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未知基因CGI-100的克隆及其真核表达载体的构建
被引量：
1
1
作者
黄凤霞
张彦
王伟佳
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2007年第8期785-788,共4页
目的:为探讨研究未知基因CGI-100的功能,克隆人CGI-100基因并构建其真核表达载体。方法:通过RT-PCR从人白血病K562细胞中克隆CGI-100基因全长编码区,将该cDNA片段亚克隆至载体pMD18-T SimpleT中,经测序鉴定后,用BamHⅠ和PstⅠ双酶切将目...
目的:为探讨研究未知基因CGI-100的功能,克隆人CGI-100基因并构建其真核表达载体。方法:通过RT-PCR从人白血病K562细胞中克隆CGI-100基因全长编码区,将该cDNA片段亚克隆至载体pMD18-T SimpleT中,经测序鉴定后,用BamHⅠ和PstⅠ双酶切将目的cDNA片段定向克隆至相同处理的pIRES2-EGFP真核表达质粒中,然后经酶切、PCR鉴定和DNA序列测定三重鉴定方法对重组质粒进行鉴定。结果:经酶切、PCR及测序鉴定证实,CGI-100基因全长编码区cDNA被准确正向插入至pIRES2-EGFP质粒的酶切位点BamHⅠ和PstⅠ之间,未发现碱基突变或移位。结论:成功地构建并鉴定了含CGI-100基因全长编码区的真核表达质粒,为以后研究该基因的功能奠定了基础。
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关键词
CGI-100基因
真核表达载体
克隆
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题名
未知基因CGI-100的克隆及其真核表达载体的构建
被引量：
1
1
作者
黄凤霞
张彦
王伟佳
机构
重庆医科大学临床生化教研室临床检验诊断学重庆市重点实验室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2007年第8期785-788,共4页
基金
国家自然科学基金(No.30171150)
文摘
目的:为探讨研究未知基因CGI-100的功能,克隆人CGI-100基因并构建其真核表达载体。方法:通过RT-PCR从人白血病K562细胞中克隆CGI-100基因全长编码区,将该cDNA片段亚克隆至载体pMD18-T SimpleT中,经测序鉴定后,用BamHⅠ和PstⅠ双酶切将目的cDNA片段定向克隆至相同处理的pIRES2-EGFP真核表达质粒中,然后经酶切、PCR鉴定和DNA序列测定三重鉴定方法对重组质粒进行鉴定。结果:经酶切、PCR及测序鉴定证实,CGI-100基因全长编码区cDNA被准确正向插入至pIRES2-EGFP质粒的酶切位点BamHⅠ和PstⅠ之间,未发现碱基突变或移位。结论:成功地构建并鉴定了含CGI-100基因全长编码区的真核表达质粒,为以后研究该基因的功能奠定了基础。
关键词
CGI-100基因
真核表达载体
克隆
Keywords
CGI-100 gene
Eukaryotic expressive vector
Clone
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
未知基因CGI-100的克隆及其真核表达载体的构建
黄凤霞
张彦
王伟佳
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2007
1
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