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靶向大鼠gnas基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
1
作者
田运娇
易岂建
+1 位作者
米青
李娅莎
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期10-13,共4页
目的:构建并鉴定靶向大鼠gnas基因的小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体。方法:根据大鼠gnas基因mRNA序列设计并合成3条shRNA特异性寡核苷酸片段,退火形成双链后克隆进入线性化pGenesil-1.1载体,并进行酶切鉴定和测序,同...
目的:构建并鉴定靶向大鼠gnas基因的小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体。方法:根据大鼠gnas基因mRNA序列设计并合成3条shRNA特异性寡核苷酸片段,退火形成双链后克隆进入线性化pGenesil-1.1载体,并进行酶切鉴定和测序,同时构建针对大鼠GAPDH基因的阳性对照质粒和不具有基因同源性的非特异性基因的质粒做阴性对照。结果:经酶切和测序鉴定分析,构建的shRNA已成功插入载体,并且与设计序列完全相符。结论:成功构建了靶向大鼠gnas基因的shRNA真核表达载体,为后续研究Gsα蛋白在心力衰竭中作用的体内外实验奠定了基础。
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关键词
gnas基因
RNA干扰
质粒
心力衰竭
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职称材料
题名
靶向大鼠gnas基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
1
作者
田运娇
易岂建
米青
李娅莎
机构
重庆医科大学
附属儿童医院心脏
中心
重庆医科大学儿科研究所中心实验室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期10-13,共4页
基金
重庆市自然科学基金资助项目(编号:CSTC.2007BB5301)
文摘
目的:构建并鉴定靶向大鼠gnas基因的小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体。方法:根据大鼠gnas基因mRNA序列设计并合成3条shRNA特异性寡核苷酸片段,退火形成双链后克隆进入线性化pGenesil-1.1载体,并进行酶切鉴定和测序,同时构建针对大鼠GAPDH基因的阳性对照质粒和不具有基因同源性的非特异性基因的质粒做阴性对照。结果:经酶切和测序鉴定分析,构建的shRNA已成功插入载体,并且与设计序列完全相符。结论:成功构建了靶向大鼠gnas基因的shRNA真核表达载体,为后续研究Gsα蛋白在心力衰竭中作用的体内外实验奠定了基础。
关键词
gnas基因
RNA干扰
质粒
心力衰竭
Keywords
Gnas
RNA interference
Plasmid
Heart failure
分类号
R318.11 [医药卫生—生物医学工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向大鼠gnas基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
田运娇
易岂建
米青
李娅莎
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
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