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7例播散型组织胞浆菌病临床分析 被引量:4
1
作者 陈建斌 韩凤 +1 位作者 潘健 黄宗干 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第2期318-319,共2页
目的:探讨骨髓涂片检查在诊断播散型组织胞浆菌病(PDH)中的应用价值。方法:分析7例PDH患者的临床表现,实验室检查和治疗情况。结果:PDH临床表现多种多样,仔细检查骨髓涂片,7例患者均得以确诊。二性霉素B、氟康唑和伊曲康唑治疗均有效。... 目的:探讨骨髓涂片检查在诊断播散型组织胞浆菌病(PDH)中的应用价值。方法:分析7例PDH患者的临床表现,实验室检查和治疗情况。结果:PDH临床表现多种多样,仔细检查骨髓涂片,7例患者均得以确诊。二性霉素B、氟康唑和伊曲康唑治疗均有效。结论:骨髓涂片检查简便易行。 展开更多
关键词 组织胞浆菌病 播散型 骨髓涂片
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惠尔血治疗急性粒细胞缺乏症临床分析 被引量:1
2
作者 王利 唐宗山 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2001年第2期210-210,共1页
关键词 急性粒细胞缺乏症 重组人粒细胞采药刺激因子 RHG-CSF 惠尔血
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两次输注自体干细胞移植治疗血液肿瘤4例报告
3
作者 娄世锋 陈林 +3 位作者 陈姝 周慷 罗云 邓建川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第2期302-304,共3页
目的:观察两次干细胞输注在自体外周血干细胞移植(APBSCT)中对中性粒细胞及血小板减少的影响,观察其对患者并发感染和出血的影响。方法:对4例血液肿瘤患者经化疗+G -CSF动员并采集外周血干细胞,预处理后分别于0、+ 3天回输外周血干细胞... 目的:观察两次干细胞输注在自体外周血干细胞移植(APBSCT)中对中性粒细胞及血小板减少的影响,观察其对患者并发感染和出血的影响。方法:对4例血液肿瘤患者经化疗+G -CSF动员并采集外周血干细胞,预处理后分别于0、+ 3天回输外周血干细胞采集物,观察外周血ANC、BPC及移植相关并发症和血液制品支持治疗情况。结果:用Cy +AraC +G -CSF动员可获足够CD34+细胞,患者ANC低于0 .5×10 9/L为5~12天,BPC持续低于2 0×10 9/L仅为3~4天,仅1例因输血小板发热,仅1例因口腔出血点输血小板1单位,移植费用降低。结论:两次干细胞输注在自体干细胞移植中可缩短粒细胞及血小板减少时间,并减少感染和出血。 展开更多
关键词 自体外周血干细胞移植 淋巴瘤 多发性骨髓瘤
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人参总皂甙逆转K562/A02细胞对DOX耐药性的研究 被引量:12
4
作者 王利 唐宗山 +1 位作者 黄宗干 王亚平 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第4期424-427,435,共5页
目的 :研究人参总皂甙 (Totalsaponinspanaxginseng ,TSPG)对人红白血病耐药细胞系K5 6 2 /A0 2耐药性影响及作用机制。方法 :MTT法测定TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞对阿霉素 (DOX)的药物敏感变化。免疫组化法检测TSPG作用后K5 6 2 /A0 ... 目的 :研究人参总皂甙 (Totalsaponinspanaxginseng ,TSPG)对人红白血病耐药细胞系K5 6 2 /A0 2耐药性影响及作用机制。方法 :MTT法测定TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞对阿霉素 (DOX)的药物敏感变化。免疫组化法检测TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞mdr - 1基因产物P -gp及凋亡调控基因产物bcl- 2的表达。RT -PCR法检测TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞mdr - 1mRNA表达。结果 :TSPG能增强DOX对K5 6 2 /A0 2细胞的毒性作用 ,逆转效率与浓度相关。TSPG作用后P - gp表达下降有显著差异 (P <0 .0 1) ,bcl- 2表达变化无显著差异 (P >0 .0 5 )。TSPG作用后K5 6 2 /A0 2细胞mdr - 1mRNA表达降低有显著差异 (P <0 .0 1)。结论 :TSPG能部分逆转K5 6 2 /A0 2细胞的耐药性 ,机制主要是下调mdr - 1mRNA表达 ,导致产物P - gp减少 ;与bcl- 2蛋白表达变化无显著相关。 展开更多
关键词 人参总皂甙 细胞系 K562 抗药性 mdr—1 bcl—2
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2型糖尿病家系中血清结合珠蛋白水平和胰岛素抵抗 被引量:7
5
作者 汪志红 张素华 +3 位作者 邱鸿鑫 韩风 朱达英 任伟 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第3期262-264,共3页
目的 探讨血清结合珠蛋白(HP)水平与2型糖尿病家系胰岛素抵抗(IR)的关系。方法 采用比色法检测健康人30例,家族性2型糖尿病患者50例及其家系中非DM一级亲属44例的HP,同时测定空腹胰岛素(FINS)、血脂及血浆... 目的 探讨血清结合珠蛋白(HP)水平与2型糖尿病家系胰岛素抵抗(IR)的关系。方法 采用比色法检测健康人30例,家族性2型糖尿病患者50例及其家系中非DM一级亲属44例的HP,同时测定空腹胰岛素(FINS)、血脂及血浆脂蛋白。结果 家族性2型糖尿病患者及一级亲属的HP、FINS显著高于正常对照,并有脂代谢的紊乱;所有受试者的HP水平与胰岛素敏感指数呈负相关。结论 本研究提示HP是IR的指标之一;HP水平升高可能是家族性2型糖尿病的一个遗传标志。 展开更多
关键词 结合珠蛋白 胰岛素抵抗 Ⅱ型糖尿病 病理学
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血管内皮生长因子及其Flt-1受体在白血病细胞中的表达 被引量:8
6
作者 张伶 陈辉 +3 位作者 李维 涂植光 冯文莉 黄宗干 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期678-681,共4页
目的 探讨人白血病细胞系血管内皮生长因子 (VEGF)及其Flt 1受体的表达 ,进一步阐明VEGF在白血病细胞异常增殖中的作用机制。方法 以人脐静脉血管内皮细胞系ECV3 0 4作为对照 ,采用RT PCR半定量技术和免疫组化检测体外培养的人白血病... 目的 探讨人白血病细胞系血管内皮生长因子 (VEGF)及其Flt 1受体的表达 ,进一步阐明VEGF在白血病细胞异常增殖中的作用机制。方法 以人脐静脉血管内皮细胞系ECV3 0 4作为对照 ,采用RT PCR半定量技术和免疫组化检测体外培养的人白血病细胞系K5 62和HL 60中VEGF及Flt 1的表达。采用MTT试验观察VEGF反义寡核苷酸 (VEGF AS)对白血病细胞体外增殖的影响。结果 K5 62和HL 60细胞同时表达VEGF和Flt 1mRNA和蛋白。VEGF AS能够抑制白血病细胞体外增殖。结论 在白血病细胞异常增殖中自分泌VEGF可能起着重要作用。 展开更多
关键词 VEGF Flt-1受体 K562细胞 HL-60细胞
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VEGF对白血病树突状细胞抗原提呈能力的影响 被引量:5
7
作者 张伶 李维 +1 位作者 涂植光 黄宗干 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第16期1587-1590,共4页
目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)对白血病源树突状细胞(dendrit-ic cell,DC)抗原提呈能力的影响及其分子机制。方法K562细胞经5μmol/LVEGF反义寡核苷酸(AS-ODN)处理24h,ELISA和免疫组化检测V... 目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)对白血病源树突状细胞(dendrit-ic cell,DC)抗原提呈能力的影响及其分子机制。方法K562细胞经5μmol/LVEGF反义寡核苷酸(AS-ODN)处理24h,ELISA和免疫组化检测VEGF蛋白水平。以正常K562细胞诱生的白血病DC作为对照组,利用流式细胞术和混合淋巴细胞反应,观察AS-ODN处理的白血病DC的免疫表型及其刺激T细胞增殖的能力。采用荧光素酶检测系统和RT-PCR分析培养12h时白血病DC内NF-κB转录活性和Flt-1mRNA水平。结果AS-ODN处理使K562细胞VEGF蛋白分泌量较K562细胞组显著下降(P<0.05)。与K562-DC比较,AS-ODN处理的免疫表型(CD40、CD86、CD83、HLA-DR)表达明显上调。在不同DC/T值(1:10~1:40)时,MLR实验中AS-K562-DC组刺激指数(SI)明显高于对照组(P<0.05)。此外,培养12h时AS-K562-DCNF-κB转录活性较K562-DC明显增高(P<0.05),而Flt-1mRNA水平未见明显改变。结论反义寡核苷酸可抑制白血病细胞VEGF表达,下调VEGF能够增强白血病DC免疫表型的表达,提高DC抗原提呈能力。 展开更多
关键词 白血病 血管内皮生长因子 反义寡核苷酸 树突状细胞 核因子ΚB
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改良DDRT-PCR研究苦参碱诱导K562细胞分化相关的差异表达基因 被引量:2
8
作者 刘北忠 蒋纪恺 +2 位作者 何於娟 张彦 刘小珊 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期388-390,共3页
The differentiation of human leukemia K562 cells can be induced by matrine. To investigate the mechanism of the induced cell differentiation, an improved DDRT PCR technique was applied to screen the differentially exp... The differentiation of human leukemia K562 cells can be induced by matrine. To investigate the mechanism of the induced cell differentiation, an improved DDRT PCR technique was applied to screen the differentially expressed genes between K562 cells and the matrine treated cells. The sequences of the fragments of the differentially expressed genes were obtained by sequencing following the T A cloned fragments identified by restriction endonuclease, and analyzed with bioinformatics. The results indicated that the multiple gene expression known already changed in the process of induced cell differentiation and an unknown gene fragment was cloned. It suggested that the differentially expressed genes acted as cell differentiation related genes involved in the early phase of the induced cell differentiation. 展开更多
关键词 DDRT-PCR 苦参碱 细胞分化 差异表达基因 中药 白血病
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以鼻咽部侵润为首发表现急性粒细胞白血病1例 被引量:1
9
作者 陈建斌 胡妮妮 黄宗干 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期484-484,共1页
关键词 急性粒细胞白血病 鼻咽部 首发表现 小细胞恶性肿瘤 纤维鼻咽喉镜 组织病理诊断 外周血白细胞 占位性病变 鼻腔新生物 粒细胞肉瘤 白血病浸润 颈部包块 医院诊断 疗效欠佳 血红蛋白 幼稚细胞 骨髓涂片 鼻塞 鼻窦炎 血小板
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靶向阻断STAT5对白血病K562细胞周期的影响 被引量:1
10
作者 史梅 冯文莉 +3 位作者 王小中 曾建明 陈敏 黄宗干 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第21期2118-2120,共3页
目的通过应用诱骗寡核苷酸(Decoy ODNs)抑制信号转导因子和转录激活因子5(signal transducers and ac-tivators of transcription5,STAT5)信号转导途径,观察对白血病K562细胞细胞周期的影响,初步探讨其中的分子机制。方法体外设计合成ST... 目的通过应用诱骗寡核苷酸(Decoy ODNs)抑制信号转导因子和转录激活因子5(signal transducers and ac-tivators of transcription5,STAT5)信号转导途径,观察对白血病K562细胞细胞周期的影响,初步探讨其中的分子机制。方法体外设计合成STAT5Decoy ODNs,在脂质体的介导下转染K562细胞,FCM检测细胞周期,用RT-PCR和Western blot方法检测STAT5下游基因细胞周期素D1(cyclin D1)和c-myc的表达。结果Decoy ODNs作用K562细胞24h后的细胞周期显示,S期细胞由(48.71±5.42)%减低为(31.94±2.35)%,G0/G1期细胞由(40.83±5.20)%增加为(61.39±2.18)%;而错配寡核苷酸(mutant ODNs)对细胞周期没有明显影响。RT-PCR实验和Western blot实验证实Decoy ODNs作用引起STAT5下游基因cyclin D1和c-myc mRNA和蛋白表达下调。结论STAT5Decoy ODNs能抑制细胞G1/S转换而影响细胞周期进程,其作用机制可能与Decoy ODNs下调STAT5下游cyclin D1和c-myc基因的表达有关。 展开更多
关键词 细胞周期 STAT5 转录因子诱骗策略 K562细胞
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异基因外周血干细胞移植治疗以急性淋巴细胞白血病起始的慢粒急淋变1例 被引量:1
11
作者 娄世锋 陈林 +3 位作者 陈姝 周慷 罗云 邓建川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期472-474,共3页
目的:观察无血缘关系异基因外周血干细胞移植对以急性淋巴细胞白血病(ALL)起始的儿童慢性粒细胞白血病急淋变的治疗效果。方法:对以ALL起始的慢性粒细胞白血病急淋变患儿行无血缘关系异基因外周血干细胞移植术。结果:+17天开始恢复造血(... 目的:观察无血缘关系异基因外周血干细胞移植对以急性淋巴细胞白血病(ALL)起始的儿童慢性粒细胞白血病急淋变的治疗效果。方法:对以ALL起始的慢性粒细胞白血病急淋变患儿行无血缘关系异基因外周血干细胞移植术。结果:+17天开始恢复造血(WBC0.6×109/L>0.5×109/L),+22天血小板>20×109/L,+30天骨髓示正常增生性骨髓象,PH(-),无病生存>110天。结论:无血缘关系异基因外周血干细胞移植术对以急性淋巴细胞白血病(ALL)起始的儿童慢性粒细胞白血病急淋变有较好疗效。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 慢性粒细胞白血病 急淋变 外周血干细胞移植 异基因
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奥沙利铂对K562细胞体外生长的影响 被引量:3
12
作者 陈姝 汤为学 娄世锋 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第4期452-454,458,共4页
目的 :观察奥沙利铂对人白血病K5 6 2细胞的作用。方法 :检测奥沙利铂对K5 6 2细胞作用的时间效应和剂量效应 ,在电镜下观察奥沙利铂作用后细胞形态变化 ;用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果 :随着作用时间及药物浓度的增加 ,奥沙利... 目的 :观察奥沙利铂对人白血病K5 6 2细胞的作用。方法 :检测奥沙利铂对K5 6 2细胞作用的时间效应和剂量效应 ,在电镜下观察奥沙利铂作用后细胞形态变化 ;用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果 :随着作用时间及药物浓度的增加 ,奥沙利铂对K5 6 2细胞的增殖抑制作用就越明显。 0 .0 16mmol/L奥沙利铂作用 72h ,K5 6 2细胞生长抑制率达 85 % ,形态学及流式细胞仪分析显示G2 /M期阻滞和细胞凋亡。结论 展开更多
关键词 奥沙利铂 白血病 细胞凋亡
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重组逆转录病毒双表达载体的构建及其对K562细胞增殖活性的影响 被引量:1
13
作者 曾建明 冯文莉 +6 位作者 王小中 赵世巧 白卫君 罗云萍 温健萍 涂植光 黄宗干 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期2130-2134,共5页
目的构建针对慢性粒细胞白血病bcr-abl b3a2型mRNA的双表达逆转录病毒载体,初步探讨其对K562细胞表型的影响。方法以逆转录病毒载体pMSCV-neo为骨架,构建eGFP及针对bcr-abl b3a2型mRNA的反义RNA双表达载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40AS,同... 目的构建针对慢性粒细胞白血病bcr-abl b3a2型mRNA的双表达逆转录病毒载体,初步探讨其对K562细胞表型的影响。方法以逆转录病毒载体pMSCV-neo为骨架,构建eGFP及针对bcr-abl b3a2型mRNA的反义RNA双表达载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40AS,同时构建对照载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40S和pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL80AS,酶切及测序鉴定各重组载体;以脂质体法转染各载体到PT67包装细胞后,G418筛选稳定的病毒产生细胞株,再以NIH3T3细胞测定病毒滴度并感染K562细胞,计数细胞数绘制细胞生长曲线,FCM检测细胞凋亡情况、并用Westernblot检测PKR激活情况。结果酶切及测序结果证实各重组载体构建完全正确;G418筛选到高滴度重组逆转录病毒生产细胞株:PT67-MSCV/GFP、PT67-40as、PT67-40s和PT67-80as,且PT67-40as上清感染组K562细胞生长受抑制,其24h时早期细胞凋亡率为22.54±3.19%,与除PT67-80as组外的其余各组相比有显著差异(P<0.05);PT67-40as和PT67-80as处理组细胞PKR磷酸化水平分别增高了59.20%和60.33%,2AP能抑制PT67-40as的作用。结论成功构建重组逆转录病毒双表达载体,并发现其能抑制K562细胞生长并引起细胞凋亡,通过激活PKR抗肿瘤可望成为肿瘤新的靶向治疗策略。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 PKR 反义RNA 逆转录病毒载体 基因克隆
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阿司匹林诱导HL-60细胞凋亡的实验研究 被引量:1
14
作者 罗云 唐宗山 黄宗干 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期318-321,共4页
目的 :研究非甾体类抗炎药阿司匹林 (ASA)对体外诱导人急性白血病细胞的凋亡作用及其相关机制。方法 :采用MTT法测定ASA对HL - 6 0细胞的抑制率 ,通过光镜、流式细胞仪 (FCM)、原位末端标记法 (TUNEL)观测ASA诱导HL - 6 0细胞凋亡 ,半定... 目的 :研究非甾体类抗炎药阿司匹林 (ASA)对体外诱导人急性白血病细胞的凋亡作用及其相关机制。方法 :采用MTT法测定ASA对HL - 6 0细胞的抑制率 ,通过光镜、流式细胞仪 (FCM)、原位末端标记法 (TUNEL)观测ASA诱导HL - 6 0细胞凋亡 ,半定量RT -PCR检测基因表达。结果 :浓度为 2 .5~ 10mmol/L的ASA能抑制HL - 6 0细胞增殖 ,诱导细胞凋亡 ;ASA与阿糖胞苷 (Ara -c)抗肿瘤作用具有相加效应 ;ASA可下调HL - 6 0细胞c -mycmRNA水平表达。 结论 :一定浓度ASA在体外有抑制急性白血病细胞生长和诱导细胞凋亡的作用 ,其机制可能与c-myc基因下调有关。 展开更多
关键词 阿司匹林 细胞凋亡 HL60
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柔红霉素体外对HL-60细胞的凋亡作用 被引量:1
15
作者 陈敏 冯文莉 黄宗干 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2002年第1期59-61,共3页
目的:了解柔红霉素(DNR)体外作用于HL-60 细胞时产生凋亡的规律及一些相关蛋白表达的变化。方法:应用光镜、DNA电泳及FCM检测HL-60细胞发生的凋亡模式;用IC、FCM观察相关蛋白的变化。结果:当DNR浓度... 目的:了解柔红霉素(DNR)体外作用于HL-60 细胞时产生凋亡的规律及一些相关蛋白表达的变化。方法:应用光镜、DNA电泳及FCM检测HL-60细胞发生的凋亡模式;用IC、FCM观察相关蛋白的变化。结果:当DNR浓度为0.2μM~2μM时,HL-60细胞发生的凋亡率随浓度的增加与作用时间的延长而升高,可见典型的凋亡细胞及明显的DNA梯度条带。1μM DNR作用2h时,bcl-2与c-myc的荧光强度指数(FI)降低,bax、caspase-3 的 FI 升高;而作用5h时,bax、caspase-3的FI值反而降低。结论:一定浓度的DNR在体外可诱导HL-60细胞凋亡,它可抑制bcl-2与c-myc蛋白的表达,而激活bax、caspase-3蛋白的表达。 展开更多
关键词 柔红霉素 细胞凋亡 白血病
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^(131)I-GM-CSF诱导HL-60细胞凋亡机制的体外研究 被引量:1
16
作者 周慷 娄世锋 张萍 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期348-351,共4页
目的:观察131I-GM-CSF诱导HL-60细胞凋亡及其机制,探讨其在急性髓系白血病放射导向治疗中的作用。方法:采用MTT法、TUNEL、透射电子显微镜研究131I-GM-CSF辐射后HL-60细胞的存活率、凋亡率和形态的改变;用流式细胞术和免疫细胞化学方法... 目的:观察131I-GM-CSF诱导HL-60细胞凋亡及其机制,探讨其在急性髓系白血病放射导向治疗中的作用。方法:采用MTT法、TUNEL、透射电子显微镜研究131I-GM-CSF辐射后HL-60细胞的存活率、凋亡率和形态的改变;用流式细胞术和免疫细胞化学方法检测线粒膜电位的改变以及凋亡相关基因的表达。结果:放射性浓度≥18.5×108Bq/L时HL-60细胞存活率显著下降。131I-GM-CSF能致HL-60细胞凋亡、超微结构破坏、线粒体膜电位降低。在诱导细胞凋亡过程中,p53表达上调,bcl-2、bcl-xl表达下调。结论:GM-CSF作为载体携带131I能诱导HL-60细胞凋亡,具有抗白血病的作用。其诱导凋亡的机制与上调p53,下调bcl-2、bcl-xl,开放线粒体膜的通透性转换孔,降低线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 细胞凋亡 放射导向治疗 白血病
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未知KL基因cDNA片段的末端快速扩增
17
作者 刘北忠 蒋纪恺 +2 位作者 何於娟 张彦 刘小珊 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第1期14-16,28,共4页
目的:为研究白血病K562细胞中未知KL基因的结构与功能,对其cDNA片段进行全长克隆。方法:采用3种RACE策略,对未知KL基因的cDNA片段进行末端的快速扩增。结果:网上LabOnWeb的instant RACE与传统的3′-RACE使未知KL基因的cDNA片段向5′末端... 目的:为研究白血病K562细胞中未知KL基因的结构与功能,对其cDNA片段进行全长克隆。方法:采用3种RACE策略,对未知KL基因的cDNA片段进行末端的快速扩增。结果:网上LabOnWeb的instant RACE与传统的3′-RACE使未知KL基因的cDNA片段向5′末端与3′末端各自延伸了156bp与350bp。结论:通过末端快速扩增,表明白血病K562细胞中未知KL基因的全长cDNA大小约为1Kb,这为我们进行该基因的全长克隆,进而研究其结构与功能奠定了基础。 展开更多
关键词 KL基因 CDNA片段 白血病 克隆 K562细胞 苦参碱
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维甲类化合物Ro13-7410对白血病细胞端粒酶活性的抑制
18
作者 刘小珊 娄陵生 +3 位作者 唐宗山 蒋纪恺 张莉萍 康格非 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 1998年第4期346-348,共3页
为深入探讨第三代维甲类化合物 Ro13-7410诱导白血病细胞凋亡和分化的机制,本文采用 PCR-ELISA 和 PCR-PAGE 两种方法观察了 Ro13-7410对 HL-60细胞端粒酶活性的影响。实验结果显示在Ro13-7410诱导 HL-60细胞凋亡和分化的过程中端粒酶... 为深入探讨第三代维甲类化合物 Ro13-7410诱导白血病细胞凋亡和分化的机制,本文采用 PCR-ELISA 和 PCR-PAGE 两种方法观察了 Ro13-7410对 HL-60细胞端粒酶活性的影响。实验结果显示在Ro13-7410诱导 HL-60细胞凋亡和分化的过程中端粒酶活性逐渐下降。结论:Ro13-7410能明显抑制 HL-60细胞端粒酶活性,且可能与白血病细胞的增殖抑制和诱导凋亡及分化作用有关. 展开更多
关键词 端粒酶 维甲类化合物 白血病 细胞凋亡
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未知基因KH开放阅读框架真核表达载体的构建及其对K562细胞增殖的影响
19
作者 何於娟 张彦 +3 位作者 刘小珊 马凌娣 欧一衡 蒋纪恺 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第5期559-562,共4页
目的 :构建未知基因KH的开放阅读框架 (openreadingframe,ORF)的真核表达体系 ,初步探讨未知基因KH的功能。方法 :采用DNA重组技术将KH基因片段的开放阅读框架 (KH -ORF)亚克隆于表达载体 pCl-neoMammalianExpres sionVector,重组为pCI-... 目的 :构建未知基因KH的开放阅读框架 (openreadingframe,ORF)的真核表达体系 ,初步探讨未知基因KH的功能。方法 :采用DNA重组技术将KH基因片段的开放阅读框架 (KH -ORF)亚克隆于表达载体 pCl-neoMammalianExpres sionVector,重组为pCI-neo -KH -ORF真核表达体系 ,脂质体转染K5 6 2细胞 ,RT -PCR检测目的基因KH的表达。采用体外培养技术 ,通过 pCI -neo -KH -ORF质粒转染K5 6 2细胞前后的生长曲线和乳酸脱氢酶活性测定观察KH -ORF对K5 6 2细胞增殖速度的影响。结果 :KH -ORF在K5 6 2细胞中获得表达 ,对细胞增殖速度有明显影响。结论 :KH -ORF表达产物可能是一个与K5 6 2细胞增殖有关的功能蛋白质 。 展开更多
关键词 KH基因 开放阅读框架 真核表达 K562细胞 增殖
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K562细胞未知基因KH的开放阅读框架在大肠杆菌中的表达
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作者 何於娟 欧一衡 +4 位作者 张彦 刘小珊 马凌娣 涂植光 蒋纪恺 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第2期124-126,共3页
目的 :构建K5 6 2细胞未知基因KH的开放阅读框架 (openreadingflame ,ORF)的原核表达体系。 方法 :采用DNA重组技术构建KH基因片段的开放阅读框架 (KH -ORF)的表达载体pCI-neo-KH -ORF ,热休克法转化大肠杆菌BL2 1(DE3)plysS ,IPTG诱导... 目的 :构建K5 6 2细胞未知基因KH的开放阅读框架 (openreadingflame ,ORF)的原核表达体系。 方法 :采用DNA重组技术构建KH基因片段的开放阅读框架 (KH -ORF)的表达载体pCI-neo-KH -ORF ,热休克法转化大肠杆菌BL2 1(DE3)plysS ,IPTG诱导后 ,SDS -PAGE鉴定目的蛋白的表达。结果 :经IPTG诱导 0 .5h后KH -ORF在BL2 1(DE3)plysS中获得表达 ,表达产物以包涵体形式存在 ,分子产量约 2 4kD。结论 :成功构建了KH -ORF的原核表达体系 ,为进一步研究其功能奠定了基础。 展开更多
关键词 K562细胞 KH基因 开放阅读框架 原核表达
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