcDNA3.1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1,亚克隆至pMD-T载体,鉴定后酶切出目的基因插入pAdtrack-CMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdtrack-hIGF-1,经Pm eⅠ线性化后采用电穿孔法转化至已包含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的B J5183大肠杆菌中,挑选同源重组质粒线性化后转染HEK293细胞收获腺病毒,然后转染靶细胞兔骨髓间充质干细胞,通过绿色荧光蛋白表达情况以及流式细胞仪、免疫细胞化学等方法检测hIGF-1的表达。结果成功构建了绿色荧光蛋白基因标记的腺病毒Ad-hIGF-1,并在兔骨髓间充质干细胞得以高效表达。结论Adeasy腺病毒系统是基因转染的高效载体系统。腺病毒Ad-hIGF-1转染的骨髓间充质干细胞可作为基因修饰的软骨组织工程种子细胞。
关键词
人胰岛素样生长因子-1
腺病毒载体
骨髓间充质干细胞
Keywords
human insulin-like growth factor
adenovirus vector
mesenchymal stem cells
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
R329.23 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
碱性成纤维细胞生长因子和谷氨酰胺对小肠上皮细胞生长的促进作用
被引量：
1
2
作者
伍烽
金先庆
吴仕孝
李镜
王珊
许嘉陵
李欣
机构
重庆医科大学
儿童
医院
外科
重庆医科大学
儿童
医院
内科
重庆医科大学儿童医院外科研究室
重庆医科大学
儿童
医院
中心仪器室
出处
《肠外与肠内营养》
CAS
1997年第1期1-4,共4页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目 !(3930 0 12 5 )
文摘
探讨了碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、谷氨酰胺 ,以及二者联合使用对原代培养的小肠上皮细胞生长和分化的影响。实验分bFGF、谷氨酰胺、bFGF +谷氨酰胺三组 ,于小肠上皮细胞原代培养中加入不同剂量的药物 ,测定细胞的生长和ALP、CK活性。结果显示 :单一bFGF或谷氨酰胺能促进肠上皮细胞生长和减少细胞死亡 ,bFGF使细胞分化降低 ,谷氨酰胺促进细胞分化。二者联合用药的效果明显优于单独用药。
关键词
碱性成纤维细胞
生长因子
谷氨酰胺
肠上皮细胞
Keywords
bFGF glutamine small intestinal epithelium
分类号
R459.3 [医药卫生—治疗学]
R333.3 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
含hIGF-1基因腺病毒的构建及在兔骨髓间充质干细胞的表达
丁幸坡
金先庆
罗小辑
邱林
刘伟
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
3
在线阅读
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职称材料
2
碱性成纤维细胞生长因子和谷氨酰胺对小肠上皮细胞生长的促进作用
伍烽
金先庆
吴仕孝
李镜
王珊
许嘉陵
李欣
《肠外与肠内营养》
CAS
1997
1
在线阅读
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职称材料
已选择
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参考文献
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